海南斑等蝎钾通道阻断剂Im58的克隆、表达、纯化和鉴定

为表达钾离子通道阻断剂Im58,设计了4条搭桥PCR引物,通过overlap PCR的方法扩增出蝎毒肽Im58DNA全长片段,选用表达载体pGEX-4T-1,将测序正确的克隆转化至大肠杆菌E.coli/Rosetta(DE3)中.通过检测不同诱导时间和IPTG浓度下融合蛋白的表达量,筛选出最优表达条件.表达蛋白经IPTG诱导后,融合蛋白再经GSH亲和层析柱纯化,将洗脱液经超滤浓缩脱盐、纯化后得GST-Im58融合蛋白,蛋白用小肠激酶酶切后通过RP-HPLC C18柱分离获得色谱纯的蝎毒肽.蝎毒肽通过Tricine系统的SDS-PAGE蛋白质电泳鉴定重组多肽的分子量大小和纯度,并由MALDI-TOF-MS来精确测定重组多肽的分子量.结果表明:Im58阳性克隆子证明成功构建了Im58原核表达载体,Tricine系统的SDS-PAGE蛋白质电泳和MALDI-TOF-MS鉴定Im58多肽表达纯化成功.     

我国科学家发现家族性心房颤动基因

最近,同济大学医学遗传学研究所所长陈义汉博士等与国家人类基因组南方研究中心徐世杰博士等科研工作者密切合作,找到了一个引起家族性心房颤动(房颤)的致病基因。这项研究成果以论文形式被发表在2003年1月10日出版的《Science》杂志上。     

氯苄基四氢小檗碱对大鼠肥厚心肌中KATP通道表达的影响

观察心梗诱导的大鼠肥厚心肌中三磷酸腺苷(ATP)敏感性钾离子通道(KATP)的表达,并探讨其影响因素.将雄性大鼠随机分为5 组,分别是假手术组,手术组,普萘洛尔组,氯苄基四氢小檗碱组及内皮素受体拮抗剂组.手术组及药物组的大鼠结扎冠脉左前降支,术后饲养10 d,药物组于术后第6天开始给药,共给药5 d,由反转录-多聚酶链式反应(RT-PCR)方法确定KATP 通道的mRNA表达.实验结果表明,心梗诱导的大鼠肥大心肌中的KATP 通道的mRNA 表达明显上调,经药物干预后有不同程度的降低.心梗诱导的大鼠肥厚心肌中的KATP 通道的mRNA 的表达上调,其表达上调除与β受体有关外,Ca2 离子可能参与对KATP 通道表达的影响.     

烟草愈伤组织细胞质膜K~+通道盐适应机理的研究

高盐对植物细胞伤害的一个重要方面是由于细胞质内的离子不平衡造成的,特别是细胞中高Na~+/K~+比例破坏了细胞正常的生理代谢,高盐条件下引起离子不平衡的可能原因是Na~+大量内流进入细胞,K~+吸收相对减少。植物细胞如果要在高盐的环境条件下存活,必须有维持正常胞内离子相对平衡(较高的K~+/Na~+)的能力。以往的研究表明:质膜和液泡膜上的主动转运系统,如:Na~+/K~+,Na~+/H~+反向转运载体和H~+泵在维持细胞质内高的K~+/     

The milestone of membraneprotein research： Nobel Prizein Chemistry for 2003

The Nobel Prize in Chemistry for 2003 was awarded to two biologists, Peter Agre in Johns Hopkins School of Medicine and Roderick MacKinnon from Howard Hughes Medical Institute in Rockefeller University, who have made fundamental discoveries concerning channels in cell membranes. Peter Agre discovered and characterized the first water channel protein and Roderick MacKinnon mainly elucidated the structural and mechanistic basis for potassium channels.     

日本车虾有髓鞘巨大神经纤维结间轴突膜产生静息膜电位的证据

近年来电生理学研究发现,脊椎动物有髓鞘神经纤维轴突膜中参与产生动作电位的离子通道的分布是不均匀的:在郎氏结区有丰富的电压依赖性钠通道,但完全缺乏(如在家兔)或仅有为数极少的(如在青蛙)电压依赖性钾通道;在结间区则与此相反,即电压依赖性钾通道多,而电压依赖性纳通道极少。另一方面,我们在一种无脊椎动物,即日本车虾的一对有髓     

揭开毒素改变离子通道结构之谜

德国马克斯·普朗克生物化学研究所和法国研究人员结合共振波谱学(固态核磁共振)原理,观察了某些特殊蛋白质的合成过程,希望籍此揭开毒素对钾通道结构改变的作用之谜。该研究使进一步开发治疗高血压和其他与钾离子通道失活有关疾病的新药成为可能。人体细胞外有一层膜,许多由特