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41.
SARS冠状病毒N蛋白的表达及二级结构预测分析 总被引:2,自引:1,他引:2
通过RT-PCR获得SARS冠状病毒N蛋白基因,分别克隆到原核表达载体pET21a,pET32a和pGEX-4T-1中,将3种重组质粒pET2la-N,pET32a-N和pGEX-4T-1-N分别转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导,细菌中分别表达出约46kD的重组N蛋白、约60kD的6xHis-N融合蛋白和约70kD的GST-N融合蛋白,表达量分别达总蛋白的45%、40%和30%.进一步的分析表明:6xHis-N融合蛋白在大肠杆菌中为可溶性表达,该可溶性组分占细菌裂解液的70%左右,且能被6xHis抗体所识别.用蛋白分析软件对N蛋白进行了序列分析和二级结构预测.SARS冠状病毒N蛋白在大肠杆菌中的高效可溶性表达,有助于进一步结晶后进行X射线晶体衍射分析其结构与功能. 相似文献
42.
为了提高乙肝病毒表面抗原基因在番茄果实中的表达量和免疫原性,采用克隆的E8番茄果实特异表达启动子和乙肝病毒表面抗原M蛋白基因构建了植物表达载体pBIES2, 及只含有乙肝病毒表面抗原S蛋白的表达载体pBIES,并将它们分别导入根癌农杆菌LBA4404中.最后对该载体的优越性进行了讨论. 相似文献
43.
Fractalkine基因真核表达质粒的构建及其在小鼠肝癌细胞中的表达 总被引:2,自引:0,他引:2
为克隆小鼠趋化因子Fractalkine(.FK)基因,构建真核表达质粒,并在小鼠肝癌细胞中表达,用以进行肿瘤的基因治疗,用RT-PCR法,从小鼠乳腺癌细胞D2F2扩增FK的cDNA,插入pCR2.1 TOPO载体,测序证实后,将其亚克隆至质粒pIRES中构建FK真核表达载体;用脂质体将重组质粒转染小鼠肝癌MM45 T.Li细胞,经G418筛选获得抗性细胞克隆,用RT-PCR和免疫化学方法鉴定转染细胞中FK基因的表达.结果表明:经限制性内切酶酶切图谱分析和DNA序列测定证实目的基因已插入重组质粒,RT-PCR和免疫化学方法证明转基因MM45T.Li细胞克隆中存在小鼠FK基因的表达。 相似文献
44.
45.
钱志鸿 《东北师大学报(自然科学版)》2003,35(2):41-46
给出了集成电路噪声模型算法及其矩阵表达.噪声模型算法是利用功率谱密度叠加原理推证得出的,根据噪声叠加原理,多级集成电路的功率谱密度为单级集成电路功率谱密度的叠加之和,而单级集成电路的功率谱密度同样也基于叠加原理求得;并借助电路噪声等效理论,以反相输入运算放大器为例,探讨了运放噪声模型的矩阵算式,其方法和步骤同样适用于同相输入运算放大器;给出的程序设计方法为噪声模型算法的应用提供了思路,使系统参数的计算变得更精确. 相似文献
46.
物种种性漂移的生物信息论基础 总被引:1,自引:6,他引:1
提出了生物信息论——以数字化技术研究和描述生物遗传信息的结构、变化、传递和表达成生物性状全过程的科学,建立了生物信息的结构、变化、传递和表达模型,定义了用于生物信息论研究的若干概念,分析了物种种性漂移的生物信息论之基础。 相似文献
47.
采用氨基葡萄糖法检测转基因烟草植株叶片几丁质酶活力,结果表明几丁质酶基因在转基因植株中酶活力增强,与β—1,3-葡聚糖酶基因的协同作用下酶活性最强,几丁质酶活力的测定对外源基因表达效率的检测是可行的. 相似文献
48.
以甘蓝(Brassiaca oleracea)为材料,取幼叶分离mRNA,反转录合成cDNA,以cDNA第一链为模板,通过PCR扩增,获得甘蓝磷酯酶D(Phosphorate Lipid Dehydrolase,PLD)HKD2功能区的基因片段.对其进行Blast分析,结果表明,分离的目的片段核苷酸序列与Genbank中报道的甘蓝PLD基因相比同源率为99.7%,只有2个碱基发生改变.将得到的PLD基因片段插入植物表达载体pAT940,构建了PLD基因反义表达载体pATC—rPLD,为下一步进行抗逆转基因作物选育打下基础. 相似文献
49.
水稻精细胞基因RSSG58启动子的克隆分析及表达载体构建 总被引:2,自引:0,他引:2
根据分布的水稻基因组测序的比较和水稻精细胞优势表达的RSSG58基因cDNA序列,以水稻品种“桂朝2号”黄化苗组DNA为模板,用PCR方法克隆出RSSG58在起始密码子以前的上游调控序列Pr58,经过Pr58启动子进行的鉴定和分析表明,具备大多数高等植物启动子的保守元件,预计它的RSSG58基因在特异表达方面具有一定的作用。为了鉴定RSSG58基因的基本启动子元件,将RSSG58基因5′侧翼序列做缺失片段分析,由PCR从Pr58中得以3个不同大小两端带有HindⅢ,BamHⅠ酶切位点的片段Pr58Ⅰ,Pr58Ⅱ和Pr58Ⅲ,定向插入载体pMGFP4(pBI221改建,报告基因为GFP)中,取代原有的CaMV35S启动子,构建了由驱动报造基因GFP的植物表达载体pRGFPⅠ,pRGFPⅡ和pRGFPⅢ,用于农杆菌介导法水稻遗传转化。其目的是为进一步在模式植物中研究其表达功能奠定基础。 相似文献
50.
重组肠激酶在甲醇酵母中高效表达的培养条件研究 总被引:1,自引:0,他引:1
对重组肠激酶在甲醇酵母中高效表达的发酵条件进行了优化,并在BiofloⅢ发酵罐中实现了高密度培养和高效表达。结果表明;温度30C,培养基pH6.0,当酵母密度达到200A600mm以上时,加入无水甲醇,控制甲醇的流加体积,使其终体积分数为1.0%~3.O%,继续诱导培养72h左右,酵母菌密度可达到150g/L,重组肠激酶总活性可达58kIU/L发酵液。 相似文献