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91.
尾静脉大容量快速注射法介导的人凝血因子Ⅸ基因在小鼠肝内的高效表达 总被引:3,自引:0,他引:3
尾静脉大容量快速注射裸质粒DNA能够介导外源基因在动物肝内高效表达, 采用此方法将人凝血因子Ⅸ(hFⅨ)表达质粒pCMV-hFⅨ 2.2 mL于7 s内导入小鼠体内, hFⅨ在小鼠体内表达水平最高为2921 ng/mL(血浆). hFⅨ表达水平与裸质粒DNA注射剂量呈正相关, 重复注射的hFⅨ表达水平偏低(最高1459 ng/mL). PCR检测发现小鼠多种器官中存在hFⅨ cDNA, RT-PCR和免疫组化切片检测表明, hFⅨ mRNA和蛋白主要在肝脏中表达. 转氨酶水平与病理切片检测表明, 注射1 d后5%的肝脏细胞受到损伤, 但在3 ~ 10 d内恢复. 研究结果表明, 尾静脉大容量快速注射法能够介导hFⅨ在小鼠体内高水平表达, 为基因治疗研究提供了一项简便而实用的动物实验手段. 相似文献
92.
重组人巨细胞病毒(HCMV)嵌合肽在毕赤酵母中的表达 总被引:2,自引:1,他引:2
目的:在巴期德毕赤酵母中表达人巨细胞病毒gp52C末端和pp150C末端串联片段的嵌合肽,方法:用SacI和BglⅡ分别酶切CMVp-pPIC9K重组质粒,电打孔法导入毕赤酵母GS115后,在缺组氨酸的MD板上筛选出转化子,然后根据甲醇利用快速型(Mut^ )和甲醇利用缓慢型(Mut^s)菌株的不同生长特点,筛选出Mut^ 和Mut^s型转化子,用PCR法进一步鉴定阳性克隆,分别用甲醇诱导Mut^ 和Mut^s型转化子表达目的蛋白4d,取培养产物冻干浓缩,进行SDS-PAGE和Western blotting,筛选出能特异表达目的的蛋白的菌株,分析蛋白的含量及纯度。结果:重组人巨细胞病毒可在甲醇利用快速型毕赤酵母中有效表达,其表达量约占培养上清分泌蛋白的76.5%,结论:重组人巨细胞病毒(HCMV)嵌合肽可在真核细胞毕赤酵母中成功表达。 相似文献
93.
自由是对必然的认识和对客观世界的改造,它是一个历史发展的过程,没有绝对的自由。马克思主义人的全面自由发展理论不是空想,而有直接的现实意义。 相似文献
94.
应用实验生物学和计算生物学方法对重组人源抗HBsAg单链抗体(HBscFv)的部分理化性质和空间结构进行分析.首先应用蛋白质分析软件包Antheprot预测HBscFv等电点,然后等电聚焦测定HBscFv等电点,在此基础上,用神经网络法预测HBscFv二级结构,然后用同源建模的方法,获得HBscFv三级结构.结果发现,HBscFv等电点理论值为8.51,实验值为7.3~8.1;PHDsec结果表明,HBscFv是一种全β蛋白质;三级结构建模表明,HBscFv的VH结构域由9个片层组成,VL结构域由8个片层组成;由于单链抗体的特殊性,三级结构建模无法给出VH与VL结构域之间进一步折叠后形成的结构。 相似文献
95.
俞汝勤 《世界科技研究与发展》1997,19(1):14-20
本文是作者应激在国家季主办的全国第二届大学生文化素质教育试点学校工作会议上所作的大会发言,文章以湖南大学的实践为基础,讨论提高大学生文化素质的问题。着重论述了继承由岳麓书院一脉相承的千年学府的优秀教育传统进行素质教育的课题。 相似文献
96.
97.
杨豪 《广西民族大学学报》1996,(4)
本文考证了广东汉民族的主要民系──客家人的汉族亲缘,与踞粤生存的确切时间,及徙粤的目的、路线,和群体组合等。认为客家人的前身是秦代徙粤的秦人与汉民,其群体组织是多成分和多层次的。 相似文献
98.
人急性早幼粒细胞白血病动物模型,至今尚未见报导。我们将体外培养的人急性早幼粒白血病细胞袜NB4细胞(M3型)1×10 ̄6,接种在scid小鼠腹腔内,种后一个月,腹腔内长出腹水,以后每间隔3周用腹水传代,各代小鼠接种成活率为100%,目前已传35代.各代小鼠存活期稳定,平均存活时间为21,6±2.3天。对scid-APL-A细胞作生物学特性观察,其形态学、免疫学、细胞遗传学及分子学都有体外培养的NB4细胞的特点。用全反式维甲酸(ATRA)治疗scid-APL-A小鼠时,产生诱导分化作用,腹水细胞的NBT还原反应及细胞膜表面分化抗原均有所增加,同时治疗组的scid小鼠平均存活时间较对照组的明显延长。此外还观察到治疗APL常用药物阿霉素对scid-APL-A也有较强的生长抑制作用。上述结果表明。己建成的scid-APL-A可以用于评价新药或巳知治疗APL药物的动物模型。 相似文献
99.
报道了反胶束法制备免疫质体的方法,先将水溶性包裹物(如药物等)包入反胶束中;在油/水界面膜上修饰有抗体,使反胶束穿过界面膜自动组装成免疫脂质体,负染电镜照片显示免疫脂质体为单层,直径在50-400nm范围,免疫脂质体溶解实验证明羊抗人IgG已组装在脂质体上,该方法制备过程简单,包裹率、修饰率较高。 相似文献
100.
研究了显色剂4-(2-吡啶偶氮)间苯二酚(PAR)在混合表面活性剂平平加(Pergal O)和溴化十六烷基三甲基铵(CTMAB)存在下,与锌(Ⅱ)显色反应的适宜条件。配合物的表观摩尔吸光系数为9.15×10~4L·mol~(-1)·cm~(-1)。方法用于直接定人发中的锌,变异系数(RSD)在0.47%~1.16%之间,标准加入回收率在98.7%~103.2%之间。 相似文献