定点突变提高豆豉纤溶酶的酶活力和底物特异性的研究

以pBE—DFE质粒为模板,采用反向长距离PCR技术对豆豉纤溶酶(Douchi Fibrinolytic Enzyme,DFE)基因进行定点突变,使位于酶的底物结合区第156位的谷氨酸和第166位的甘氨酸分别替换为丝氨酸和丙氨酸,使临近酶的底物结合区的第169位甘氨酸残基替换为丙氨酸,获得了三个突变体E156S,G166A和G169A.将含突变基因的表达载体转化枯草杆菌WB800,构建了豆豉纤溶酶基因突变体的表达菌株WB800(E156S);WB800(G166A)和WB800(G166A).将3种表达菌株进行液体发酵培养,结果发现发酵上清液中纤溶酶的纤溶活性为460,790和900U/mL,分别是未突变酶活性(660U/mL)的70%,115%和136%;3种突变酶对合成底物的H-D-Val-Leu-Lys-pNA的酰胺水解活性是未突变酶的17%,125%和121%.     

交织多址接入系统定点Logistic交织序列生成算法

交织多址接入(interleave division multiple access, IDMA)技术作为典型的非正交多址接入技术,受到学术界和产业界的广泛关注。为降低IDMA系统多用户检测过程存储空间和计算复杂度,采用双极性化的定点Logistic序列与待(解)交织序列对应相乘方式完成(解)交织;同时,为降低任意量化比特长度的定点Logistic序列生成过程时延,采用现场可编程逻辑门阵列进行生成。利用Logistic系统李雅普诺夫指数,确定处于混沌状态的定点Logistic序列量化比特长度;基于平衡度和互相关门限,确定定点Logistic序列开始位置和初值;采用查表法构建非对称基本乘法器,并采用移位相加法计算总乘法器。仿真结果表明,所提算法可以充分利用Logistic序列混沌、平衡度、相关等特性,具有较好的误码率性能。     

Oligo诱导突变的改进方法

介绍一种改进的Ｏｌｉｇｏ诱导ＤＮＡ定点突变方法，此法制备的含Ｕ野生型模板ＤＮＡ在ＪＭ１０７中的存活率从５％￣１０％下降至１％￣２％，诱变反应终产物转染ＪＭ１０７产生的斑数比原法提高１５￣２０倍，诱导连续４个核苷酸替换产生的突变频率达８０％￣８５％，即使诱导连续１２个核苷酸的缺失，也能获得４０％￣５０％的突变频率。     

基于Modelsim的几位定点乘法器设计

本文介绍了八位定点乘法器的设计思想，提出了其设计原理和系统模型，在Modelsim环境下实现了其电路原理图设计，并通过仿真进行了验证。     

空勤学员跳伞着陆时受伤的原因及预防方法

本文通过对我院近十期空勤学员跳伞着陆时受伤的追踪调查。运用科学的体育理论,分析学员在跳伞着陆时发生受伤的原因,受伤规律和对身体素质的要求等问题,以达到预防损伤的目的。为伞勤教员改进教学方法,组织跳伞训练和安全跳伞提供依据。     

众女子高空垂直跳伞创纪录

近日，来自世界各地的65名女性齐聚美国亚利桑那州埃洛伊农场，参加世界级高空垂直跳伞比赛。65名女子5000米高空垂直跳伞创纪录，此次参赛女性的数量，打破了2010年由41名女性参赛者创下的记纪录。在经过12次试跳后，这项最新的世界记纪录成功获得国际航空联合会的认可。据美国降落伞协会运动推广主任南希介绍，此次65名参赛者是从3架翱翔在5486米高空的飞机上垂直跳下的。5000米高空垂直跳伞，这些”巾帼不让须眉”的女性参赛者来自不同的地方，     

轴向位移监测的安装及调试

本文将要说明轴向位移监测系统在安装时要考虑的重要问题,这些问题包括：（1）冷活动区和热活动区的概念。（2）前置器型传感器系统的线性区与大轴可能的变化范围的关系。并简要介绍了轴向位移监测系统对机组安全运行的重要性,并对其在安装、调试、运行阶段进行了分析,使轴向位移监测更好的服务于机组的安全、稳定的运行。     

K.pneumoniae XJPD-Li甘油脱水酶基因的定点突变及其性能研究

针对菌株K.pneumoniae XJPD—Li高效转化生产1,3-丙二醇的特性,将其甘油脱水酶与已知报道的甘油脱水酶（U60992）的序列比对分析,根据差异位点设计了Nβ471的定点突变,利用反向PCR定点突变技术构建了甘油脱水酶（dhaBCE）的突变体质粒M1821,并在E．coli BL21（DE3）中高效表达。SDS—PAGE结果显示,诱导表达后在相对分子质量66、24、16KD出现三条特征条带,与预期结果一致。突变体M1821甘油脱水酶的比酶活为38．7U／mg,催化反应最适pH为8．0,最适温度为40℃,与未突变重组甘油脱水酶比较,最适温度降低了约5℃。     

时事·人力资源和社会保障部

1．2月19日．据海南省社保局消息．2013年全省各县市基本医疗保险统筹基金支付在100万元以上的定点医疗机构．原则上要实行总额预付制管理。     

海军哥们儿练跳伞

神兵天降？没错，那是空降兵的拿手好戏!趁着夜色从飞机上一跃而出，神不知鬼不觉地突然插入敌人后方，给敌人来个措手不及，这就叫做垂直打击，够牛气!