人αB干扰素基因在PGK1启动子和α因子前导序列控制下在酵母中的表达和分泌

借助化学合成的寡聚核苷酸接头将酵母PGK1启动子和α因子前导序列相连构建成一个αB干扰素基因的分泌表达载体YFD65.含质粒YFD65的酵母菌BJ1991能分泌表达αB干扰素,分泌到培养基中的αB干扰素的量为10~8U/L.     

建立网络节点方程的简便方法

对含有各种线性受控源的网络，当节点导纳矩阵不对称时，其计算程序很复杂，本文给出一种直接建立节点方程的方法。该方法较传统方法、简便、准确。     

领导心理与上行公文写作策略——行政公文受体研究初探

论文从分析领导心理入手,认为成就心理是领导的心理基石,并以请示的写作为例,针对领导心理提出了上行公文的一种写作策略———准确表达与角色适应策略。认为上行公文写作时应明确话语角色关系、适应受体(即领导)决策心理和适应受体接受习惯,这样,才能更好地实现行文意图。     

试说《子夜》中叠词的运用

茅盾的著名小说《子夜》在叠词的运用上是很有成就的。首先是出现的叠词形式多种多样,其次是在表情达意上达到了近乎完美的境界。     

利用密勒(Miller)定理分析放大电路时应注意的问题

本文主要论述了用Miller定理在分析放大电路时所起的特殊作用,Miller定理条件转换问题,以及“Miller定理等效”的适用范围。     

重组人甲状旁腺激素(1-34)在大肠杆菌中的表达与纯化

将化学合成的rhPTH(1-34)基因用PCR扩增后,克隆至表达载体pET-35b( ),使rhPTH(1—34)融合于纤维素结合结构域(CBDdos)的羧基端,并得到高效表达．融合蛋白经纤维素树脂亲和层析纯化后,经Factor Xa裂解释放出rhPTH(1-34),再通过纤维素树脂亲和层析、C4反向高效液相色谱纯化得到rhPTH(1-34)纯品．每升培养液可获取3mg高纯度的rhPTH(1-34)．经质谱测定,所得样品的分子量为4117．0Da,与rhPTH(1—34)理论分子量一致．     

重组人脑钠素在大肠杆菌中的表达、纯化与鉴定

人脑钠素(hBNP,humanbrainnatriureticpeptide)是心室分泌的由32个氨基酸组成的多肽激素.临床研究表明,hBNP是治疗充血型心衰竭的一种安全有效的多肽药物.化学合成脑钠素全基因,以pET32a为表达载体,构建了硫氧还蛋白-脑钠素(thioredoxin＿hBNP)融合蛋白表达质粒,并转化至大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导,融合蛋白的表达量占全菌蛋白量的25%以上.融合蛋白经肠激酶裂解、Zn＿Sepharose亲和层析和C4反相高效液相层析,从每升培养液中可获取4mgrhBNP,纯度达到95%.经质谱测定,rhBNP样品的分子量为3464Da.体外活性测定结果表明,rhBNP样品对兔胸主动脉条具有显著的血管舒张效应,其ED50为(2.24±0 58)×10-6mg/mL.     

重组人胸腺肽α1在大肠杆菌中的表达纯化和鉴定

用PCR将化学合成的人胸腺肽α1基因扩增并克隆到pMD18-T载体中,经过KpnI／SacI酶切、连接将胸腺肽基因插入到表达载体pET32b中硫氧还蛋白下游．将重组质粒转化至表达宿主BL21(DE3)中,经IPTG诱导,Zn—Sepharose亲和层析纯化以及复性处理,从每升菌液中可获得35mg硫氧还蛋白-胸腺肽α1融合蛋白．经凝血因子Xa酶切、Zn—Sepharose亲和层析以及反相高效液相色谱纯化获得3．8mg重组人胸腺肽．小鼠胸腺细胞凋亡实验表明,重组人胸腺肽能显地抑制地赛米松诱导的小鼠胸腺细胞的凋亡,且该抑制作用与重组人胸腺肽的浓度呈剂量依赖关系．     

意义的生成与表达——论梅洛-庞蒂早期意义与表达问题

梅洛-庞蒂通过改造格式塔心理学有关概念,指出意义内在于人类的行为结构,诞生于人类原初的知觉经验;通过对知觉经验的现象学分析,揭示出意义内在于人类的表达活动并与之同时发生.他进一步认为,语言表达活动奠基于又超越了身体表达活动,这一举措强调了知觉经验的首要地位,堵塞了一切纯粹思维、纯粹思想的超越之路,同时,知觉经验世界与语言世界的划分也为他试图沟通这两个领域带来了麻烦.     

A proteomic analysis of bacterial strain<Emphasis Type="Italic">Sinorhizobium fredii</Emphasis> RT19 subjected to salt shock

Sinorhizobium fredii RT19, a strain of freeliving bacteria, was subjected to salt shock and its protein expression profiles were analyzed by differential display proteome approaches. The results of separation by two-dimensional polyacrylamide gel electrophoresis (2D PAGE) showed that the number of resolved proteins was 481, 465 and 424, corresponding to salt-free control, 5 and 50 min 1 mol/L salt treatment, respectively. Among the resolved proteins, 82 in total had altered expression in response to salt-shock stress. 26 out of the 82 proteins were induced and 23 were completely inhibited, while 12 were up-regulated and 21 down-regulated in response to salt shock. In addition, the appearance of differentially displayed proteins responding to different salt shock periods is also reported. The identity of the 26 induced proteins was revealed by matrix assisted laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry (MALDI-TOF/MS) followed by database searching. Among them, 20 were assigned to proteins with known functions. Their roles in response to salt shock stress are discussed.