全文获取类型
收费全文 | 1128篇 |
免费 | 29篇 |
国内免费 | 117篇 |
专业分类
系统科学 | 14篇 |
丛书文集 | 33篇 |
教育与普及 | 169篇 |
理论与方法论 | 3篇 |
现状及发展 | 5篇 |
综合类 | 1050篇 |
出版年
2024年 | 6篇 |
2023年 | 5篇 |
2022年 | 12篇 |
2021年 | 18篇 |
2020年 | 15篇 |
2019年 | 15篇 |
2018年 | 16篇 |
2017年 | 10篇 |
2016年 | 17篇 |
2015年 | 26篇 |
2014年 | 35篇 |
2013年 | 32篇 |
2012年 | 34篇 |
2011年 | 41篇 |
2010年 | 36篇 |
2009年 | 46篇 |
2008年 | 73篇 |
2007年 | 54篇 |
2006年 | 47篇 |
2005年 | 48篇 |
2004年 | 85篇 |
2003年 | 111篇 |
2002年 | 103篇 |
2001年 | 86篇 |
2000年 | 50篇 |
1999年 | 50篇 |
1998年 | 65篇 |
1997年 | 18篇 |
1996年 | 38篇 |
1995年 | 30篇 |
1994年 | 27篇 |
1993年 | 9篇 |
1992年 | 2篇 |
1991年 | 3篇 |
1990年 | 8篇 |
1989年 | 3篇 |
排序方式: 共有1274条查询结果,搜索用时 112 毫秒
11.
改造人干扰素α2b基因在大肠杆菌中获得高效表达的理论方法 总被引:2,自引:1,他引:1
按照E.coli甚高表达基因中同义密码子使用,密码子内和密码之间碱基关联的EENS模式,对人干扰素α2b基因编码区中的同义密码子进行置换,理论上使得人干扰素α2b基因在E.coli中的表达水平有非常显的提高,在理论上,未改造的人干扰素α2b基因在E.coli中的表达水平为CAI=0.323,CDI=0.574,CEI=0.629,是较低表达水平的基因,估计实际表达水平在10~10^3mol/ce 相似文献
12.
应用PCR技术从人胎肺cDNA文库中扩增tumstatin基因编码序列,克隆至pET-3c载体构建非融合表达的重组质粒pET-3c-tum,并在大肠杆菌E.coli BL21(DE3)中获得高效表达.表达蛋白经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分离、切胶回收后免疫新西兰大白兔,获得ELISA效价高达1∶1 000的特异性兔抗人tumstatin抗血清. 相似文献
13.
采用氨基葡萄糖法检测转基因烟草植株叶片几丁质酶活力,结果表明几丁质酶基因在转基因植株中酶活力增强,与β—1,3-葡聚糖酶基因的协同作用下酶活性最强,几丁质酶活力的测定对外源基因表达效率的检测是可行的. 相似文献
14.
信息素在八肋游仆虫接合生殖过程中起着重要的诱导配对作用,为了进一步研究其诱导机制,根据已知的基因序列,应用PCR技术,扩增信息素G3基因,并将该基因插入表达载体pGEX-6P1中,构建了重组表达质粒pGEX-6P1-G3.重组菌在37℃下,经1.0mmol/L IPTG诱导,12%SDS-PAGE分析,在37kDa处出现明显的特异目的带。 相似文献
15.
以甘蓝(Brassiaca oleracea)为材料,取幼叶分离mRNA,反转录合成cDNA,以cDNA第一链为模板,通过PCR扩增,获得甘蓝磷酯酶D(Phosphorate Lipid Dehydrolase,PLD)HKD2功能区的基因片段.对其进行Blast分析,结果表明,分离的目的片段核苷酸序列与Genbank中报道的甘蓝PLD基因相比同源率为99.7%,只有2个碱基发生改变.将得到的PLD基因片段插入植物表达载体pAT940,构建了PLD基因反义表达载体pATC—rPLD,为下一步进行抗逆转基因作物选育打下基础. 相似文献
16.
