Cd2+、Cu2+对坛紫菜生化效应研究

研究了不同浓度(0．1、0．5、1．0、10、20mg／L)和不同培养时间(12、24、48、72h)下，重金属(Cd2 和Cu^2 )对坛紫菜(Porphyra haitanensis)核酸(RNA和DNA)含量、过氧化物酶(POD)活性的影响．结果表明：1)10、20mg／L Cd^2 、Cu^2 暴露，POD活性先上升(48h前)后下降(48h后)，其它浓度组POD活性均随污染时间的延长而升高．24、48、72h均出现比较良好的剂量一效应关系．2)Cd^2 和Cu^2 对RNA、DNA含量的影响基本上表现为先上升后下降的时间效应关系，同一污染物浓度越大越早出现下降．同时出现随暴露剂量的增加，RNA、DNA含量先上升后下降或全部下降的剂量一效应关系．     

血管内皮生长因子反义核酸增强HL60和K562细胞对As2O3的敏感性

目的：探讨血管内皮生长因子(VEGF)反义核酸能否提高HL60和K562细胞对三氧化二砷(As2O3)的敏感性。方法：采用经筛选所得的最优反义核酸(A7)，20个碱基经过全硫代修饰；以脂质体介导转染细胞，反义核酸和AsO3联合作用72h以后，用MTT法检测细胞生长情况，求IC50值；用ELISA法检测培养液中VEGF蛋白的浓度，用流式细胞仪检测细胞凋亡百分数。结果：VEGF反义核酸可显降低HL60、K562细胞对As2O3的IC50值，下调VEGF蛋白的表达，增加As2O3诱导的HL60、K562细胞凋亡作用。结论：VEGF反义核酸具有增强HL60和K562细胞对As2O3的敏感性，增强As2O3诱导的HL60和K562细胞凋亡作用；提示内源性VEGF蛋白具有使细胞产生耐药性的作用。     

致病性大肠杆菌O157:H7的基本特性与基因组研究进展

大肠杆菌(Escherichia coll)是条件致病菌，在正常惰况下一般不致病。致病性菌株Escherichia coll O157：H7能够引起出血性肠炎，给人类带来严重危害。本简要介绍致病性大肠杆菌O157：H7的基本特性，着重从基因水平上对致病性大肠杆菌Escherichia coll O157：H7和非致病性大肠杆菌Escherichia collK—12的核酸序列比较后得到的有关大肠杆菌O157：H7致病性和毒力功能方面的结果作了简要的综述。     

生命科学史上的划时代突破--纪今DNA双螺旋结构发现50周年

在20世纪乃至整个生命科学发展史上,没有什么工作比沃森(J.D.Watson)和克里克(F.H.C.Crick)于1953年提出的DNA分子双螺旋结构模型,更具有决定意义.然而,人们对DNA分子的清楚认识,却经过了近百年艰难曲折的研究历程.     

猴副流感病毒RT-PCR检测方法的建立及初步应用

为对易感动物以及相关生物材料和生物制品进行猴副流感病毒(SV5)的快速病原检测,根据SV5病毒SH基因序列,设计了1对引物,建立了检测SV5的RT-PCR方法,通过优化确定了RT-PCR体系的最佳工作条件。核酸序列分析显示,所扩增片段与GenBank数据库中报道的SV5病毒株WR-21005序列同源性达到97%,证明该方法特异。敏感性分析显示,该方法可检测的最小RNA浓度为2.1 ng/μL,能检出的最小病毒滴度为3.98CCID50/0.1 mL。初步将该方法运用于猴、地鼠、常用传代细胞和猴源生物制品的检测,在所检测的样品中均未检出猴副流感病毒核酸序列。结果表明,所建立的RT-PCR方法可用于猴副流感病毒(SV5)的诊断和分子流行病学调查。     

Ultrasensitive monitoring of ribozyme cleavage product using molecular-beacon-ligation system

This paper reports a new approach to detect ribozyme cleavage product based on the molecular-beacon-ligation system. The molecular beacon, designed in such a way that one-half of its loop is complementary to ribozyme cleavage product, is used to monitor ligation process of RNA/DNA com-plex in a homogeneous solution and to convert directly cleavage product information into fluorescence signal. The method need not label ribozyme and ribozyme substrate, which is fast, simple and ultra-sensitive for detection of cleavage product. Detection limit of the assay is 0.05 nmol/L. The cleavage product of hammerhead ribozyme against hepatitis C virus RNA (HCV-RNA) was detected perfectly based on this assay. Owing to its ultrasensitivity, excellent specificity, convenience and fidelity, this method might hold out great promise in ribozyme reaction and ribozyme gene therapy.     

生命科学及其相关学科的研究(十)

简要介绍了转基因树、人造核酸、活菌生物净水剂、棉花害虫生态治理体系、蛋白质阻止癌细胞生长以及世界上第一头人工牦牛技术开发的进展和产生的效益。     

试论发现DNA双螺旋结构的模型方法

DNA双螺旋结构模型的发现是20世纪生命科学最伟大的成就.本文从DNA双螺旋结构发现的角度,对模型方法的应用、意义和原则等进行论述和探讨.     

核酸毛细管电泳的研究

毛细管电泳以极高的分辨率，作为分子生物学的研究方法被广泛关注。特别是在毛细管中添加凝胶或胶束进行的毛细管电泳，对DNA快速和高分辨率的分离被应用在人类基因组DNA的分析中。本文拟就DNA的测离和人类基因分析的最新方法毛细管电泳进行评述。     

用荧光双链引物特异扩增并定量核酸

描述了一种利用特殊的双链引物－－突触引物，用于核酸扩增的特异定量检测，在传统的引物的5'端标记荧光物质，而在引物的互补序列的3'端标记荧光淬灭剂以封闭其延伸。二者杂交即成双链突触引物。在制备PCR反应混合物阶段以及加热的初期，突触引物保持稳定的双链结构而不能引导扩增，在退火阶段，突触引物部分解链导致引物延伸，荧光物质与淬灭剂分开而产生荧光。利用人β珠蛋白基因对此方法进行了验证。这种可自行退火的荧光引物不仅简单地实现了实时扩增，同时比常规的热启动PCR更有效地提高了扩增的特异性。