非手术性牙周治疗改善肥胖伴牙周炎大鼠肾功能异常和氧化应激状态

目的:观察非手术性牙周治疗对肥胖伴实验性牙周炎大鼠肾功能和氧化应激水平的影响.方法:45只SD大鼠随机分为健康对照组、肥胖对照组、肥胖伴实验性牙周炎组和牙周治疗组.通过HE染色观察牙周和肾组织结构改变,并检测血清肌酐水平及肾脏的丙二醛(MDA)、8-羟基脱氧鸟苷(8-OHd G)、还原性谷胱甘肽(GSH)含量和总超氧化物歧化酶(SOD)活力.结果:肥胖伴实验性牙周炎组的牙周组织破坏明显,肾小管上皮病理结构出现早期破坏.牙周治疗组的血清肌酐水平[(26. 38±1. 51) mmol/L]显著低于肥胖伴实验性牙周炎组(30. 13±2. 47) mmol/L(P=0. 001).牙周治疗组肾脏的MDA(6. 29±1. 24) n M/mgprot、8-OHd G(0. 32±0. 14) ng/gprot水平显著低于肥胖伴实验性牙周炎组MDA(7. 88±1. 99) n M/mgprot、8-OHd G(0. 50±0. 26) ng/gprot(P 0. 05);牙周治疗组肾脏的GSH水平[(55. 85±7. 26)μmol/gprot]显著高于肥胖伴实验性牙周炎组[(43. 91±12. 48)μmol/gprot](P=0. 041);牙周治疗组的SOD活力与肥胖伴实验性牙周炎组的无统计学差异(P 0. 05).结论:非手术性牙周治疗可一定程度改善肥胖伴实验性牙周炎大鼠肾功能异常和氧化应激状态.     

血浆和尿液8-OHdG含量作为运动机能监控标志物的可行性分析

15名青年男子田径运动员在功率自行车上进行一次力竭运动,于运动前1d(Baseline)、运动前(Pre-Ex)、运动后即刻(Post-Ex)、运动后24h(Post-24h)、48h(Post-48h)和72h(Post-72h)分别测定肌肉酸痛强度,血浆、尿和淋巴细胞中8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)含量以及血浆中肌酸激酶(CK)活性和丙二醛(MDA)含量,探讨8-OHdG作为运动机能监控标志物的可行性.结果显示,肌肉酸痛强度在运动后即刻明显升高(P0.01),24h达峰值(P0.01),72h恢复至正常水平;血浆CK活性在运动后24h开始升高(P0.01)并持续至72h(P0.01);血浆MDA含量和淋巴细胞8-OHdG含量均在运动后即刻显著升高(P0.01),24h恢复至安静水平(P0.05);血浆和尿液中8-OHdG含量在各时间点均无显著性变化(P0.05).血浆和尿液中8-OHdG含量在Baseline、Pre-Ex的两次测试间均无显著性差异,日间变异系数(CV)分别为72.8%(95%CI:57.2%~99.9%)和87.8%(95%CI:66.1%~130.5%).ELISA法测定8-OHdG的批内CV为2.25%~4.67%,批间CV为5.25%~7.12%.以上结果表明,虽然力竭运动可造成氧化应激、淋巴细胞DNA损伤和运动性肌肉损伤,但由于血浆和尿液中8-OHdG含量存在显著的日间生物节律变异,因此可能不是运动机能监控(DNA氧化损伤及过度疲劳)的敏感标志物.     

