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应用紫外吸收光谱法和荧光光谱法研究了7-[(8-喹啉)偶氮]-8-羟基喹啉-5-磺酸(简称主体)与蛋白质的相互作用.在p H=7.40的Tris-HCl缓冲溶液中,主体分子在400 nm处发射弱荧光,其荧光强度随白蛋白的加入明显增强.据此建立测定微量蛋白质的新方法.在相同的实验条件下,测定牛血清白蛋白和人血清白蛋白,线性范围分别为1.0×10-6~2.7×10-5mol/L和2.5×10-7~9.5×10-6mol/L,检测限分别为8.09×10-7mol/L、1.05×10-7mol/L.同时讨论7-[(8-喹啉)偶氮]-8-羟基喹啉-5-磺酸对白蛋白内源荧光的猝灭机理,测定牛血清白蛋白和人血清白蛋白结合常数分别为3.38×105和7.28×106,结合位点数分别为1.218和1.412.依据Forster非辐射能量转移理论,确定了主体-受体间的结合距离rBSA=3.98 nm,rHSA=3.04 nm及能量转移效率EBSA=0.038,EHSA=0.161,用同步荧光技术考察主体对蛋白质构象的影响.1 相似文献
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以玉米芯纤维素为基质,通过环氧氯丙烷(EPI)交联活化、亚氨基二乙酸(IDA)修饰、金属离子Cu,Fe,Zn,Ni螯合制得亲和吸附剂.通过红外光谱(FTIR)、X射线光电子能谱(XPS)、原子吸收分光光度法(AAS)对其表征.考察了pH、离子强度、初始浓度、洗脱液等因素对螯合了不同金属离子的吸附剂吸附牛血清白蛋白(BSA)的影响.结果表明:对强亲和性的Cu(Ⅱ)螯合亲和吸附剂对BSA的吸附主要受配位作用控制,而对弱亲和性的Fe(Ⅱ)、Zn(Ⅱ)、Ni(Ⅱ)螯合亲和吸附剂则主要受静电作用影响,配位作用为辅. 相似文献
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通过改变离子强度、阿霉素(ADR)的浓度和酸度,用牛血清白蛋白(BSA)研究了泡沫提取ADR的条件.采用荧光法测定ADR,考察了操作液成分和pH值对测定的影响.实验结果表明:BSA浓度200mg/L,ADR浓度2.0 u/mL,pH 2.40,NaCl浓度0.5 mol/L,气体流速15 mL/min,进料体积8.0 mL时,阿霉素的二次提取率可达70.3%.并且对其作用机理进行了讨论,ADR实现泡沫提取的主要动力是ADR的疏水部分与BSA分子间发生的疏水作用力. 相似文献
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在恒界面池中,从十六烷基三甲基溴化铵反胶束溶液中反萃牛血清白蛋白(BSA)的传质系数与搅拌转速无关,与反萃液的pH值和离子强度有一定关系,而温度的影响强烈(表观活化能达196kJ/mol)。表明该反萃过程属界面控制。提出了反萃BSA的界面过程机理,“满胶束”的聚结是速率控制步骤,而蛋白质与其周围带电的表面活性剂层的作用,对聚结速率有很大影响。 相似文献
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根据物料恒算原理,采用分光光度法研究了37℃下牛血清蛋白(BSA)在γ-(甲基丙烯酰氧)丙基三甲氧基硅烷(KH570)与甲基丙烯酸-2-羟基乙酯(HEMA)及N-乙烯基吡咯烷酮(NVP)共聚物水凝胶膜上的等温吸附作用.结果表明,BSA的吸附量随溶液浓度增大而增大,为匀速吸附过程,其后期吸附速度受BSA向含硅水凝胶本体扩散的速度控制,低于前期吸附速度;BSA的吸附量在pH值为4.5附近为最大,酸性或碱性过大均导致吸附量下降;溶液中离子产生的“盐效应”、凝胶中NVP或者KH 570组分的增加有利于BSA的吸附. 相似文献
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根据生物素标记反应的不可逆性,设计了一种基于磁性分离的快速纯化方法。该方法使用固定在磁性粒子上的牛血清白蛋白(BSA)与生物素标记甲状腺素(T4)反应后过量的活性生物素试剂继续反应,形成磁性粒子-BSA-生物素复合物,再通过磁性分离可快速除去复合物。实验中用酶免疫分析方法检测过量的活性生物素试剂和磁性粒子的反应程度,并用竞争抑制反应证明了经磁性分离得到的上清液为高纯度生物素标记的T4。该纯化方法解决了小分子物质生物素标记后难以用传统方法纯化的问题,操作快速、简单,特别适用于小分子生物物质进行生物素标记后的纯化。 相似文献
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利用压电传感器实时监测牛血清蛋白(BSA)在传感器金电极表面的吸附过程,并推算出BSA在金电极表面的吸附速率常数ka=0.057m3kg-1s-2、解析常数kd=0.00042s-2。 相似文献
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用荧光光谱法、分光光度法研究了3种黄酮类药物(染料木素、木犀草素和桑色素)与牛血清白蛋白(BSA)的相互结合作用.实验表明染料木素、木犀草素和桑色素与牛血清白蛋白的相互结合作用均为单一的静态猝灭过程,猝灭常数Ksv为4.22×104~4.83×105 L·mol-1,在溶液中结合作用强烈(结合常数KB为1.92×103~3.23×105 mol·L-1),形成稳定的配合物,求算了给体(BSA)与受体(黄酮类药物)作用距离r(3.35~4.80 nm).首次发现药物与BSA结合作用同羟基数目直接相关:随着药物分子中羟基数目(染料木素为3、木犀草素为4、桑色素为5)的增加,猝灭荧光峰位蓝移增大,作用距离r变小,结合作用逐渐加强;猝灭常数Ksv增大,更容易形成配合物;结合常数KB增大,形成的配合物更稳定. 相似文献
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用吸收光谱法和荧光光谱法研究了在生理pH值条件下,一种新的降血糖化合物SU-118与牛血清白蛋白的相互作用,求出了该合物与牛血清白蛋白相互作用的结合常数及热力学参数,并讨论了它们之间的相互作用机理以及SU-118对牛血清白蛋白构象的影响。 相似文献