新型肠毒素蛋白SElK编码基因的克隆测序、生物信息学分析和表达载体构建

采用微波加热法提取金黄色葡萄球菌基因组DNA,根据NCBI上登录的肠毒素基因sek设计引物,PCR克隆selk基因,对selk基因测序并进行生物信息学分析,在此基础上构建重组表达质粒p ET-32a(+)-selk.测序结果表明本研究克隆得到具有正确编码序列的新型肠毒素selk基因;Protparam分析表明在一级结构水平上该蛋白具有较高的热稳定性;亲疏水性分析表明SEl K蛋白是一个亲水性较高的蛋白质;同源建模表明SEl K蛋白的domain B结构域缺乏传统肠毒素所具有的胱氨酸环,但SEl K蛋白domain B中β-折叠片数量比传统肠毒素更高.这些结果为进一步研究SEl K蛋白的结构与功能奠定基础.     

四种药物诱发小鼠的骨髓及外周血红细胞微核的研究

用秋水仙素、氨基甲酸乙酯、丝裂霉素C和苯连续4或5天腹腔注射小鼠,观察骨髓多染红细胞微核出现率均值相应为5.625‰、4‰、8‰、7.2‰,与对照组1.5‰比较,有高度显著性差异(P<0.01)。外周血成熟红细胞微核出现率均值应为0.85‰、1.25‰、5.5‰、0.42‰,与对照组0.215‰比较,也有高度显著性差异(P<0.01)。结果表明:利用人、哺乳动物外周血成熟红细胞胞浆中所出现的微核作为对辐射损伤、药物及食品中毒、环境污染等研究中的一项生物学指标,具有一定的实践意义。     

一种PCR快速鉴定重组体DNA阳性克隆及插入方向的方法

当外源DNA以非定向的方式插入克隆载体时,需用测序或酶切的方法确定插入方向,上述两种方法或昂贵或费力。描述了一种快速、简便的PCR法,即利用载体的通用引物和目的片段的两个特异性引物直接扩增重组菌落,从而达到鉴别DNA插入方向的目的。     

DLS用于复方阿斯匹林剂同时光度测定

基于对最小二乘 (CPA矩阵 )法改进 ,提出CPA矩阵阻尼最小二乘算法 (DLS) ,在确定P系数矩阵对引入阻尼因子d从而降低了其病态程度对误差的敏感程度 将此法用于多组分复方药物分析如复方阿斯匹林片剂测定 ,操作简便 平均回收率 99 6 %～ 10 1 1% (± 0 51～ 0 4 ) %     

鸡痘病毒载体强启动子的构建和筛选

根据痘苗病毒天然启动子Ｐ７．５关键区的结构,人工合成４条寡核苷酸,形成早,晚期启动子,把合成的启动子进行不同组合,得到１０个较有代表性的不同启动子组合ＰＳ１～１０,用Ｐ７．５作对照构建成表达ＬａｃＺ基因的表达载体ｐＦＢＳ１～１０以及ｐＦＢＳ７．５。利用脂质体介导转染鸡痘病毒中国疫苗株２８２Ｅ４,获取重组病毒,经纯化后,分别测重组欠代ＣＥＦ后１０,２４,３６,４８,７２ｈ,表达β－半乳糖苷酶的活性,     

控制海水网箱养殖鲈鱼皮肤溃疡病的药物研究

研究了海水养殖鲈鱼皮肤溃疡病病原菌－哈氏弧菌Vharveyi对24种化学疗剂及15种中草药的敏感性,结果表明：环丙沙星、氯霉素、庆大霉素、头孢盂多、磺胺＋TMP、磺胺甲基异恶唑等6种化学疗剂及地榆、石榴皮、五味子等3种中草药抑菌作用较强,在此基础上进行了药物联用效果试验。     

γ-氨基丁酸载体衍生物的合成

γ－ 氨基丁酸是中枢神经系统的抑制性神经递质,但在生理条件下,γ－ 氨基丁酸的通透性较差,常通过其衍生物增强 γ－ 氨基丁酸的生理活性,作者以γ－ 氨基丁酸为原料合成了新γ－ 氨基丁酸的载体化合物［４－ （２,４—二羟基苯次甲氨基）丁酸酯］,并经元素分析、红外光谱和核磁共振谱验证这些化合物的结构     

药物定量分析中的核磁共振方法

该课题利用手性镧系位移试剂的诱导作用,通过对手性位移试剂浓度、合适的样品浓度等关键条件的选择和优化,使手性药物在NMR谱上两种不同构型对映体得到有效分离,从而建立了对手性药物对映体定量测定的方法.测定的方法既有直接测定,又有把样品先衍生化的间接测定.对映体的定量测定也较为成功,为进一步完善该方法打下了基础.     

酶固定化的一种新型载体

用对苯二酚,福尔马林和盐酸制得一类新型凝胶,可作为蛋白质及酶的载体,在ＰＨ４．０,低温下固定６ｈ效果较好,固定化酶的活力回收可达８０．５％,对木聚糖的转化率达９１．８％是一种成本较低,性能优良的酶载体。     

水稻同源重组型质粒载体的构建

根据同源重组机制,以水稻17S-5.8SrDNA 2.5 kb 同源片段和含有MT基因、Km r 基因的外源DNA片段构建了质粒载体pURKMT,并用电激法转化水稻愈伤组织,经Km 筛选,获得了对Km 抗性明显高于基础抗性的愈伤组织.经DNA斑点杂交检测,证实外源基因已整合到水稻基因组DNA中.