杂种优势遗传基础的研究进展

由于杂种优势的利用是农业增产的重要途径，杂种优势的遗传基础研究一直受到高度重视。近十年来发展的分子标记技术及构建的高密度遗传图谱，为阐明杂种优势的遗传基础提供了有力的工具，杂种优势研究有了新进展，通过对已有资料的分析研究，从遗传差异，基因表达调控、基因效应、基因网络系统等方面探讨了杂种优势的遗传基础及其研究进展。     

人色素上皮衍生因子(PEDF)基因的克隆及在大肠杆菌中的表达

实验主要是应用基因重组技术从人胎盘中克隆人的PEDF基因，构建了pBV/PEDF重组质粒，并使之在大肠杆菌中诱导该因子表达成功，这为PEDF蛋白的获取和进一步研究奠定了基础。     

人表皮生长因子（hEGF）基因合成及在枯草杆菌BS9920中分泌表达

采用PCR技术人工合成了一段长约175bp的人表生长因子（hEGF)的基因片段，为了便于克隆，在该片段的5′端设计了Pst I的酶切位点及与pUS186载体signal sequence相连接的碱基部分，在3′端设计了HindⅢ的酶切位点及终止密码子，经DNA分析，合成的片段与已发表的hEGF在序列上完全一致，之后将其克隆至枯草杆菌分泌型质粒载体pUS186上，构建重组载体pUSE并转化一株枯草杆菌突变菌株BS9920感受态细胞，以PCR法快速筛选重组菌落，RIA检测结果表明BS9920阳性转化子能够表达和分泌hEGF。     

哮喘患者肺泡巨噬细胞中IL-6mRNA表达的研究

应用逆转录酶链反应及索氏转移杂交技术分析过敏性支气管哮喘患者(激素治疗组9例,非激素治疗组12例)及正常对照组(10例)肺泡巨噬细胞(alveolarmacrophages,AM)中白细胞介素一6(interleukin-6,IL-6)的mRNA表达。IL-6/β-actin比值表示。结果发现未用激素治疗的哮喘患者AM的IL-6/β-actin为0.66±0.32,显著高于正常对照者(0.34±0.13,P<0.01)及激素治疗组(0.41±0.15,P<0.05)。提示表达IL-6的AM在哮喘的发病机理中可能具有重要的作用,而皮质激素治疗哮喘的机制之一可能与其抑制AM表达及产生IL-6的能力有关。     

人免疫缺陷病毒Tat基因及LTR调控元件对基…

构建了不同长度人免疫缺陷病毒ＬＴＲ启动子的荧光酶报告基因（Ｌｕｃ）表达质粒；瞬时转染Ｊｕｒｋａｔ细胞；同时与含ｔａｔ基因的表达质粒ｐＣＶＩ共转染；通过荧光酶活性的测定，分析Ｔａｔ与ＬＴＲ对基因表达的作用机制。实验结果表明ＬＴＲ－１５８上游区有负调控元件的存在；证实了Ｔａｔ的反式激活作用可以大大提高ＬＴＲ指导的基因表达水平。研究结果提示ＬＴＲ中的增强子序列及其结合蛋白ＮＦ－ｋＢ在高水平的ＬＴＲ转录以     

低功率毫米波辐射对HL60细胞基因表达谱的影响

摘要：研究低功率毫米波辐射对HL60白血病细胞基因表达谱的影响。应用基因芯片检测频率41.32GHz的毫米波辐射HL60白血病细胞和未辐射毫米波HL60白血病细胞组基因表达差异,并进行RT-PCR方法验证IL-7、EGF和LGALS3基因变化。 结果与对照组比较,毫米波辐射60min后,HL60细胞增殖,基因芯片检出基因表达上调18个和下调306个,在下调的基因中,RT-PCR 检出IL-7、EGF和LGALS3基因下调与基因芯片结果一致。表明低功率毫米波可导致HL60细胞基因表达谱发生变化,这些变化的基因与HL60细胞增殖功能相关。提示基因表达变化是低功率毫米波辐射HL60细胞所致生物学反应的重要因素。     

满江红鱼腥藻glnA启动子/GUS嵌合质粒在烟草中的表达

将满江红鱼腥藻ｇｌｎＡ启动区与ＧＵＳ报告基因连接,构成表达载体并导入烟草,在茎、叶中得到表达．这一结果为研究原核蓝藻与高等植物间转录因子识别、基因表达调控提供了有价值的信息,同时为构建实用载体开拓了新路．     

在胚胎性横纹肌肉瘤中呈下调表达的新基因HUMCyr61的分离与克隆

横纹肌肉瘤是软组织中较常见的恶性肿瘤,它包括胚胎性横纹肌肉瘤、腺泡型横纹肌肉瘤和多形性横纹肌肉瘤3种类型.其中,胚胎性横纹肌肉瘤常见于小儿,多侵犯眼眶、鼻咽部、泌尿生殖道、胆道、腹膜后和四肢等部位.恶性程度比多形性横纹肌肉瘤高,预后极差,极易复发,晚期常发生转移.我们在同源扩增筛选人类新型细胞因子基因的过程中,从人胚胎骨骼肌ｃＤＮＡ分子库中分离到一个新的ｃＤＮＡ片段(ＢＡ＿1克隆).经在Ｇｅｎｂａｎｋ库中查新,发现它与Ｇｅｎｉｎｉ等人1996年注册的一个ＥＳＴ序列(长304ｂｐ,Ｇｅｎｂａｎｋ注册号Ｚ50168)呈100%同源.他…     

Pfu酶基因的克隆、表达、纯化及长距离PCR的研究

用ＰＣＲ方法从Ｐｙｒｏｃｏｃｃｕｓ ｆｕｒｉｏｓｕｓ的总ＮＤＡ扩增出了含有Ｐｆｕ ＤＮＡ ｐｏｌＡ基因的２．３ｋｂ片段,并将该基因克隆入ｐＧＥＭ－Ｔ载体。用ＮｃｏＩ和ＸｈｏＩ对重组质粒ｐＴ－ｐｆｕ进行了酶切。并将ｐｆｕ ｐｏｌＡ基因捶 入表达载体ｐＥＴ－３ｄ－Ｘ。     

血小板衍化生长因子及其受体在人胰腺癌局部浸润转移中作用的实验研究

观察胰腺组织及其癌变标本中血小板衍生长因子（ＰＤＧＦ）及其受体（ＰＤＧＦＲ）基因表达的变化关系,以探讨它们在人胰腺癌局部侵袭和转移过程的作用,用诺真法（Ｎｏｒｔｈｅｒｎ－ｂｌｏｔ）和原位杂交（ｉｎｓｉｔｕｈｙｂｒｉｄｉｚａｔｉｏｎ,ＩＳＨ）方法,采用ｃＤＮＡ探针（ＰＤＧＦＡ,Ｂ,ＰＤＧＦＲα,β）对两株胰腺细胞（Ｐａｔｕ８９８８,Ｐａｔｕ８９０２）１５例胰腺癌手术切除标本和８例正常胰腺组织标本进行