牛小肠碱性磷酸酶部分性质研究

摘要：用正丁醇抽提、硫酸铵分级沉淀、EAE-32柱层析和Sephadex G-150 凝胶过滤,从牛小肠中分离纯化出牛小肠碱性磷酸酶（BIAP）.提纯倍数为50.69,比活力为48.87U/mg蛋白.酶液经SDS-PAGE呈现单一条带,且不含DNA核酸酶.该酶催化对硝基苯磷酸二钠（p-NPP）水解反应的最适pH值为9.7,pH小于6.5大于11.5均不稳定;最适温度为45℃,高于50℃不稳定.Km值为0.29mmol/L.45℃,pH9.7时最大反应速度（Vmax）为4.6μmol/(L•min).利用SDS-PAGE测定酶亚基的分子量为66KD. Mg2+、Mn2+和Ca2+对酶有不同程度的激活作用,Zn2+和EDTA对酶有抑制作用。随着Mg2+、Zn2+和EDTA浓度增加,270nm处紫外吸收值增加.     

效应物对牛肠激酶活性的影响

肠激酶(EK,EC 3. 4. 21. 9)是一种在基因工程产品中广泛应用的工具酶.以小分子荧光物质甘氨酰-天冬氨酰-天冬氨酰-天冬氨酰-天冬氨酰-赖氨酰-β-萘胺(Gly-Asp-Asp-Asp-Asp-Lys-β-naphthylamide, GD4K-β-naphthylamide) 为底物,采用荧光跟踪法研究了不同氨基酸、几种常用有机溶剂、EDTA、DTT等对牛肠激酶(BEK)活力的影响.结果表明:L-赖氨酸(L-Lys)、丙酮、EDTA、DTT对该酶的活性有较强的抑制作用,IC50分别约为25,50,50 和120 mmol/L.进一步研究了L-Lys与丙酮对BEK活力的抑制机理以及抑制类型,结果表明:L-Lys对该酶的抑制机理为可逆抑制,其抑制类型为竞争型抑制类型,其抑制常数KI为12.02 mmol/L.丙酮对BEK的抑制类型表现为不可逆抑制.     

论美国成年监护替代方式中的身体照顾决定制度

美国成年监护替代方式中的身体照顾制度程序简单、省时且成本较低,与尊重自我决定权、最小限制等先进理念相一致,符合国际人权保障标准,延迟或者阻止了成年监护的设立,引起了国内外诸多成年监护研究专家的关注。为了解决愈来愈多的成年监护需求,构建我国的身体照顾决定制度具有紧迫性和重要的现实意义。     

职技高师类院校对口生源《牛生产学》课程教学模式的探索与实践

《牛生产学》是职技高师类院校动物科学专业的一门必修专业课,该课程的基本特征是集理论性、实践性和前瞻性于一体。鉴于职技高师类院校对口生源的专业知识结构和本底特点,为有效培养高质量的“双师型”人才,对《牛生产学》课程的教学方法、选择并优化其知识结构和教学内容等进行了探索与实践,并收到了预期成效。     

牛病毒性腹泻病毒牦牛株E0基因生物信息学分析及原核表达与抗原性检测

为研究牦牛BVDV E0蛋白的生物信息学及抗原性, 本研究对本实验室克隆并测序的牦牛病毒性腹泻病毒E0基因进行了生物信息学分析;同时用含有酶切位点、起始密码子、终止密码子的引物重新扩增E0基因, 并连接PMD18-T载体, 经BamHⅠ和HindⅢ双酶切后, 将获得的E0片段克隆至PET-28A原核表达载体, 构建重组质粒并转入JM109.酶切、质粒PCR鉴定正确后转入rosetta(DE3)菌进行诱导表达.经SDS-PAGE检测结果显示目的基因获得了较高的表达, 表达的融合蛋白约33ku, 经western-blotting检测表明目的蛋白具良好的有抗原性.     

