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111.
112.
基于前期对固氮酶催化过程中存在两条电子传递通路的推论,探索从与P原子簇共价相连的β-93Cys出发至FeMoco之间重要的氨基酸位点.通过分析固氮酶钼铁蛋白的结构,利用体外定点突变和基因替代技术,将产酸克氏杆菌(Klebsiella oxytoca)固氮酶β-102Asn,α-431Lys和α-423Ile位点分别替换为β-102Ala,α-431His和α-423Pro,获得Nβ102A,Kα431H和Iα423P突变株.3个突变对细菌固氮生长有不同程度的影响,其中Iα423P突变株几乎无固氮生长,细胞乙炔还原活性显著下降;在42 L发酵罐中培养,其细胞最高固氮酶活性仅为野生型菌株的1/6;qRT-PCR检测发现此突变株nifD基因4倍的上调表达.分离纯化Iα423P钼铁蛋白,其最高C2H2和H+还原水平分别为野生型的13%和21%.根据以上研究结果推论,突变固氮酶的催化活性显著降低,或与直接打破α-423Ile与高柠檬酸长臂之间的氢键有关,推测α-423Ile是固氮酶催化底物还原过程中,电子经高柠檬酸长臂进入活性中心Mo位的入口氨基酸. 相似文献
113.
回顾蛋白质工程研究及应用技术、手段和方法,分析定点突变及化学修饰在改造蛋白质分子结构与功能方面的异同。定点突变技术可以随心所欲地在已知DNA序列中取代、插入或缺失一定长度的核苷酸片段。该方法与使用化学因素导致突变的方法相比,具有突变率高、简单易行、重复性好的特点。 相似文献
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运动发酵单胞菌(Zymomonas mobilis)是目前发现的乙醇发酵能力最强的微生物之一,被认为是进行大规模乙醇生产的潜在菌种,但其可利用的碳源范围窄.对其进行分子生物学基础研究和基因工程改造的工作早在上世纪八、九十年代就开始了,但基于其独特的生物学特性,至今遗传操作手段仍不成熟.以大肠杆菌(E.coli)pBR328为出发质粒,分段插入带Z.mobilis乳酸脱氢酶基因ldh、分别作为左右同源臂、1.5 kb大小的DNA片段,构建了Z.mo-bilis定点整合型质粒pBR328-ldhR-ldhL(6 239 bp),此质粒两同源臂片段即ldhR和ldhL的中间有稀有酶切位点NotI和SfiI,以方便插入待整合片段.经Notl位点插入1 216 bp氯霉素抗性基因cml,将相应质粒pBR328-ldhR-cml-ldhL以环型和线型形式分别电击转化Z.mobilis ZM4菌株,都成功筛选到了ZM4 ldh::cml菌株,证明此定点整合质粒是方便可用的,为对Z.mobilis的定点遗传操作提供了很好的基础. 相似文献
115.
随着计算机软硬件的快速发展,交会定点内业计算处理迫在眉睫.在简要介绍前方交会、后方交会以及边长交会的理论基础上,通过分析各种交会定点的计算过程,给出其所对应的数据结构.利用VC++对交会定点方法进行程序设计,并利用实地数据验证.从而进一步提升了工程测量内外业一体化进程. 相似文献
116.
通过NCBI(美国国立生物技术信息中心)对黑曲霉的来源外切葡聚糖酶基因(cbh1)的氨基酸序列进行分析,发现其16个活性部位中有6个位点附近的氨基酸为毕赤酵母(Pichia pasto-ris)表达的稀有密码子。利用反向长距离PCR技术将这些活性位点附近的稀有密码子定点突变为毕赤酵母表达偏爱密码子。将优化后的表达载体pPICZαA-cbh1m转入毕赤酵母KM71H菌株中进行诱导表达。经密码子优化后的cbh1m基因较未优化前cbh1基因的表达量提高了17%。 相似文献
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118.
范振宇 《科技导报(北京)》2020,38(19):16-19
交通运输具有很强的基础性和先导性作用,是贫困地区破解经济社会发展瓶颈的关键。交通运输部始终以习近平新时代中国特色社会主义思想为指导,坚持精准扶贫、精准脱贫,以“三区三州”等深度贫困地区为重点,强化组织保障,突出规划引领,从严督导考核,多措并举持续加大政策资金倾斜和工作力度,精准扎实开展交通扶贫脱贫攻坚各项工作。在各方的共同努力下,交通扶贫成效显著,“行路难”“运输难”民生问题得到有效解决,贫困地区基本建成了“外通内联、通村畅乡、客车到村、安全便捷”的交通运输网络,为决战决胜脱贫攻坚、全面建成小康社会提供了坚实保障。 相似文献
119.
概述了小型生猪定点屠宰场在规划建设、设施设备、生产方式、屠宰管理等方面存在的一些突出问题。这些问题对肉品质量安全十分不利。建议通过搞好普法宣传和教育、优化行业布局和管理、严格审查条件和整改、落实监管措施和责任、加大政策保障和扶持等措施进行改进,确保肉品质量和公共卫生安全。 相似文献
120.
改进的独立分量分析算法 总被引:1,自引:1,他引:0
对独立分量分析算法的基本理论和FastICA算法进行了简要介绍.传统的FastICA算法只具有二阶的收敛速度,为了提高独立分量分析算法的收敛速度,减少迭代次数和运行时间,提出了一种改进的独立分量分析算法——五阶收敛的牛顿迭代法.对牛顿迭代算法加以修正,使改进的独立分量分析算法具有五阶的收敛速度.图像信号分离仿真实验表明,改进算法与传统的FastICA算法在分离效果相当的情况下,明显减少了传统的FastICA算法的迭代次数和运行时间,提高了收敛速度和运行效率. 相似文献