东北红豆杉细胞悬浮培养研究

东北红豆杉（Taxus cuspidata sieb et zucc)幼茎诱导的愈伤组织经多次继代培养，选择生长旺盛，紫杉醇含量高的愈伤组织进行细胞悬浮培养，建立了东北红豆杉细胞悬浮系，同时，对影响愈伤组织进行细胞悬浮培养，建立了东北红豆杉细胞悬浮系，同时，对影响愈伤组织继代培养及细胞悬浮培养的条件进行了研究，确定了适合愈伤组织生长的条件以及影响细胞悬浮培养的主要因素。     

质谱直接进样法定性定量检测紫杉醇

介绍了采用质谱直接进样技术测定紫杉醇的方法,与传统的液相法测定紫杉醇技术比较,可降低昂贵的标样使用量,免去流动相的费用.讨论了质谱运行条件的选择和操作中应注意的问题.     

模拟移动床分离紫杉醇

以东北红豆杉树叶为原料,采用无毒、无污染的乙醇作为提取溶剂．在高分子树脂柱和模拟移动床色谱(SMBC)系统上逐级提纯紫杉醇,除去大量非紫杉烷与紫杉烷类杂质,得到了高纯度的产品、同时,对紫杉醇前处理过程中洗脱液条件,随后的SMBC系统实验中的切换时间等条件进行了优化,并总结出一套优化操作条件,为纯化紫杉醇提供了合理的工艺路线．     

红豆杉植物愈伤组织的培养及其紫杉醇形成的初探

不同品种的红豆杉外植体及同一品种的不同外植体，其愈伤组织的发生率、发生速度、发生状况有所不同，激素种类及浓度对愈伤组织的诱导及生长有较大影响，适量的水解酪蛋白和抗坏血酸能促进愈伤组织生长，继代培养以２５～３０天为一代较好，接种量以０．７５～１．２５ｍ／５０ｍｌ培养基为宜，薄层层析结果表明，云南红豆杉细胞培养物中存在着紫杉醇（Ｔａｘｏｌ）。     

紫杉醇对SMMC-7721肝癌细胞的增殖抑制

目的研究紫杉醇(PTX)对肝癌细胞SMMC-7721的生长抑制的作用。方法应用MTT法观察紫杉醇对SMMC-7721的生长抑制作用。结果紫杉醇对肝癌细胞SMMC-77211有明显的生长抑制作用,其IC50为21.6nmol/L。结论紫杉醇对SMMC-7721有明显的生长抑制作用。     

非小细胞肺癌细胞A549对紫杉醇耐药机理研究

目的利用非小细胞肺癌细胞对紫杉醇的耐药株A549/taxol,研究其对紫杉醇耐药性的分子机理.方法通过长时间低浓度的紫杉醇处理A549细胞的方法获得其耐药细胞株A549/taxol,提取细胞总RNA并逆转录为cDNA,实时荧光定量PCR观察其凋亡基因的表达情况,并通过不同siRNA处理细胞进行基因沉默,研究其在不同遗传背景下对紫杉醇的耐受情况.结果发现非小细胞肺癌细胞对紫杉醇的耐药株A549/taxol的基因表达紊乱,表现为ING5的高表达抑制了凋亡基因Bcl-2的表达水平,而Bcl-2是紫杉醇诱导细胞凋亡所必需的.结论以上结果初探了A549对紫杉醇耐药性的机制,为探寻紫杉醇化疗新策略提供了新的思路.     

从植物分离产紫杉醇的内生真菌的研究

将生于秦岭地区的中国红豆杉树皮中分离得到的一株内生真菌,在马铃薯培养基中进行发酵试验,用薄层层析、薄层扫描检测。分析结果表明这株真菌能合成紫杉醇,高效液相色谱技术测定其紫杉醇含量约为１４．２０μｇ／Ｌ。     

红豆杉抗癌有效成分的研究

利用藏产红豆杉（ Ｔａｘｕｓ Ｗａｌｌｉｃｈｉａｎｓ Ｚｕｃｃ） 的小枝叶,经粉碎,用有机溶剂提取,提取物进行极性溶剂的梯度萃取,色谱柱分离,分段洗脱收集,将各收集部位分别结晶,得两个结晶物。将结晶物经理化检测,光谱分析鉴定,其结构为Ｉ（ＢａｃｃａＴｉｎ） 和Ⅱ（Ｃｅｐｈｉｏｍａｎｉｎｅ） 。经活性实验研究,它们均有较强的抗癌作用。     

代谢途径的调节对紫杉醇生物合成的促进作用

通过采用一些代谢调节剂,研究了红豆杉细胞中一些初生代谢途径以及甲瓦龙酸（ＭＶＡ）途径与紫杉醇生物合成的关系,并对这些调节剂的协同作用进行了工艺研究．结果表明,第１５ｄ加入１００ｇ／Ｌ黄豆芽提取液、１００ｍｇ／Ｌ丙二酸钠和６．２ｍｇ／Ｌ硼酸,或第１５ｄ加入４２．７ｍｇ／ＬＣＣＣ,２５．６ｍｇ／Ｌα－蒎烯及１１．５ｍｇ／ＬＥＧＴＡ,其协同作用都能显著提高紫杉醇的产量．此外,试验结果表明真菌诱导物对细胞的影响与Ｃａ离子通道变化引起的信号传导有关．