白斑综合征病毒感染褶皱臂尾轮虫的初步研究

对褶皱臂尾轮虫进行白斑综合征病毒（WSSV）攻毒，然后将攻毒前后的轮虫进行PCR及核酸探针斑点杂交检测．结果表明，攻毒后的褶皱臂尾轮虫呈WSSV阴性，说明褶皱臂尾轮虫可能不传播WSSV．     

3′碱基特异的PCR技术及β地中海贫血基因点突变的直接检测

PCR(聚合酶链反应)技术已广泛用于人类遗传病的基因诊断、临床医学、分子生物学、法医学及古生物学等各个领域的研究。在检测基因点突变时,通常采用PCR结合ASO(等位基因特异的寡核苷酸探针斑点杂交)或限制性内切酶酶解来判定。本文报道一个灵敏、     

小鼠肿瘤致死因子a诱导的TNFAIP1蛋白与DNA聚合酶6亚单位的相互作用

人类B12蛋白是第一个被鉴定受肿瘤坏死因子a的诱导的蛋白，在小鼠中又称为TNFMP1，其功能尚未见报导．采用蛋白质pull-down、荧光定位和免疫共沉淀分析一系列实验证明小鼠TNFMP1蛋白与DNA聚合酶8的亚单位PSO发生直接相互作用．由此推测TNFAIP1蛋白参与DNA复制过程，并为研究人TNFAIP1基因的功能提供参考．     

人源抗菌肽LL-37原核表达载体的构建及表达

为了使人源抗菌肽LL-37在原核表达载体中获得高效表达,在不改变LL-37氨基酸的基础上,根据大肠杆菌偏爱密码子表,替换LL-37部分密码子,设计一段新的LL-37序列.采用DNA Work设计4条互补引物,利用SOE-PCR技术扩增完整的LL-37目的片段,以pET-PPPI为载体,构建原核表达载体pET-PPPIL,并制备表达菌BL21(DE3)(pET-PPPIL),该菌经诱导高效表达LL-37融合蛋白,为后续纯化LL-37奠定了基础.     

应用FQ-PCR检测孕妇外周血中胎儿细胞含量

合成一对染色体单拷贝基因GAPDH特异的引物和一对Y染色体单拷贝基因SRY特异的引物,并合成两条特异性TaqMan探针,加等量的DNA到含有上述两个引物探针的PCR反应体系中,行荧光定量PCR,获得两种基因的定量值,通过这两种基因含量的比值,计算孕妇外周血中胎儿细胞含量.在30 μL FQ-PCR反应体系中,加入最少约0.05 ng 正常男性基因组DNA能够稳定地获得扩增曲线;在60例临床孕妇外周血标本DNA 的DCFQPCR扩增中有35例出现SRY扩增阳性,阳性率为58.3%;在这些标本中,GAPDH 基因Ct值范围在20~22之间;SRY 基因Ct值范围在33~40;经计算,胎儿细胞含量范围在1/10.4~1/10.6.     

一种新的基因克隆方法SLIC的可靠性分析

Li & Elledge 最近报道了一种新的不依赖于基因序列和连接反应的高效基因克隆方法(Sequence and Ligation Independent Cloning,SLIC).这种方法以同源重组为基本原理,利用T4 DNA聚合酶在插入片段以及载体的末端产生单链突出末端,通过同源序列在体外完成交换重组,达到基因克隆的目的.本研究通过大肠杆菌蓝白菌落筛选和对重组子的酶切分析,证明SLIC是否能够使DNA片段在设计的位点处发生精确的重组,实验证实,SLIC的重组是非常可靠的.     

黑麂粪便DNA的简易提取方法

收集九龙山自然保护区野外自然条件下的黑麂粪便样品,用无水乙醇保存于-70℃冰箱,经十六烷基三甲基溴化铵（CTAB）裂解液温浴粪便、酚／氯仿抽提及聚合酶链反应（PCR）纯化试剂盒纯化等步骤提取黑麂粪便DNA,并扩增线粒体DNA细胞色素b基因和2个微卫星位点进行检测;同时提取黑麂肌肉和皮毛样品的DNA作为对照．结果显示,该方法可以从粪便中提取到高质量的黑麂DNA,并可进行有效扩增,为黑麂及其他濒危鹿科动物的非损伤取样提供了一种简易方法．     

应用于PCR技术的DNA聚合酶

DNA聚合酶作为聚合酶链式反应（PCR）的重要因素之一,在PCR过程中起着至关重要的作用,在某种意义上甚至可以说,PCR技术就是耐热DNA聚合酶的技术。故综合研究聚合酶并改善其酶学性能,已成为分子生物学工作者关注的热点之一。本文就PCR技术产生至今DNA聚合酶的研究历史及现状进行简要综述。     

平喘灵冲剂对哮喘模型大鼠IgE,白介素-4和γ-干扰素表达的影响

观察平喘灵冲剂对哮喘模型大鼠IgE,白介素-4(IL-4)和γ-干扰素(IFN-γ)表达的影响,探讨该中药治疗哮喘的作用机理.将60只SD大鼠分为6组:正常对照组、模型组、平喘灵大、小剂量组、地塞米松组及平喘灵冲剂小剂量加地塞米松组.采用免疫放射法观察IgE的变化,半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)观察IL-4、IFN-γmRNA的表达.模型组IgE,IL-4 mRNA表达显著升高(P<0.05)、IFN-γmRNA表达显著降低(P<0.05);各治疗组IgE,lL-4 mRNA的表达均显著降低(P<0.05)、IFN-γmRNA的表达明显增高(P<0.05);平喘灵冲剂小剂量加地塞米松组作用更明显(P<0.05).平喘灵冲剂可能是通过减少IL-4的分泌合成,相对增加IFN-γ的合成,使IL-4和IFN-γ之间趋于平衡,从而抑制体内IgE的产生,发挥其抗气道炎症的作用,平喘灵冲剂与地塞米松合用有协同作用.