植物幼小原胚的电激转化

用电激法将外源报告基因导入植物原胚获得瞬间表达．用酶解和显微解剖法分离出烟草含８～３２个细胞的幼小原胚与含２５０～４００个细胞的球形胚,导入ＧＵＳ和ＧＦＰ基因后,置于ＫＭ８ｐ培养基 １～２ｄ．当电场强度为 ５００～１５００ Ｖ／ｃｍ时,可检测到 ＧＵＳ蓝色反应和 ＧＦＰ绿色荧光,其中幼小原胚在电场强度为 ７５０ Ｖ／ｃｍ时,外源基因瞬间表达频率最高,为 ２．２％,球形胚在电场强度为１２５０ Ｖ／Ｃｍ时表达频率最高为 ５．９％．若以转化细胞占胚细胞总数的比例为有效转化频率,则幼小原胚的有效转化频率约为球形胚的７倍．     

葡萄与柴胡科间体细胞杂交再生杂种植株

狭叶柴胡原生质体用强度为 2 6 0 μW/cm2 紫外线照射 0 ,1 ,2和 3min后 ,与酿酒葡萄原生质体融合 .对融合再生的 1 9个单细胞克隆进行表型、同工酶、染色体和 5SrDNA间隔序列分析 .结果表明 ,它们均为体细胞杂种 . 1 1个杂种愈伤组织包括对称及不对称融合产物 ,在培养 5个月时 ,再生了体细胞胚、幼叶及叶丛 ;其中有 4个不对称融合的杂种细胞系在培养8～ 1 0个月后 ,再生出有根的完整小植株 .染色体观察表明 ,完整植株的再生与杂种细胞的染色体数目相对减少相关 .对部分小植株幼叶的核糖体 5SrDNA间隔序列差异的分析 ,证实它们为科间体细胞杂种 .     

表达cryIA/gna双价抗虫基因烟草兼抗棉铃虫和蚜虫

利用人工合成的、密码子优化后的雪花莲凝集素（ＧＮＡ）基因,与人工合成的ＣＦＭ ｃｒｙＩＡ构建了双价抗虫基因植物高效表达载体。通过根癌农杆菌介导转化烟草,获得２８株卡那酶素抗性植株,经ＰＣＲ及Ｓｏｕｔｈｅｒｎ印迹检测,证实了双价抗虫基因在烟草基因组中的整合,转基因烟草杀棉铃虫试验表明,４０％转基因烟草植株对棉铃虫具有高抗性;Ｂｔ杀虫蛋白ＥＬＩＳＡ检测获得与虫试较一致结果,抗虫性较强株Ｋ１１号ＣｒｙＩ     

加工番茄早衰果实腐烂及丛生株现象剖析

<正>1制酱番茄的早衰1.1早衰的症状一般从6月底7月初开始即有零星发生,7月底至8月中旬发病最重。受害植株的叶片先呈黄色,后变为灰色或灰黄色,最后全株枝、叶干枯死亡。发病最初呈点状零星发生,以后逐渐蔓延,最后连成一片或直至全块地植株全部死亡。一般在沙荒地或有机质含量低的地块上发病较重,植株长势弱的地块较长势旺的地块发生重,遮阴地较开阔地发病重。     

夏玉米高产抓“三防”

一防脱肥。夏玉米穗期植株的高产特征是，茎秆粗壮、节间短，叶片宽厚、叶挺有力，叶色浓绿根系发达。如果叶片在穗期有转黄趋势，要防止后期脱肥早衰。     

木槿幼叶培养再生植株的细胞组织学研究

以木槿(Hibiscus syriacus)幼叶为外植体,培养在附加6-BA_3+IAA(或IBA)_(0.1)+GA_(0.5)+LH_(100)的1/2MS培养基上,通过细胞组织学观察表明:接种3—10天,接触培养基的细胞体积增大,核染色加深,并移向细胞中央,有的细胞已开始分裂,接种15—20天,表皮,叶肉的栅栏细胞、海绵细胞,以及维管束附近的薄壁细胞等,都有细胞分裂,并形成愈伤组织,培养30天后,叶片结构紊乱,形成大量的分生细胞团或细胞群。同时,还有维管分子、维管组织结节,以及芽原基和叶原基的相继出现,芽原基进一步培养,形成无根苗,转移无根苗到生根培养基上,20天后,可形成完整再生植株,其结构与正常木槿植株一致。     