一种Schiff碱铜配合物对双氧水漂白的催化作用

水杨醛与牛璜酸以1∶1的比例在无水乙醇中反应,生成水杨醛缩牛璜酸席夫碱,再与C u（Ⅱ）金属离子络合,合成Schiff碱铜配合物,用红外光谱证实了其结构。通过＂正交试验法＂研究了该配合物对双氧水漂白棉织物的催化作用。实验对漂白后的棉织物的断裂强度、白度等指标进行了测试及分析,结果表明,该配合物对双氧水漂白有较好的催化作用。当配合物的浓度为0.4 g/L,pH=9,温度为60℃,时间为60 m in,此时棉织物的白度和断裂强度较好。     

牛体外受精胚胎移植的应用研究

探讨了利用牛ＩＶＦ技术,在国外生产纯种肉牛胚胎运用国内进行大批量移植后受体母牛的妊娠率及产犊情况,共移植受体母牛１５８头,妊娠率（９０ｄ）为２１．４％￣４８．５％,共计产纯种犊牛５５头,５￣８日龄胚移植给发情第７ｄ的母牛能够得到较高的妊娠率（４３．８％￣５０．０％）,受体母牛在前两交伯移植妊娠率（３０．０％￣３５．０％）,明显高于第三次（１５．４％）以后的妊娠高,研究结果证实,在国外生产的的占ＩＶ     

野生成年棕色田鼠社会行为研究

对成年棕色田鼠 (Microtusmandarinus)的社会行为进行了实验室观察 .结果发现 ,当陌生的两只雄鼠相遇时 ,优势雄鼠和从属雄鼠间的社会行为有明显的区别 ,优势鼠接近、攻击、追赶对方的频次和持续时间明显的多于从属鼠 ,而从属鼠逃离和防御行为多于优势鼠 ;优势鼠的体重明显的大于从属鼠 ,而且攻击行为和社会探究行为的频次与体重呈正相关 ,非社会行为无明显的差别 .但当两只熟悉的雄鼠相遇时 ,则比陌生雄鼠相遇表现出较多的喜好行为和较少的攻击行为 .观察还发现 ,单独生活的异性个体相遇时表现出较少的攻击行为和较多的喜好行为 ;相反 ,和其它家庭成员生活的两个陌生异性个体相遇时表现出较多的攻击行为 .两个雌性相遇和两个雄性相遇表现出相似的行为模式 .以上结果表明 ,熟悉性、性别、个体大小、接触近况是影响棕色田鼠社会行为的重要因子 .     

熊去氧胆酸的新合成路线和方法的研究

熊去氧胆酸原有合成路线是从牛、羊胆汁中提取牛胆酸作为原料,经多步复杂反应转化为鹅去氧胆酸的羧基进行甲酯化保护,再经Ｂｅｎｋｅｓｅｒ反应加氢还原得到熊去氧胆酸经,最后再进行脱甲酯处理,得到熊去氧胆酸,合成的路线、工艺复杂、产率低;新的合成路线是由鸡胆汁中直接提出提取鹅去氧胆酸,然后选用高专一性复合型催化剂,加氢还原合成熊去氧胆酸,整个合成过程不仅大大简化合成路线和工艺、降低了成本,而且使熊去氧胆酸,     

一种牛精子膜蛋白的纯化及在生殖中的作用

牛精子经ψ=0.5%的NP-40洗脱后,先经伴刀豆凝集素Con A(Concanavalin A)亲和层析分离,经SDS-PAGE电泳,得到相对分子质量Mr分别为32×103,26×103,20×103的3种与Con A结合的糖蛋白CBG(Con A binding glycoprotein).再将亲和层析分离所得蛋白成分经葡聚糖凝胶(Sephadex G-100)层析柱进一步纯化,得到Mr为26×103的单一成分.将26×103 CBG免疫兔后制得抗血清,经PAP免疫组织化学染色发现:26×103的CBG抗原主要分布于牛精子的顶体区,同时鼠精子表面也有同样分布,说明26×103的CBG抗原具有种同保守性.后将26×102的CBG免疫雌鼠,发现其产仔率由对照组的(8.5士2.6)只(n=12)减少到(4.3士1. 8)只(n=24),经t检验(不配对,单尾),二者间差异极显著(p＜0.001).本实验结果表明:26×103的CBG在精卵结合中可能发挥重要作用,并有可能开发为人工避孕疫苗.