从牛泡沫病毒BFV3026感染的胎牛肺细胞中提取Hirt DNA,PCR扩增BFV3026 gag基因。序列分析确证后,将其克隆于原核表达载体pET32A,重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导,使Gag蛋白得以高效表达。SDS-PAGE及Western blot证实:表达蛋白占菌体总蛋白的40%,本工作的完成为Gag蛋白功能的研究奠定基础。 相似文献
17.
通过PCR从苋属植物千穗谷(Amarathus hypochondriacus)的总DNA中扩增出苋菜抗菌肽(Ah—AMP)的核基因片段,序列分析结果表明该基因长261bp,编码一个由86个氨基酸组成的Ah—AMP前体多肽。在构建Ah—AMP基因的植物表达载体pBinAH916后,通过根癌土壤杆菌介导方法转化了烟草。转化再生植株和T1代转基因烟草的PCR和Southern blot分析表明,AA—AMP基因已整合到烟草的染色体中,并为单拷贝整合。T1代转基因烟草的Nouthern blot分析结果表明,AA—AMP基因在转基因烟草中至少在mRNA水平上能正常表达。对T0代转基因烟草进行烟草青枯病的抗病性试验,筛选出两株抗性较强的植株。对T1代抗青枯病的统计分析发现,其抗病性比起始品种SRl分别提高了2.24和1.62个级别;其病情指数比起始品种降低49.6%和37.3%。对黑烃病也表现一定的抗性,主要表现在推迟发病时间,减缓发病速度上。这些结果表明AA—AMP基因在植物抗病基因工程研究中可能是一个有潜在应用价值的基因。 相似文献
18.
锌指蛋白基因家族是人类最大的基因家族之一,目前已知的很多转录调控因子都是锌指蛋白成员^[1]。初步克隆了一个与RBAK基因有着高度同源性的人类C2H2型锌指蛋白新基因,经国际基因命名委员会批准命名为ZNF325,此基因位于染色体7p22,长2697个碱基,含5个外显子,在基因组DNA上长15kb。它编码的蛋白质全长462个氨基酸,含15个C2H2型的锌指。Northern Bolt分析表明该基因在人类早期胚胎的各个组织中普遍表达,在肺和脑中的表达水平最强,但在肝中的表达随着胚胎的发育而逐渐减少。它的结构和表达特征预示着它编码的是一个具DNA结合功能的转录调控因子。 相似文献
19.
KRAB/C2H2型锌指蛋白是一类具有重要功能的转录调节因子,初步克隆了一个新的人类KRAB/C2H2型锌指蛋白基因,经国际基因命名委员会批准命名为ZNF382,此基因长2824bp,含5个外显子,4个内含子,在基因组DNA上长约23kb,它编码548个氨基酸,在氮末端含一个KRAB框,碳末端含一个未成形的锌指(VZF)和9个锌指(ZF),Northern杂交结果表明,ZNF382mRNA在早期胚胎时期(至少在妊娠34d之前)就开始表达,在不同时期人类胚胎组织中广泛表达,包括小脑、肾、大脑、肺、心脏、骨骼肌、舌和肾上腺,在成人组织其表达限制在心脏,其结构和表达特征预示着ZNF382在心脏发育和功能的发挥起着潜在的作用。 相似文献
20.
纳豆激酶基因克隆及其在大肠杆菌中活性表达研究 总被引:5,自引:1,他引:5
以纳豆芽孢杆菌基因组DNA为模板,PCR扩增了纳豆激酶基因(natto kinase gene)中编码前肽、成熟肽的核苷酸序列(pro-NK),构建大肠杆菌表达质粒pTYB102,转化大肠杆菌ER2566。在IPTG诱导下,分别在15℃(14h)、30℃(3h)、37℃(2h)条件下培养,pTYB102均能表达出有活性的纳豆激酶。实验证实纳豆激酶基因得到活性表达需要Pro序列。SDS-PAGE表明,15℃和30℃和37℃培养表达的杂蛋白更少。薄层扫描测定表达的纳豆激酶占菌体总蛋白30%以上。 相似文献