L-酪氨酸铜配合物的合成及热分解动力学研究

合成了L-酪氨酸铜配合物,通过化学分析I、R及TG-DTA对其组成及热稳定性进行了研究,确定了配合物的组成为Cu(Tyr)(Ac)2.3H2O.并计算了铜配合物热分解的失重动力学参数.     

小鼠Connexin31蛋白磷酸化定位

间隙连接蛋白31(Connexin31,Cx31)是间隙连接蛋(Connexin)家族的一员,目前对于Cx31的功能及其调节方式知之甚少.本文通过免疫沉淀、SDS-PAGE分离、蛋白质条带回收、蛋白质胶块酶解、4-磺酸苯异硫氰酸酯修饰、PSD-MALDI-TOF质谱分析、数据分析、确定小鼠Cx31磷酸化位点.     

利用聚孔雀石绿薄膜修饰电极测定DL-酪氨酸

利用循环伏安法(CV)将孔雀石绿(MG)修饰于玻碳电极(GCE)表面,制备出聚孔雀石绿薄膜修饰电极(简称PMGE).利用循环伏安法,研究了PMGE对DL-酪氨酸电催化作用,建立了一种对DL-酪氨酸进行定量分析的新方法.在0.2 mol/L KH2PO4-Na2HPO4(pH=6.86)缓冲溶液中,DL-酪氨酸的浓度在6.3×10-5mol/L～3.2×10-4mol/L范围内与氧化峰电流呈现出良好的线性关系,线性相关系数γ=0.998 9,检测限可达8.0×10-6mol/L.8次样品平行测定结果的相对标准偏差不大于2.1%,样品回收率在98.2%～105.3%之间,可用于实际样品中DL-酪氨酸的定量分析.     

MST1的酵母双杂交及与Salvador体外结合的研究

利用酵母双杂交系统,以鼠M ST 1(M amm alian STE 20-1 ike 1)为诱饵蛋白,在鼠胚胎库中筛选到22个Salvador的片段。通过E.coli表达系统纯化了6个组氨酸(6H is)融合的M ST 1和谷胱甘肽硫转移酶(GST)融合的Salvador,并做体外蛋白质结合实验,进一步证实了两蛋白质相互结合。通过体外激酶活性分析,发现M ST 1并不直接磷酸化Salvador,但是Salvador能够较强地抑制M ST 1对M BP(磷酸丁酯)的磷酸化,提示有可能Salvador通过影响M ST 1的激酶活性来参与了M ST 1介导的细胞凋亡途径。     

受磷蛋白的空间结构及其分子动力学模拟

受磷蛋白通过可逆的磷酸化来调控肌浆网钙泵活性, 它在生物体中的空间结构一直是一个受关注的焦点. 本文通过总结受磷蛋白空间结构的研究进展, 利用分子动力学方法对其空间结构进行了系统的模拟和研究. 我们将核磁共振所得到的风铃草结构单链的前22个残基取出, 并且分别保持原始结构; 而对第16位进行磷酸化, 第9位进行单点突变, 从而得到3个不同的肽段. 通过在水环境中进行10 ns的分子动力学模拟, 我们发现原始结构的第3~15个残基很好地保持了螺旋结构, 而第16位残基的磷酸化和第9位残基的突变会减少周围残基呈现螺旋状态的几率, 这与一些具体实验中的结论一致. 这一变化也可能是降低受磷蛋白对肌浆网钙泵活性抑制作用的原因.     

9-芴甲氧羰基-O-叔丁基-L-酪氨酸类似物合成研究

L-酪氨酸类似物经酯化后,采用对碱敏感的Fmoc基团和对酸敏感的叔丁基分别保护L-酪氨酸的氨基和羟基,Fmoc基团用Fmoc-osu引入,叔丁基在高氯酸镁作用下用BoC2O引入,后经水解反应,最终生成标题化合物,并且对所合成标题化合物进行了HNMR H,IR,MS结构确证.     

