环腺苷二磷酸核糖（cADPR）类似物的合成与诱导钙释放活性的研究

Ca²⁺信号传导通路是生物体内重要的胞内信号传导途径之一。局部钙信号主要来源于细胞内钙库释放,而这些钙信号受到各种第二信使的控制和Ca²⁺通道蛋白的调节。环腺苷二磷酸核糖（cADPR）作为烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（NAD⁺）的代谢物,发现于1987年,是一种信号传导分子,它广泛存在于各种生物系统中,通过介导兰诺定( RyR) 受体调节钙动员活性。研究cADPR以及具有不同生物活性的类似物之间的构效关系是探究分子内钙释放机制的主要手段,另外,一些结构新颖的拮抗剂和激动剂可以作为研究细胞系统复杂机制的研究工具。作者概括性地介绍了cADPR结构类似物——N¹-乙氧基甲基-环肌苷-5'-二磷酸核糖（cIDPRE）和N¹-[(磷酰基-O-乙氧基)-甲基-N⁹-[(磷酰基-O-乙氧基)-甲基-次黄嘌呤-环磷酸焦酯（cIDPDE）的合成与性质。这两种类似物cIDPDE和cIDPRE可作为研究完整细胞钙信号系统的膜透性激动剂。     

老年雄性大鼠部分衰老指标测定的研究

目的定量研究老年雄性大鼠部分衰老指标的增龄性变化。方法测定不同月龄SD雄性大鼠血清T-SOD活性及MDA含量、血浆E2及T的含量、脑组织M受体结合容量以及左侧股骨近段、中段、远段的骨密度和右侧股骨的弯曲断裂载荷。结果30月龄雄性大鼠血清T-SOD活性和血浆E2、T含量明显低于6月龄雄性大鼠(P<0.01);30月龄雄性大鼠血清MDA含量明显高于6月龄雄性大鼠(P<0.01);30月龄雄性大鼠脑组织M受体结合容量和股骨各段骨密度及弯曲断裂载荷明显低于24月龄雄性大鼠(P<0.05)。结论30月龄雄性大鼠已显著衰老,雄性大鼠脑衰老与骨衰老有关。     

雄性大鼠海马多巴胺受体的增龄性改变

采用放射配基结合分析法初步观察了大量海马多巴胺（Dopamine,简称DA）受体的增龄性变化及腹腔注射使DA受体不可逆失活的EEDQ（N－乙氧羰基－2乙氧基－2双氧喹啉）后,DA受体的恢复情况,结果表明老年大鼠海马DA受体结合力较青年大鼠差异不明显,注射EEDQ后两者DA受体亲和力均明显降低,但恢复时青年大鼠恢复的速度快于老年鼠者,表明老年大鼠海马DA受体比青年大鼠更容易受到伤害,恢复也更困难,这些变化可能与老年期的一些表现及老年病的学习记忆紊乱有一定关系。     

汉滩病毒受体与细胞因子TNFRⅠ真核表达载体的构建及稳定转染细胞系的建立

摘要 目的：构建带有荧光标签的汉滩病毒受体整合素β3与细胞因子TNFRⅠ的稳定转染细胞系。方法：构建目的基因的真核表达载体pIRES2-EGFP-β3和pIRES2-DsRed-TNFRⅠ(EC),并转染CHO细胞,直接荧光观察报告基因和荧光定量RT-PCR检测目的基因mRNA表达。结果：转染重组质粒pIRES2-EGFP-β3的细胞可检测到荧光报告基因和目的基因β3 mRNA的表达,转染pIRES2-DsRed-TNFRⅠ(EC)的细胞可检测到荧光报告基因和目的基因TNFRⅠmRNA的表达。结论：成功构建真核表达整合素β3与TNFRⅠ的稳定细胞系。     

利美尼定对高血压鼠基础和反射激活肾神经活动的影响及与血压和心率的关系

观察利美尼定对高血压鼠（spontaneous hypertensive rat—SHR）基础和反射激活肾交感神经活动（renal sympathetic nerve activity,RSNA）的影响．高血压鼠分为对照组和实验组,每组各10只．对照组给予生理盐水,实验组先后给予100μg／kg和200μg／kg利美尼定．记录并分析对照组及实验组的大鼠在基础以及在给予0．8和1．6Hz（15V,0．2ms）的电流刺激动物前肢神经后血压（blood pressure,BP）、心率（heart rate,HR）和肾神经活动的变化．利美尼定可降低血压、心率和RNSA幅值的下降（p〈0．05到p〈0．001）,且降低的幅值与剂量相关．两种剂量的昨美尼定均使肾交感神经活动的总功率及心律分量的百分比功率下降．在利美尼定的作用下,电刺激仍导致RSNA的总功率和心律分量的晨分比功率的增加（p〈0．05）．结果表明利美尼定不仅使血压、心率和RSNA的幅值出现了与剂量相关的降低,而且还使肾神经活动的总功率和心律分量的百分比功率睛降．肾交感神经活动的功率谱分析的结果提示了对高血压鼠利美尼定可能不通过体感系统影响RSNA的反射活性．     

