人工栽培南方红豆杉紫杉烷成分的研究

采用溶剂萃取及多种色谱技术分离纯化,从人工栽培南方红豆杉中分离得到紫杉醇(Ⅰ)、2′-乙酰氧基-7-表-紫杉醇(Ⅱ)、(3E,7E)-2,α10,β13α-三乙酰基-5,α20-二羟基-3,8-断紫杉烷-3,7,11-三烯-9-酮(Ⅲ)和7-表-紫杉醇(Ⅳ),其中化合物(Ⅱ)首次从南方红豆杉分离得到。     

紫杉醇聚α－氰基丙烯酸正丁酯纳米粒的研究

目的：选择紫杉醇聚α-氰基丙烯酸正丁醋纳束粒制备的优化工艺条件,井研究其相关理化性质。方法：分别用一步法和二步法削备TAX—PBCA—NP,并分别采用多种配方钢备。用透射电镜表征纳米柱子的形态,结果与结论所确定的制备TAX—PBCA-NP工艺条件稳定．可行。     

种子细胞的生长时相和紫杉醇生产的关系研究

处在生长周期不同时相的红豆杉细胞作为种子细胞,接入含来自红豆杉树皮的真菌诱导子的生产培养其中,紫杉醇的生产和种子细胞的生长时相有明显的对应关系。来自对数生长后 稳定前期的细胞,胞内紫杉醇分别为２６．８μｇ．ｇ＾－１和５８．１μｇ．ｇ＾－１;来自稳定后期的细胞对诱导子反应最敏感,     

稀土对红豆杉细胞内游离钙含量的影响

采用Ｆｕｒａ－２／ＡＭ双波长荧光分光光度计测定了稀土不同作用时间和不同剂量,以及红豆杉细胞不同生长时期和在钙通道阻断剂存在的情况下,红豆杉细胞内游离钙离子浓度的变化,实验结果表明,稀土对红豆杉细胞内钙离子浓度的影响随作用时间和剂理的不同而改变,细胞不同的生长时期对稀土的敏感程度不同,引外发现稀土引起细胞内钙离子浓度的振荡是由于胞内钙库释放和胞外钙内流所致。     

紫杉醇类似物结构与活性关系模型

用分子场分析方法,对含有不同药效基团的紫杉醇类似物进行了三维这量构产研究,建立了具有较强预测能力的结构与活性关系模型,该模型的建立对于指导具有生活活性的新的紫杉醇类似物的研究与开发和减少合成的盲目性具有重要意义。     

姜黄素促进紫杉醇抑制肿瘤细胞的增殖

培养的人喉癌细胞 Hep‐2及肝癌细胞HepG‐2,分别用不同浓度姜黄素（CUR ,0～50μmol／L）和紫杉醇（PTX ,0～5 nmol／L ）单独处理或联合处理（5μmol／L CUR＋0．5 nmol／L PTX、10μmol／L CUR＋0．5 nmol／L PTX）．处理48 h后,用WST‐1细胞增殖试剂盒检测细胞增殖情况,再用结晶紫染色检测活细胞的密度,最后用Hoechst 33258凋亡染色试剂盒检测细胞凋亡情况．结果显示：姜黄素或紫杉醇单独处理对 Hep‐2细胞和 H epG‐2细胞的增殖均有抑制作用,并呈现出一定剂量效应关系;姜黄素与紫杉醇联合处理后细胞的增殖速率要比紫杉醇单独处理的明显降低;同时,姜黄素与紫杉醇联合处理后细胞的凋亡要比紫杉醇单独处理的更为明显．上述研究结果说明,姜黄素对紫杉醇抑制肿瘤细胞H ep‐2和H epG‐2的增殖有促进作用,并能促进紫杉醇诱导细胞的凋亡．     

紫杉醇注射液杂质检查方法建立

目的对有关物质检查方法筛选,建立紫杉醇注射液有关物质检查方法。方法采用高效液相色谱法,色谱柱为Ultimate柱(250mm*4.6mm,5μm),以乙腈:水为流动相,进行梯度洗脱,柱温40℃,流速为1.0m L/min,检测波长为230nm。结果辅料对有关物质测定无干扰,耐用性试验表明色谱条件微小变化杂质检出基本一致,溶液稳定性研究结果表明溶液在8h内稳定,该品检测限溶液溶度为97ng/m L,专属性试验结果表明各条件下降解产物与主峰可有效分离。结论梯度洗脱检查杂质更准确,方法学试验各项指标符合规定,可用于该品有关物质检查。     

两亲嵌段聚合物载药胶束的绿色制备技术

为了避免制备过程中有机溶剂的使用,开发了一种两亲嵌段聚合物载药胶束的新型绿色制备法--超临界二氧化碳挥发法,在自制的实验装置中成功制备了聚(2-甲基丙烯酰氧乙基磷酰胆碱)-聚甲基丙烯酸正丁酯(PMPC-b-PBMA)载紫杉醇胶束.该胶束具有较规则的球形形貌和较小的粒径分布,平均粒径为54nm,药物的包封率和载药量分别为61.0%和12.2%,与有机溶剂挥发法制备的胶束相当.体外释药动力学研究结果表明,该胶束可在人体血液环境中平缓释药,132h内的释药量达到55%,远高于采用有机溶剂挥发法制得的胶束.超临界二氧化碳挥发法有望成为缓释药物体系的新型制备法.     

负载紫杉醇的两亲性共聚物纳米粒

紫杉醇是一种天然抗癌药物，采用自乳化溶剂蒸发法制备了负载紫杉醇的聚乙二醇／聚己内酯三嵌段共聚物纳米粒(PMT)，运用动态光散射(DLS)测定PMT的粒径和粒径分布，并用透射电子显微镜(TEM)表征形态结构。同时，还研究了投药量对PMT的影响及PMT的体外药物释放行为。实验结果表明：PMT的粒径为纳米级，且随着共聚物相对分子质量和载药量的增大而增大；PMT的体外释放无突释现象，释放速率缓慢。     

东北红豆杉细胞GGPPS基因cDNA的克隆

牻牛儿基牻牛儿基焦磷酸合成酶是红豆杉细胞紫杉醇生物合成途径中的关键酶。试验采用RT-PCR技术从东北红豆杉中克隆GGPPS基因片段,将GGPPS基因片段与pMD20-Tvector连接,转化E.coli DH5α,对阳性克隆进行序列测定。生物信息学分析结果表明,获得GGPPS基因片段长度为371 bp,与GenBank中收录的GGPPS同源性达到99%。为从内生真菌紫杉醇生物合成途径中克隆关键酶基因和高产紫杉醇基因工程菌株的构建提供了借鉴。