石防风胚性愈伤组织的诱导和体细胞胚的发生

石防风幼苗的根在含0.1-50mg/L 2,4-D的 MS 培养基中能诱导产生愈伤组织,最适浓度为0.5mg/L.愈伤组织来源于中柱内部的细胞。在0.5mg/L2,4-D 存在下,细胞分裂生长并发育至胚性细胞团或原胚,转移至无激素培养基后,愈伤组织表面及内部分化出发育阶段不同的体细胞胚,最后发育成为完整植株。在初生幼苗的胚轴上(有时在根或叶)常有次级胚的发生,它们能继续长成次级苗,并在苗上再次长胚,如此不断,直至多次。由此可见石防风体细胞胚发生的能力,是十分强大的。     

由三倍体西瓜下胚轴诱导植株再生的研究

将三倍体西瓜(Citrullus Vul(?)aris Schrad。)下胚轴切段接种在添加0.02mg/L2,4-D和0.6mg/L6BA的MS培养基上,可诱导出生长旺盛、结构致密的愈伤组织.将愈伤组织转移到含不同浓度的6BA、IAA、IBA和三十烷醇的分化培养基上,分化出了芽和根,进而长成了正常的植株.将不定芽接种在含0.2～0.4mg/L6BA和6mg/L维生素P_1的MS培养基上.可得到许多簇生芽和植物体.用蛭石代替琼脂的生根培养基对于根系的生长和试管苗的移植有良好的效果.经细胞学观察表明,由三倍体西瓜下胚轴诱导出再生植株的染色体倍性有所变化,即有一倍体(n=11)、二倍体(2n=22),三倍体(3n=33)和非整倍体等.     

应用低能离子束介导法获得水稻转基因植株

水稻转基因的研究自1988年首次获得转基因植株以来,近几年又取得了很大进展,这一方面是由于水稻原生质体培养技术的不断改进和提高,使得以原生质体为受体系统的PEG和电激法介导的转基因研究更趋于成熟,尽管这一途径技术难度大并存在着基因型限制,但仍以其较好的可靠性而被认为是最富成效的方法;另一方面、新近发展起来的基因枪.激光微束、超声波等物理手段介导的植物转基因方法,都减去了原生质体培养的步骤,并在很大程     

毛花猕猴桃愈伤组织诱导与植株再生

从毛花猕猴桃（ＡｃｔｉｎｉｄｉａｅｒｉａｎｔｈａＢｅｎｔｈ）田间生长的茎段、种子无菌条件下萌发的下胚轴及试管苗的茎段和叶片得到愈伤组织。田间来源的茎段诱导愈伤组织较难，愈伤组织生长缓慢；下胚轴及试管苗茎段和叶片容易产生愈伤组织，愈伤组织生长旺盛。消毒时间、接种方法、基因型和培养基都可能影响到田间来源的茎段愈伤组织产生。在ＭＳ附加玉米素或６－苄氨基嘌呤（ＢＡＰ）的培养基上下胚轴来源的愈伤组织不经转代即分化芽和根。试管苗茎段和叶片在附加玉米素或Ｎ－（２－氯基－４－吡啶基）－Ｎ′－苯基脲（ＣＰＰＵ）的ＭＳ培养基上培养一代也分化出芽、试管苗茎段在附加０．００２５ｍｇ／ＬＣＰＰＵ和０．１ｍｇ／Ｌ吲跺乙酸（ＩＡＡ）的ＭＳ培养基上产生愈伤组织、芽的分化和苗生长都较理想；试管苗叶片则以附加０．０２５ｍｇ／ＬＣＰＰＵ和０．１ｍｇ／ＬＩＡＡ或０．５ｍｇ／Ｌ玉米素和０．１ｍｇ／ＬＩＡＡ的ＭＳ培养基较好。当苗伸长至１ｃｍ或以上时切下，转入ＭＳ基本培养基（大量元素减半）上后可形成完整植株。