慢性肾衰竭继发性甲旁亢患者中CaSR基因intron 5多态性的研究

为研究中国江苏汉族人中钙敏感受体(calcium-sensing receptor,CaSR)基因单核苷酸多态性与慢性肾衰竭(chronic renal failure,CRF)继发性甲旁亢(secondary hyperparathyroidism,SHPT)的关系．为此采集江苏省122例慢性肾衰竭继发性甲旁亢(CRF-SHFT)患者及25例正常人血液样本,通过PCR-RFLP的方法分析CaSR基因内含子5(intron5)BseR Ⅰ多态性;以标准方法测定血清钙、血清磷、血清全段甲状旁腺素(intact PTH,iPTH)3项生理指标;对检测的结果进行统计分析．结果发现,CRF-SHPT患者intron 5多态性频率与正常人没有明显差异;汉族人intron5多态性频率与其它种族有显著差异;TT基因型患者的Ca^2 、iPTH的血清浓度显著低于CC基因型的浓度,结论：CaSR基因intron5多态性频率具有种族差异性;intron5多态性与Ca^2 、iPTH的血清水平密切相关,影响CRF-SHFT病情的严重程度。     

CNTF非经典信号传导途径的神经保护功能

先前我们曾提出, 在已知的CNTF信号传导通路上游可能存在新途径介导其神经保护作用. 运用原代培养大鼠海马神经元、活细胞连续照相、活细胞计数、活细胞内游离[Ca²⁺]测定及gp130免疫组化等方法, 以Glu离子型受体激动剂L-NMDA诱发海马神经元损伤为细胞损伤模型, 用JAK/STATs阻断剂PTPi-2阻断CNTF已知的经典信号传导途径, 观察CNTF非经典信号传导途径的神经保护功能, 并探讨其可能机制. 结果表明, L-NMDA可引起海马神经元的损伤反应, CNTF可有效抑制L-NMDA对神经元的毒性作用; 使用PTPi-2阻断已知的CNTF经典信号传导途径中JAK/STATs后, CNTF保护海马神经元抵抗L-NMDA的损伤作用仍然存在. L-NMDA可引起海马神经细胞内游离Ca²⁺浓度([Ca²⁺]_i)迅速升高, CNTF可显著减弱L-NMDA引起的[Ca²⁺]_i升高, 阻断CNTF的经典信号传导途径中JAK/STATs并不影响L-NMDA引起的[Ca²⁺]_i升高, 表明除了已知的经典信号传导通路, CNTF发挥保护海马神经元作用还有其他信号传导途径, 这一途径与胞内[Ca²⁺]有关.     

一座照亮植物科学和人类的灯塔——怀念Winslow Briggs教授#br#

美国科学家Winslow Briggs是光生物学大师,在所热爱的植物生物学基础研究方面贡献了一生。他主导了很多突破性的研究,包括光受体向光素的发现。此外,他激励了几代科学家,成为他们的导师、榜样和生命科学研究的热情支持者。他的科学贡献和品格值得我们永远怀念。     

前列腺素E2受体生化性质及功能的研究进展

前列腺素E2受体(EP)是一类G蛋白偶联受体,主要与前列腺素E2(PGE2)结合,在多种疾病的发生中发挥作用.研究发现EP在机体几乎所有系统,如心血管系统、呼吸系统、生殖系统、神经系统等的病理反应中发挥重要作用,甚至与肿瘤的发生也有关联.研究并掌握EP相关性质对于临床疾病的治疗有着重要的意义,在国际上已成为研究和报道的热点.本文简要综述了关于EP前沿的研究成果,以期为广大研究者提供借鉴,为进一步阐释EP作用机制以及相关研究乃至临床治疗提供新的思路.     

可溶性重组全长人PPARγ的表达、纯化及功能表征

目的 建立可溶性表达、纯化有活性的重组全长人PPARγ蛋白的方法.方法 构建pReceiver-B13-SUMO-PPARγ质粒转化至Escherichia coli BL21(DE3)细胞,进行诱导表达,优化细胞生长环境;利用亲和色谱法纯化可溶性重组全长人PPARγ蛋白;以罗格列酮为阳性配体,以GW9662为拮抗剂,采用分子排阻色谱-高效液相色谱法(SEC-HPLC)法测定重组全长人PPARγ蛋白与配体药物的结合活性.结果 在优化条件(16℃、IPTG浓度0.4 mM、诱导时间18～20 h)下能获得高水平、可溶性重组全长人PPARγ蛋白;经亲和色谱一次纯化,得到纯度约为90％的重组全长人PPARγ蛋白;该蛋白与罗格列酮特异性结合率约为70％,Kd为500nM.结论 本文所建立的方法能可溶性表达、纯化得到有活性、纯度较高的重组全长人PPARγ蛋白,为该蛋白功能研究和配体药物筛选奠定基础.