色氨酰酪氨酸缩聚二肽体系的电子转移研究

在过渡态理论框架下,用经典轨迹方法、两态模型近似,采用AM1半经验方法及从头算方法探讨了色氨酰酪氨酸缩聚二肽体系的电子转移过程.对于包含桥体的二肽体系的分子内电子转移过程,采用UHF/6-31G水平上电子给体、受体优化结果,和分子轨道电荷定域初始猜测诱导SCF技巧,在UHF/6-31G水平上用线性反应坐标构造出给体、受体分子间电子转移的双势阱,得到两透热势能面交叉处的反应坐标R约为-0.217,表明气相反应发生在反转区.生物体系电子转移反应的研究对探讨某些生命或生理机制具有十分重要的意义.     

翻白草提取物抑制硝基化反应

利用硝基化反应,探索建立抗糖尿病体外快速筛选模型.本研究通过形成的3-硝基酪氨酸( 3-nitrotysine,3-NT )在紫外425 nm吸收强度的变化,对民间草药翻白草治疗糖尿病的验方进行药效活性成分.根据翻白草不同提取物对硝基化反应的抑制作用,建立了简便可靠的抗糖尿病体外筛选和快速评价方法.实验基于从翻白草所得的甲醇、乙醇不同浓度和总黄酮等不同部位的提取物,经体外硝基化反应评价,筛选出翻白草的甲醇萃取物、95%乙醇抽提物、总黄酮、聚酰胺层析的40%乙醇洗提物和85%乙醇洗提物为有效抗糖尿病部位,均有明显的抑制蛋白硝化的作用.该研究通过优化外硝基化反应最佳条件,进而建立的体外硝基化反应模型,揭示了翻白草提取物含有抑制硝化的物质即为该植物的抗糖尿病成分.因此,抑制蛋白硝基化作用可以考虑作为体外抗糖尿病的有效手段,并且有望完善成为体外抗糖尿病药物快速筛选的简便方法和模型之一.     

溶性替尼类抗肿瘤药的制剂策略

目前,靶向抗肿瘤药物得到广泛关注,其中以替尼类为代表的小分子酪氨酸激酶抑制剂因其具有高靶向性、疗效显著、不良反应较小等的特点,逐渐成为临床应用的主流趋势.然而替尼类药物多具有复杂的芳杂环结构,溶解性差,不利于胃肠道的吸收.研究表明可通过制备固体分散体、纳米颗粒、包合物、混悬液等方式改善药物理化性质,在不改变其耐受性的条...     

原癌基因K-Ras调控APPThr668位点磷酸化及APP的切割

在阿尔茨海默症(Alzheimer′s disease,AD)发病的早期,Ras蛋白所在的信号通路被激活,但具体作用机制还不清楚.探讨了K-Ras及其突变体K-RasG12V对淀粉样前体蛋白(amyloid precursor protein,APP)的剪切的影响.Western blot结果显示,过量表达K-Ras能够激活细胞外调节蛋白激酶1/2(extracellular signal-regulated kinase,ERK 1/2)、c-Jun氨基末端激酶(c-Jun N-terminal kinase,JNK)通路,并增加APP在Thr668的磷酸化;抑制JNK通路则阻断了K-Ras过表达所引起的APP Thr668磷酸化.此外,过表达K-Ras造成分泌到细胞外的sAPPα增加,而sAPPβ减少.通过生物素标记实验发现,过表达K-Ras使得APP在细胞膜上的定位增加,而细胞内APP总量没有改变.这些结果表明,过量表达K-Ras可以通过调控JNK的通路,增加APP在Thr668位点的磷酸化,造成APP在细胞膜上水平升高,导致APP向sAPPβ的切割减少,而向sAPPα的切割增加.提示K-Ras对APP切割的影响可能在AD的发病过程中起着一定的应激作用.