油菜细胞质雄性不育相关基因的筛选

甘蓝型油菜波利马(Brassica napus pol.)细胞质雄性不育系是一种很有实用价值的油菜不育类型.目前关于其分子机制的研究已证实,线粒体ATP合成酶的一个亚基ATP6与其雄性不育相关.本实验以ATP6作为诱饵蛋白,应用酵母双杂交共转化的方法筛选与ATP6相互作用的蛋白质.在获得的阳性克隆中,发现了一个与tAPX基因及其表达的蛋白都具有较高同源性.它是活性氧清除的重要酶类,很可能与细胞质雄性不育间建立起了某种联系.     

应用Bulked-DNA寻找白菜型油菜细胞质雄性不育基因的RAPD标记

采用随机扩增多态DNA(RAPD)标记方法从白菜型油菜细胞质不育系与保持系的Bulked-DNA中筛选出3个与白菜型油菜细胞质雄性不育基因连锁的RAPD标记,DNA片段大小约为1300,1000和900bp.与不育基因之间的连锁距离分别为38 cm,24 cm,4 cm,LOD值为0.5,1 9,03.     

新质源水稻雄性不育系马协A的遗传分析

用马协Ａ和珍汕９７Ａ与１３个水稻品系杂交,对两的遗传行为进行了比较。结果表明,马协Ａ和珍汕９７Ａ的恢保关系基本相同,它们与丛广４１Ｂ、密阳２３的杂产后代表现对基因的分离规律,与明恢６３的杂交后代表现２对基因的遗传规律;等位性测验表明两的核不育基因是等位的。马协Ａ和珍汕９７Ａ在遗传上属同一类型。     

Construction of heteroduplex DNA and in vitro model for functional analysis of mismatch repair

Functional deficiency of mismatch repair (MMR) system is one of the mechanisms of tumorigenesis. With the development of the investigation and the requirement from the clinical diagnosis and treatment it is necessary to build up a method to evaluate the functional status of the whole MMR system in the concerned tumors. The original ssDNA and dsDNA from wild type (wt) bacteriophage M13mp2 and its three derivates with mutation points in the     

不同细胞质雄性不育小麦阳离子过氧化物酶和IAA—氧化酶？…

选用Ｃ－型，Ｍ－型，Ｍｔ＾２－型，Ｇ－型４个不同类型的细胞质雄性不育小麦为材料，以其保持系中国春作对照，用低ＰＨ值提取酶液。对分蘖期，拔节期，孕穗期和抽穗期叶，穗和花药中的阳离子过氧化物酶和ＩＡＡ－氧化酶活性进行了研究。     

栖热菌噬菌体TSP4密码子偏嗜性及其对基因异源表达的影响

 为了探索噬菌体TSP4、栖热菌模式菌株Thermus thermophilus HB27中6种蛋白编码序列和Escherichia coli基因组遗传密码子使用偏嗜性,探索TSP4基因密码子偏嗜性对其基因异源表达的影响本研究利用生物学软件Editseq和RSCU算法统计噬菌体TSP4密码子使用频率并分析其偏嗜性,与栖热菌HB27的同源基因以及常温菌E.coli基因组的密码子使用偏嗜性进行对比分析.结果显示,噬菌体TSP4与栖热菌HB27优势密码子相似度高达85%,而与E.coli的相似性仅有65%.为了验证分析结果,选取TSP4基因组中一个潜在分子伴侣基因序列在E.coli BL21和E.coli Rosetta(补充了BL21菌株中缺失的6个稀有密码子)中进行异源表达.噬菌体TSP4与其宿主菌HB27之间密码子高相似性说明在长期的进化过程中TSP4在基因水平上形成对宿主的一种适应性机制.异源表达结果显示,分子伴侣基因在E.coli BL21中未见明显表达,但在Rosetta中高效表达,说明Rosetta中补充的 6个稀有密码子明显有助于分子伴侣基因的表达,该结果也进一步证明密码子偏嗜性是否一致在很大程度上影响基因的表达.     

春性甘蓝型油菜细胞质雄性不育系的结实性评价

在两个环境条件下,考察了4个春油菜不育系的育性、花器性状和结实性.结果表明:4个不育系的育性稳定性和结实性差异较大,105A的不育性稳定且彻底,花瓣张开角度大(83.64°),结实指数和单株产量最高;318A和025A的育性稳定性较差,花瓣张开角度小(41.18°、44°),结实指数和单株产量均较低;改良144A的上述性状介于105A和025A之间.影响不育系结实指数的主要因素是花期闭蕾率和花瓣张开角度.花瓣张开角度小会增加蜜蜂从基部进入花朵内采蜜的几率,从而降低蜜蜂对不育系的授粉效果.     

Salinispora arenicola CNP193新颖NRPS基因簇在Streptomycetes coelicolor M512中的异源表达

异源表达海洋专性放线菌salinispora arenicola CNP193新颖NRPS基因簇。PCR扩增基因簇两端各约1 000 bp的片段,融合PCR将两片段融合,同质粒pC AP01双酶切后连接,构建基因簇捕获载体pC AP01-preP KS/NRPS,通过TAR(transformation-associated recombination)克隆技术构建基因簇捕获质粒pC AP01-PKS/NRPS,运用三亲接合转移法将pC AP01-PKS/NRPS转化streptomycetes coelicolor M512。HPLC检测对照菌株和重组菌发酵液乙酸乙酯提取物初步表明基因簇有表达产物产生。为新颖salinispora arenicola CNP193新颖NRPS基因簇的鉴定奠定基础。