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911.
以拟南芥cop1cDNA为探针,从豌豆CDNA文库中克隆到了豌豆cop1cDNA。序列分析表明,它全长为2863bp,其中包括604bp5‘非编码区,243bp3’非编码区和2016bp编码区,编码672个氨基酸。在大肠杆菌中实现了豌豆cop1基因的高效表达。对拟南芥、豌豆和番茄3种植物cop1的序列同源性比较表明,cop1可能是一种进化上很保守的蛋白质。 相似文献
912.
α-淀粉酶和糖化酶的表达及酿酒酵母工程菌的构建 总被引:7,自引:0,他引:7
将切除了5′端非编码区50碱基对片段的黑曲霉糖化酶GAIcDNA与大麦α淀粉酶基因重组进大肠杆菌酵母穿梭载体,构建重组表达质粒pMAG11,转化酿酒酵母GRF18,获得含α淀粉酶和糖化酶双基因的酵母工程菌GRF18(pMAG11).在酵母PGK基因启动子和终止信号的调控下,α淀粉酶和糖化酶基因获得高效表达,99%的表达产物分泌至胞外.在含w=15%的可溶性淀粉的YPS培养基中培养44h,淀粉水解率达到99%,并能发酵产生酒精 相似文献
913.
绿色荧光蛋白在分子细胞生物学研究中的应用 总被引:1,自引:0,他引:1
罗忠训 《湖北大学学报(自然科学版)》1999,21(2):164-167
绿我荧光蛋白具有优良的特性,在蓝光或长紫外光的激发下,不需要任何外源底物或内源辅助因子的参入就能发出绿色荧光,绿色荧光蛋白基因的表达可用来监控活细胞或生物体中基因表达和蛋白质的定位,这是一个革命性的进展,而且,对基因DNA序列的改造可能使绿色荧光蛋白的发光特性更加优良,从而共应用范围会更加广泛。 相似文献
914.
非妊娠小鼠子宫内膜白血病抑制因子基因表达研究 总被引:1,自引:0,他引:1
白血病抑制因子(LIF)能抑制胚胎干细胞的分化和保持其增殖能力,并与胚泡着床及胚胎早期发育有着密切的关系。经实验证实,LIF基因在子宫内膜中的表达具有高度的时间限制性。采用反转录聚合酶链式反应技术(RT-RCR)对小鼠子宫内膜LIF基因表达进行了研究,结果显示:妊娠第4天小鼠的子宫内膜组织的样本在电泳图的538bp处出现清晰的电泳带,表明该组织有LIF基因的强表达;而在所检测的13只非妊娠小鼠子宫内膜的组织样本中均未发现LIF基因表达讨论了小鼠动情周期中各阶段的孕激素水平对子宫内膜LIF基因表达产生的影响,提出了一定的孕激素水平是启动LIF基因表达的必要条件 相似文献
915.
精子介导的报道基因在转基因泥鳅胚胎中的表达 总被引:4,自引:0,他引:4
以含lacZ基因的质粒pCH110为外源DNA,采用外源DNA和精子在保存液里混合保温处理,再进行精,卵的体外受精的方法,观测了精子介导的报道基因在转基因泥鳅胚胎中的表达,4次重复实验均获得了较稳定的实验结果。有9.6%的个体呈现了。lacZ基因表达的阳性,对有关实验结果进行了分析和讨论。 相似文献
916.
用基因重组技术构建人钙调素基因Ⅲ(hCaMⅢcDNA)表达载体pBV/hCaMⅢ,并在大肠杆菌DH5α中经热诱导获得可溶性CaM蛋白的高效表达.将纯化的重组hCaM与异型双功能剂SPDP及鼠血清白蛋白(MSA)交联,免疫Balb/c小鼠,用常规细胞融合技术制备单克隆抗体(McAb),得到3株稳定分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞.间接ELISA和斑点免疫结果证实,三种单克隆抗体均与自制的rhCaM和CaM标准品起特异反应.用免疫组化法对精子中CaM定位,发现CaM主要分布于精子头颈部,不育组CaM+精子率((45.0±7.5)%)显著低于生育组((68.5±10.5)%). 相似文献
917.
应用基因芯片显著性分析(SAM)方法,从1组伯基特(Burkitt)淋巴瘤的基因表达数据中,选取了与分期特征相关性比较显著的90个特征基因进行通路分析,发现在相关通路中频繁出现的9个特征基因同属于基因本体论(GO)中的信号转导子类,并且普遍具有与肿瘤发生发展机制相关的信号转导、细胞凋亡、免疫应答等多项功能.其中,有2项功能与伯基特淋巴瘤恶化相关是首次报道. 相似文献
918.
在培养胶质细胞机械损伤模型上利用RNA探针原位杂交技术研究了睫状神经营养因子(CNTF)mRNA在星形细胞胶质化过程中的表达及其自调控.结果显示,在未划伤组,O-2A前体细胞中CNTFmRNA表达水平高于原浆型星形胶质细胞(Flat-A).损伤后,未划伤区Flat-A及O-2A细胞中CNTFmRNA的表达水平无显著变化,然而在划伤沟两侧的Flat-A细胞中CNTFmRNA表达增加,伸出的肥大细胞质型突起因深染而显得十分明显.加入外源CNTF2h后引起划伤沟两侧及中间未划伤区Flat-A细胞CNTFmRNA表达增加,24h达到高峰,48h后下降到初始水平.以上结果提示,CNTFmRNA在受到损伤的星形胶质细胞中表达增高,外源性CNTF能促进Flat-A细胞CNTFmRNA表达. 相似文献
919.
为研究MMP-2PEX结构域在大肠杆菌BL21(DE3)中的最佳表达条件,直接从构建好的表达载体PET-MMP2 PEX中高效表达MMP-2 PEX结构域蛋白。经SDS-PAGE与软件分析,确定其最佳表达时间为2h,菌液密度值为0.6时,所表达的蛋白含量最高,而IPTG在一定浓度范围内对表达含量不产生影响。 相似文献
920.
利用基因枪法将含有4个不同基因的3个质粒共转化由粳稻品种鄂宜105号和鄂晚5号种子胚诱导的愈伤组织(5-10d龄)。从轰击的986块愈合组织中共再生出169株独立的转基因水稻植株(转化率为17%)。PCR/Southern blot分析显示70%以上的转基因植株含有所有4个基因。GUS组织化学分析、Western blot和或RT-PCR分析表明所有4个基因的共表达率为70%。未观察到任何质粒在整合中存在优势,转基因拷贝数也与基因表达量无关。遗传分析证实外源基因在后代植株中大多以孟德尔方式遗传。从其R1代为3:1孟德尔方式遗传的后代R2代植株中,鉴定含有3个或4个不同基因的转基因纯合植株系。PCR/Southern blot分析证实了这些转基因纯合植株系。这些系的植株具有相似的外源基因表达量。我们证实通过基因枪介导的共转化,结合常规育种方法筛选可以获得含多基因的转基因水稻纯合植株。这项技术为利用基因同时改良作用多个性状提供了一种途径。 相似文献