硫酸铈诱导果蝇氧化应激及细胞凋亡的研究

本实验主要研究了稀土硫酸铈（Ce（SO4）2）对果蝇氧化应激生物标记物和细胞凋亡的影响.果蝇培养在不同质量浓度（1,4,16,64,256,1 024 mg/L）的硫酸铈培养基中,分别测定其SOD,CAT和脂质过氧化产物（即MDA含量）,同时用彗星电泳和体外切割DNA实验来检测果蝇细胞中DNA损伤程度,用DNA Laddering法和TUNEL法测定稀土元素Ce对果蝇细胞凋亡的影响.与对照组相比,当Ce（SO4）2质量浓度低于16 mg/L时,果蝇体内SOD和CAT活性显著增加,MDA含量变化不明显;而当Ce（SO4）2质量浓度高于16 mg/L时,SOD和CAT活性明显下降,MDA含量上升.彗星电泳的结果表现为随着硫酸铈剂量的递增,果蝇中肠细胞的彗星率、彗星尾长和Olive尾矩增加,并表现为明显的剂量效应关系.果蝇体外实验结果表明,硫酸铈能打断DNA,使其片段化;同时,TUNEL结果显示果蝇中肠细胞呈现凋亡细胞的特征性蓝绿色颗粒,但DNA琼脂糖电泳没有表现出细胞凋亡特征性的梯形条带图谱.硫酸铈诱导果蝇的氧化应激可以使果蝇中肠细胞SOD和CAT活性降低,MDA含量上升,使中肠细胞出现凋亡特征.由此推断,硫酸铈可诱导果蝇细胞中遗传物质的损伤,对果蝇有一定的氧化毒性和遗传毒性作用．     

游泳运动对2型糖尿病大鼠心肌TGF-β_1/CTGF基因表达和胶原代谢的影响

选取雄性SD大鼠作为实验对象,并随机分为正常组(NC,10只)、糖尿病组(DM,14只)和糖尿病运动组(DME,20只),后两组通过6周高脂饲料喂养和腹腔注射链脲佐菌素(STZ)建立2型糖尿病大鼠模型,建模成功后,糖尿病运动组(DME)进行为期10周的游泳运动,最后检测大鼠血液主要血清酶和心肌转化生长因子(TGF-β1)/结缔组织生长因子(CTGF)基因表达水平及胶原代谢的变化.结果显示,与正常组(NC)比较,糖尿病组(DM)大鼠血液葡萄糖(GLU)、乳酸脱氢酶(LDH)、谷草转氨酶(AST)、肌酸激酶(CK)和心肌羟脯氨酸(HYP)、氧化应激及TGF-β1 mRNA、CTGF mRNA表达水平均显著升高(P<0.01),而上述指标在糖尿病运动组(DME)均显著降低(P<0.05或P<0.01),但仍显著高于正常组(NC)(P<0.05或P<0.01).以上结果表明:长期游泳运动对2型糖尿病大鼠心肌胶原代谢紊乱具有一定的改善作用,其机制可能与游泳运动可以降低2型糖尿病大鼠血糖和心肌氧化应激水平及TGF-β1/CTGF基因表达水平有关.     

雌激素对H_2O_2诱导PC12细胞氧化应激的保护作用研究

为了探讨雌激素对H2O2诱导PC12细胞氧化损伤的影响及其可能机制.用H2O2处理PC12细胞建立氧化应激模型,并加入雌激素预处理作为保护.MTT法检测细胞活力,利用荧光探针对细胞内ROS进行荧光染色检测荧光强度,Hoechst/PI荧光染色,分析细胞凋亡情况,Western blotting检测MAPK(Mitogen-Activated Protein Kinase)的磷酸化水平.结果显示:H2O2作用于PC12细胞后显著降低细胞活力,10-8～10-6mol/L的雌激素预处理后均能部分阻断H2O2对细胞活力的影响.H2O2能显著增强PC12细胞的ROS荧光强度,雌激素可明显减少H2O2处理后PC12细胞内的ROS含量.H2O2激活MAPK,而雌激素抑制了p38的磷酸化,增加了ERK的磷酸化.以上结果表明,雌激素可以拮抗H2O2诱导的氧化应激,抑制p38的磷酸化,增强ERK的磷酸化可能是其发挥保护作用的机制之一.     

