用复制酶基因cDNA探针检测表达病毒外壳蛋白基因马铃薯中的PLRV

利用马铃薯卷叶病毒（ＰＬＲＶ）复制酶基因３′端长约６００ｂｐ的ｃＤＮＡ，用缺口平移方法进行３２Ｐ同位素标记，制备成ｃＤＮＡ探针，通过核酸斑点杂交，对提纯的马铃薯卷叶病毒（ＰＬＲＶ）、病毒ＲＮＡ、ＰＬＲＶ感染的马铃薯汁液，表达ＰＬＲＶＣＰ基因的马铃薯叶片及块茎芽进行了检测．结果表明，３２Ｐ标记的复制酶基因ｃＤＮＡ探针特异性强、灵敏度高．可测得提纯病毒的最低含量为４０８ｎｇ／ｍｌ，病毒ＲＮＡ最低量为２７．８ｐｇ／ｍｌ，未转ＣＰ基因接种ＰＬＲＶ的马铃薯叶片提取液的最高稀释度为１３７５．接种ＰＬＲＶ的转ＣＰ基因的抗性马铃薯块茎芽和叶片提取液的最高稀释度为０～１／１５．此探针和只转入病毒外壳蛋白基因，不接种ＰＬＲＶ的转基因马铃薯汁液不发生反应．表明，探针只与ＰＬＲＶ基因组ＲＮＡ特异反应，而不与外壳蛋白基因及其ｍＲＮＡ反应，从而为表达ＣＰ基因的转基因马铃薯中ＰＬＲＶ的检测和抗病性鉴定建立了一种可靠的灵敏的分子生物学技术．此项技术已用于转ＣＰ基因马铃薯Ｄｅｓｉｒｅ，Ｆａｖｏｒｉｔａ，乌盟６０１和虎头的抗病性鉴定     

屏障动物房书虱爆发、处置与风险评估

书虱属啮虫目虱科昆虫,是粮仓、图书馆及家居生活中较常见的一类昆虫,较少出现在实验动物屏障环境中。本单位在屏障动物房IVC排风管道中发现书虱爆发,经采取管道清洗、敌敌畏消杀及降低湿度等措施,控制了书虱爆发,清除了病原威胁。本文对书虱爆发的经过、处置方法及效果进行了介绍,并对书虱的来源、处置方法的选择及书虱对实验动物屏障设施的潜在风险进行了探讨。     

Introduction of rice chitinase gene into wheat via low energy Ar+ beam implantation

A chitinase gene (RCH8) in plasmid vector pCAMBIA1308 was delivered into 3 wheat cultivars (Yangmai 158, Wan 9210, Wanmai 32) by low energy Ar⁺ beam-mediated method. Preliminary calli from treated mature embryos were first selected on hygromycin (Hm, 20 or 30 mg/L) containing medium. After the resistant calli formed, they were transferred to the regeneration medium with 10 or 20 mg/L Hm. All the three wheat varieties obtained transgenic plants. PCR and PCR-Southern assays showed that most plants regenerated from the resistant calli were positive transgenic plants. Southern blot of the positive green plants confirmed stable integration of alien DNA into wheat genome. The plant transformation frequencies varied with the variety and ion dose implanted. Wanmai 32 possessed the highest transformation frequency, reaching 3.8% at a suitable implantation dose. The transformation frequency of Yangmai 158 and Wan 9210 varied from 0.5% to 2.5% and from 0.5% to 1.4%, respectively. Progeny test for resistance to wheat scab showed that the leaf extract of R₁ generation inhibited the growth of wheat scab strain R₀ and F₁₅.     

农杆菌介导的胆碱脱氢酶基因(betA)转化小麦及影响转化效率的因素

用LBA4404／pCDH，Agl 1／pUNN2和Ag;P(无质粒)3种菌株分别转化小麦品种济南177、99P、核生3号幼胚诱导的愈伤组织以及济南177的幼胚．其中以胚性愈伤组织为外植体，获得了转基因植株．PCR和PCR-Southem分析证实转化植株中包含了外源基因．通过染色体分析，发现胚性愈伤组织在农杆菌LBA4404侵染后形成的染色体削减比经Agl1侵染和未经感染的对照形成的染色体削减程度更大，甚至发现较多的染色体断片．分析了农杆菌菌株，材料的基因型，外植体类型，培养时间和温度以及筛选的时间和周期对于转化效率的影响．     

