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91.
AS-mCLB1重组质粒联合多西紫杉醇抗Lewis肺癌细胞增殖活性的研究 总被引:1,自引:1,他引:0
pAS-mCLB1转染Lewis肺癌(LL/2)细胞72 h后,再加用多西紫杉醇(40 nmol/L)处理细胞,MTT法测定药物对LL/2细胞的体外杀伤作用.另将LL/2细胞接种C57BL/6小鼠,成瘤后分别用pAS-mCLB1、多西紫杉醇和pAS-mCLB1+多西紫杉醇处理动物,3天1次,共4次,观察肿瘤体内增殖情况,流式细胞仪检测动物肿瘤组织的细胞凋亡.结果显示:pAS-mCLB1联合多西紫杉醇可明显降低LL/2细胞体内、外增殖活性,同时促使肿瘤组织中细胞凋亡增加,两种方法具有协同作用.pAS-mCLB1显著增强多西紫杉醇抗肿瘤效应,此增强作用可能与pAS-mCLB1诱导肿瘤细胞凋亡,提高了多西紫杉醇的细胞毒作用有关. 相似文献
92.
采用了一种简单而快速的全长cDNA文库构建法,即SMART法,并应用cDNA片段与质粒共转化大肠杆菌的方法,成功地构建了蚕豆全植株cDNA文库. 相似文献
93.
为了对海南五指山小型猪蛋白酶体亚基α型6(proteasome subunit alpha type 6,PMSA6)cDNA基因进行克隆和生物信息学分析,笔者以构建的五指山小型猪外周血白细胞cDNA文库为材料,采用菌落PCR方法,克隆得到PMSA6全长cDNA,并向GenBank递交了该序列(登录号:FJ358606).同时运用生物信息学软件对该基因核苷酸序列进行了分析,并预测了其编码蛋白的理化性质及二级结构等.生物信息学分析表明:该cDNA全长1029bp,5’非翻译区长96bp,3’非翻译区长192bp,含有一个741bp完整的开放阅读框,编码246个氨基酸.该蛋白的分子量为37.680kD,等电点为8.76.进一步比对分析发现,五指山小型猪PMSA6基因的核酸序列及其氨基酸序列与人、牛等哺乳动物具有很高的相似性.本研究成功克隆了海南五指山小型猪P肛SA6基因cDNA,并进行了相关生物信息学分析,为进一步研究PMSA6在动物体内的作用机理奠定了基础. 相似文献
94.
95.
为了获得蒙古绵羊β-防御素-1(SBD-1)的cDNA序列,从蒙古绵羊瘤胃的上皮组织中提取总RNA,采用反转录PCR(RT-PCR)技术扩增蒙古绵羊SBD-1的部分cDNA,结果扩增出cDNA 300个碱基.该cDNA包含由192个碱基组成的开放读码框(ORF),该ORF编码64个氨基酸的前原防御素.为了检测SBD-1mRNA在蒙古绵羊体内可能的表达器官,通过RT-PCR方法研究了SBD-1基因在蒙古绵羊各组织中的表达分布,结果显示,该基因在整个消化道(除直肠外)、气管、子宫、脾脏等管状器官内的黏膜层和脾脏内均有表达,而在所检测的实质性器官内,如心脏、肝脏、肺脏、肾脏、淋巴结、膀胱、卵巢等中没有表达. 相似文献
96.
采用快速末端cDNA扩增法,首次从大黄鱼中克隆到全长为2 023 bp的凝血酶原类似基因cDNA,编码为617个氨基酸,其中包括80 bp的5′末端非编码区及89 bp包含poly(A)尾的3′末端非编码区。预测1~15位的氨基酸处存在1个信号肽。推导的氨基酸序列与哺乳动物及其他鱼类进行同源性比较,发现其与红鳍东方鲀有73%同源性,而与哺乳动物的同源性为50%~65%。凝血酶原类似基因虽然在大黄鱼的各个组织中组成型表达,但是在减毒鳗弧菌免疫的大黄鱼的脾脏和肾脏中表达明显上调,这表明凝血酶可能参与大黄鱼对细菌侵染的免疫应答。 相似文献
97.
98.
应用RTPCR技术从中国人胎肝细胞中分离出1个566bp大小的基因片段,经过克隆、限制性内切酶鉴定和序列分析证实为TPO的cDNA片段.与GenBank中发表的人TPOmRNA的序列比较同源性在82%~99%之间,仅有2个碱基不相同,在175位密码子(523~525位的碱基)分别是CGG和CAA,即精氨酸(R)的位置上,中国人是谷胺酰氨(G).而与测得的韩国人序列比较,在相应位置的氨基酸是相同的 相似文献
99.
经大肠杆菌感染的中国家蚕cDNA文库的构建 总被引:3,自引:0,他引:3
用建立非表达文库的方法,从大肠杆菌感染后9h的中国家蚕的mRNA合成cDNA片段,重组入噬菌体λgt10的EcoRI的位点之间,所构成的基因非表达文库库容量为2×106重组子,经大肠杆菌C600与C600hlf菌株平皿测定,重组率为76%. 相似文献
100.
采用异硫氰酸胍法从发芽3~4d的番茄幼苗中提取出总RNA,用Oligo(dT)纤维素亲和层析分离纯化mRNA.以mRNA为模板,Oligo(dT)为引物用逆转录法合成双链cDNA.将cDNA与EcoRI接头连接后克隆到表达载体λgt11的单一EcoRI位点,经体外包装后感染宿主菌Y1090,成功地构建了完整的番茄幼苗cDNA文库.用颜色筛选法筛选重组子,然后用植酸酶抗体做探针进行免疫筛选,得到两个阳性克隆.挑取阳性克隆噬菌斑扩增后纯化DNA,经琼脂糖凝胶电泳鉴定,显示确有外源DNA存在.该插入片断序列测定正在进行. 相似文献