程序性细胞死亡配体1胞外区原核重组表达、纯化及其多克隆抗体制备

为制备程序性细胞死亡配体1胞外区多肽及其鼠源性多克隆抗体,根据UniProtKB数据库中公布的其胞外区基因序列(标识符:Q9NZQ7-1)和原核表达载体pET-28a(+)Nde I上游和Xho I位点下游的序列,设计合成带有同源臂的特异性引物.以合成的PD-L1胞外区基因为模板,PCR扩增程序性细胞死亡配体1胞外区基因并将其克隆至pET-28a(+)中,构建重组质粒pET-28a(+)-PD-L1-E,转化至大肠杆菌DH5α中,扩增并提取其质粒,然后将质粒转化至大肠杆菌BL21(DE3)中进行诱导表达.亲和层析镍柱纯化重组蛋白后,经十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳和基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱鉴定,确认表达蛋白正确.浓缩换液后用重组蛋白免疫Balb/c品系小鼠制备多克隆抗体,经ELISA检测,成功获得抗程序性细胞死亡配体1胞外区血清.该研究对于研发某些肿瘤伴随诊断检测试剂有重要意义.     

模型·问题·方法

一年一度的诺贝尔奖颁发是国际学术界的一大盛事.每一位诺贝尔奖得主都值得我们学习.不仅是他们的科学贡献,而且他们的研究历程都有许多可圈可点之处.     

线粒体学与生物医学新前沿

近来大量研究证明,线粒体除了合成ATP能量之外还有多种极为重要新的细胞功能,包括生成活性氧,调节氧化还原电势和信号转导,调控基因表达和细胞凋亡等,并在生物的生长、发育、衰老、疾病、死亡以及生物进化等方面都有重要意义,成为当前生命科学和分子医学中一个新生长点和前沿。     

植物-病原物互作中的细胞程序化死亡(PCD)

生物整体的死亡是司空见惯的现象。多细胞生物的细胞也存在着死亡现象,细胞的死亡可以分为两种形式:一种是坏死性或意外性死亡(Necrosis或Accidental death),它一般是物理、化学损伤的结果,即细胞受到外界刺激,被动结束生命;另一种死亡方式称为程序化死亡(Programmed cell death,PCD),这是一种主动的、为了生物的自身发育及抵抗不良环境的需要而按照一定的程序结束细胞生命的过程。因此,PCD是生命活动不可缺少的组成部分。在PCD发生过程中,一般伴随有特定的形态、生化特征出现,此类细胞死亡被称为凋亡(Apoptosis)。当然,也有的细胞在PCD过程中并不表现凋亡的特征,这一类PCD被称为非凋亡的程序化细胞死亡(Non-apoptotic programmed celldeath)。     

Obtaining transgenic rice resistant to rice fungal blast disease by controlled cell death strategy

The strategy of the two-component system,composed of Barnase and Barstar which encode RNase and a specific inhibitor to the RNase respectively, is adopted to obtain transgenic rice resistant to rice fungal blast disease. In this study, two chimeric promoters, induced by rice blast fungus pathogen (Magnaporthe grisea), are fused with Barnase respectively to construct two plant expression vectors, pWBNBS and pPBNBS together with the Barstar driven by CaMV 35S promoter. The resistance of the transgenic rice lines to rice blast fungus disease and rice blight disease are evaluated. The results show that (1) the expression of Barnase is induced in rice leaves when inoculated with the spores of Magnaporthe grisea; (2) the induced expression level of Barnase surpasses the level of Barstar, which elicits a similar hypersensitive response (HR) in the leaves, and the transgenic plant shows high resistance to the rice fungal blast disease; and (3) transgenic rice plants also show obvious resistance to rice bacterial blight disease. Taken together, these results suggest that the transgenic rice plants harboring this two-component system acquire relatively broad spectrum resistance against pathogens, especially high resistance to rice fungal pathogen.     

做好国际招标采购工作的几点经验和体会

本文总结了国际招标采购实际工作中的一些经验和体会，阐述了贯彻执行《中华人民共和国招标投标法》的重要性，为今后进一步做好国际招标采购工作提供条件。     

细胞凋亡相关因子的研究进展

主要论述了细胞凋亡的特征、细胞凋亡的调控因子及其调控机理,简要说明了细胞凋亡的生物学意义.     

两株NIH-3T3细胞间的基因表达差异研究

通过与细胞膜表面的受体TNFRI结合．肿瘤坏死因子-α(TNF-α)可诱导凋亡或坏死．有两株NIH-3T3细胞在TNF刺激下分别存在两种死亡情况：NIH-3T3(R)为caspase依赖的凋亡；而NIH-3T3(S)的死亡则不依赖caspase．为了深入研究两株细胞在TNF-α诱导下选择不同死亡方式的机理，本研究利用cDNA表达谱芯片对这两株细胞的基因表达差异性进行研究，筛选出差异表达的基因，利用逆转录PCR验证，从而鉴定出两个可能与细胞死亡相关的基因：calpain6和RIP3．     

按份共有优先购买权制度分析--以民政诉信达、泰兴隆案为例

本文通过对按份共有优先购买权的分析，指出现有立法关于按份共有人行使优先权缺乏实体和程序性规范，提出优先购买权存续的期限、对同等条件的明确界定以及构建程序化优先权制度的构想。     

2004年中国大陆科研机构在PLoS Biology上发表的研究论文

酸感应离子通道（ASICs）包括其子成员ASIC1a表现出具有高Ca^2＋渗透性，并在突触可塑性和酸诱导的细胞死亡中起到重要作用。中科院上海生命科学院神经科学研究所徐天乐研究小组与徐州医学院和中科院昆明动物研究所的合作者研究发现，缺血能够通过使ASIC1a-478和ASIC1a-479位点的丝氨酸磷酸化增强ASIC的渗流性，导致缺血性细胞死亡恶化。进一步研究发现，这种磷酸化作用是由钙调素依赖的蛋白激酶Ⅱ（CaMKⅡ）催化的，