农牧业及其加工业效益链计算方法

文中将农牧业初级产品的生产及其后续加工诸环节生产“链”视为一个整体，从系统的角度研究整条链的经济效益以及效益在各生产环节的合理分配问题。文中推导出各生产环节作为非独立核算企业、在独立核算企业不考虑税收、以及独立核算企业考虑税收情况下，各生产环节合理的成本利润率公式及该公式求解的迭代算法，文中还给出上述每种情况下各环节产品的合理价格计算公式，最后给出新疆某地区棉花生产链的计算实例。     

Construction of ice nucleation active <Emphasis Type="Italic">Enterobacter cloacae</Emphasis> for control of insect pests

Ice nucleation active(INA)bacteria are the most potent heterogeneous ice nuclei in nature,which have become an important biological resource for diverse applications.Many researches have proved that INA bacteria can raise the supercooling points(SCPs)of insect pests,then reduce their cold hardiness.However,INA bacteria‘s inefficient colonization on the surface or in the guts of insects,and the high incidence of frost injury induced by their release hampered the application of INA bacteria in controlling insect pests in agricultural fields.In this study,we constructed a recombinant plasmid mob-Tn5-iceA with the ability of broad-host-range conjugal mobilization and integration of the ina gene of icaA into chromosomal DNA of many gram-negative bacteria by Tn5 transposition.In addition,Ent.cloacae strains stably carrying iceA and expressing high ice nucleation activity(INA),even in the absence of antibiotic pressure,were constructed through conjugal mobilization and Tn5 transposition.Ent,cloacae strains have benn reported to be able to efficently colonize in the guts of insects,but have weak plant epiphytic ability.Therefore,these transgenic Ent.Cloacae may be promising candidates for control of insect pests in agricultural fields.     

逆行胰胆管注射牛磺胆酸钠诱导重症急性胰腺模型多器官损害观察

摘要 探索逆行胰胆管注射牛磺胆酸钠诱导大鼠重症急性胰腺炎模型及胰腺外多器官损害情况。采用12周龄SD大鼠35只,随机分为对照组和实验组,各3组,实验组逆行胰胆管注射牛磺胆酸钠诱导大鼠重症急性胰腺炎模型,对照组仅开腹后拨动十二指肠降部。观察造模后6小时、12小时胰腺和腺外器官病理和血清学指标变化、腹水及48小时内生存率。结果：SAP模型大鼠48小时内90%死亡,胰腺进行性水肿、坏死,大量腹水渗出,心、肺、肝、肾均有不同程度受损。SD大鼠逆行胰胆管注射牛磺胆酸钠诱导的动物模型,是研究重症急性胰腺炎胰腺坏事、水肿和多器官进损害的良好模型。     

一种基于手动芯片点样仪的快捷高效的转基因植物PCR-dot-blot鉴定法

本论文报道一种快捷高效的PCR—dot—blot新方法．该方法利用手动芯片点样仪将微量PCR产物（约100pgDNA）点样,并采用North2 South Biotin Random Prime DNA Labeling and Detection Kit（PIERCE）完成快速斑点杂交．通过鉴定转基因烟草证明这种方法是可行而有效的．这种新方法节省材料,效率极高,特别适合大批量鉴定转基因植物．     

浅谈全凭静脉复合麻醉在动物实验中的应用

近年来,复合静脉全麻在大型哺乳动物的实验外科手术中越来越多地受到了实验者的重视和应用,但随意混杂应用麻醉药物的情况仍屡见不鲜。文中就动物手术中常用的几类复合静脉麻醉药物的适用范围、使用方法、优缺点及注意事项等进行了讨论。     

国内外不同体制下实验动物管理政策体系和标准体系的分析与启示

目的 阐述我国实验动物管理制度的优势,找出存在的短板,提出完善与强化我国实验动物管理政策体系和标准体系的对策与建议.方法 分析国内外实验动物管理政策体系和标准体系架构.结果 我国还没有一部实验动物管理的法律,与国际上的通用要求存在较大差距;与国际先进标准相比较,我国实验动物标准内容相对滞后,标准之间缺乏系统性和协调性....