糖尿病中氧化应激的增加及与运动的关联

氧化应激是机体活性氧成分与抗氧化系统之间平衡失调而引起的一系列适应性的反应。氧化应激的增加与糖尿病及其并发症有着密切的关系。研究证实，许多相关的机制会导致糖尿病患者活性氧和形态氮产量增加，氧化应激增加，抗氧化保护减少。规律运动能预防和治疗包括糖尿病在内的一些慢性疾病，运动已被证实了可以调节抗氧化保护。     

异常黑胆质成熟剂和清除剂对氧化应激的相关蛋白表达及其凋亡的影响

为了阐明临床治疗异常黑胆质性疾病有效的成熟剂和清除剂的作用机理,以H2O2诱导淋巴细胞的氧化应激模型,在细胞和分子水平上研究2种复方对氧化应激的相关蛋白表达、细胞凋亡的影响。采用western-blot研究淋巴细胞Bcl-2、NF-κB的表达;用荧光显微镜的双苯咪唑(Bisbenziimide)类Hoechst33258法检测分析凋亡指数、评价细胞凋亡的情况。结果显示,异常黑胆质成熟剂能够上调Bcl-2蛋白的表达,而清除剂能够下调该蛋白的表达,二者的作用相反。异常黑胆质成熟剂和清除剂能显著地抑制H2O2诱导的NF-κB激活,而前者本身却能促进NF-κB的活化,并且能抑制氧化应激诱导的淋巴细胞凋亡。由此得出结论:H2O2诱导淋巴细胞氧化应激模型的体外实验系统是研究传统医药复方生物效应信息的途径之一;异常黑胆质成熟剂及清除剂对氧化应激的淋巴细胞Bcl-2蛋白表达、NF-κB激活以及细胞凋亡的作用明显不同,提示两种复方临床应用有效性的作用机制与氧化应激诱导的细胞凋亡有关。     

酿酒酵母氧化应激系统的结构生物学基础

酿酒酵母是目前研究背景最为清楚的单细胞真核生物,迄今已知有78个基因编码的蛋白质直接参与其氧化应激反应.这些蛋白质按照功能可以被分为三大类:感应蛋白、调控蛋白和效应蛋白.我们从效应蛋白出发,沿着硫氧还蛋白系统和谷氧还蛋白系统的电子传递路线,逐一解析了所有关键节点蛋白质的三维结构.结合这些蛋白质的生化性质研究、蛋白质-蛋白质复合物的鉴定和结构解析,以及酵母基因组数据库中日益更新的实验数据,我们已初步建立参与酵母氧化应激反应的效应蛋白在原子分辨率上的相互作用网络.这些研究将为我们理解人类氧化应激反应的作用机理提供重要提示,进而可能用于疾病治疗和抗衰老药物的设计.     

过氧化氢诱导前列腺癌PC3细胞HSP60表达和Akt蛋白磷酸化的研究

以不同浓度H_2O_2刺激PC3细胞24h,应用MTT法分析细胞活力变化,并采用蛋白印迹方法检测HSP60蛋白、Akt蛋白(总Akt蛋白)和磷酸化Akt蛋白的表达水平.结果表明,15.625μmol/L的H2O2可诱导PC3细胞内HSP60表达显著升高(p0.05),7.312μmol/L和15.625μmol/L的H_2O_2均会导致磷酸化Akt蛋白的量显著下降(p0.01),但该两种浓度的刺激对细胞内总Akt蛋白量并无显著影响(p0.05).     

运动诱导中性粒细胞的呼吸爆发及其氧化应激损伤——运动性疲劳的自由基学说的活性氧产生特点及其途径之一

目的:探讨运动引起中性粒细胞呼吸爆发与氧化应激及其过氧化损伤的关系,从而为运动引起的过氧化损伤导致的运动性疲劳的诊断及其防御提供理论根据.方法:通过文献法及逻辑推理法分析运动诱导中性粒细胞的呼吸爆发过程及其产生的活性氧对机体的氧化损伤导致的运动性疲劳的特点.结果:运动激活中性粒细胞NADPH氧化酶介导产生活性氧增多导致中性粒细胞的氧化应激反应,而体内活性氧增多引起的运动性疲劳体内的发生机理是运动诱导的中性粒细胞氧化应激导致的过氧化损伤所致.结论:运动引起中性粒细胞的氧化应激和过氧化损导致免疫细胞功能降低及其运动性疲劳发生的主要因素,可通过抗氧化剂、谷氨酰胺补充、NADPH氧化酶的抑制等手段进行防护.