荧光原位杂交技术在染色体生物学中的应用

荧光原位杂交技术(Fluorescence in Situ Hybridization，简称为FISH)是20世纪80年代开始发展起来的一种新的定位技术．本文简要介绍了荧光原位杂交技术的创立、发展及其在染色体生物学中的应用．     

乳腺癌中PTEN蛋白表达及其与ER和PR表达的相关性

目的 探讨乳腺癌中FFEN抑癌基因表达和ER、PR表达之间的关系。方法采用免疫组化S-P法分别检测80例乳腺癌及癌旁组织中PTEN蛋白及ER、PR的表达：结果PYEN蛋白在乳腺癌组织中的阳性表达率显著低于癌旁组织，两者相比差异有显著性（P〈0．01）：PTEN蛋白在淋巴结转移组中的阳性表达率明显低于淋巴结无癌转移组（P〈0．01）。PTEN蛋白分别和ER、PR在80例乳腺癌中的表达呈正相关（P〈0.05；P〈0．05）。结论PTEN蛋白的表达缺失与ER、PR表达失衡在乳腺癌的发生、发展中起重要作用。     

口腔扁平苔藓中Caspase-3和PTEN 蛋白的免疫组织化学观察

目的：探讨Caspase-3和FIEN蛋白在口腔扁平苔藓病变发生发展中的作用及两者间的关系。方法：采用S—P免疫组化方法对28例口腔扁平苔藓及5例正常口腔黏膜中Caspase-3和PTEN蛋白表达进行检测。结果：口腔扁平苔藓病损中Caspase-3的阳性率上皮层和固有层均为100％，与正常口腔黏膜相比，表达有显著统计学意义（P〈0．01）。口腔扁平苔藓病损中PTEN蛋白阳性率为100％，与正常口腔黏膜相比，无统计学差异（P〉0．05）。口腔扁平苔藓中Caspase-3与PTEN蛋白表达呈正相关，（P〈0．05）。结论：Caspase-3和PTEN蛋白均参与口腔扁平苔藓病变的发生及发展过程，且两者之间具有相关性。     

南方鲇成鱼垂体的组织学与组织化学

运用组织学、组织化学技术对南方鲇成鱼垂体结构在生殖周期中的变化进行了研究.结果表明:南方鲇垂体为背腹型腺体,由神经垂体和腺垂体组成,神经垂体位于腺垂体中央;腺垂体前外侧部位于腺体前部,由PRL、ACTH细胞和少量GH、GTH细胞组成;中外侧部位于腺体中部及后部腹面区域,由GH、GTH和TSH细胞组成;中间部位于腺体后部背面,包括MSH、GTH细胞和首次在鱼类报道的大型泡状细胞.GTH和ACTH细胞结构在生殖周期中发生明显的变化,与生殖活动密切相关.     

扩张蛋白在旱稻根的免疫组化定位及对旱稻抗旱性的表达分析

扩张蛋白是一类细胞壁非酶蛋白，在植物发育进程中起着重要作用.本实验以旱稻为材料，通过AtEXP1抗体对扩张蛋白在旱稻根中的定位及可能的作用机制进行了探讨.研究表明扩张蛋白参与了旱稻根系的生长发育，且更可能是促进了侧根、不定根的生长.利用OsEXP3基因特异性片段，即部分3′-UTR片段作为探针模板，通过Northern杂交技术对其在4种抗旱性不同的旱稻以及干旱胁迫条件下的表达特性进行了分析.结果显示： OsEXP3基因受到干旱胁迫的正调控，且其表达量与旱稻的抗旱性呈现正相关.由此推测，在干旱胁迫条件下，扩张蛋白很可能是通过促进侧根与不定根的生长发育来提高旱稻的抗旱性.     

孤儿受体TR3蛋白及其mRNA在大鼠睾丸中的定位和表达研究

孤儿受体(Orphan receptor)是一类目前还未发现其配体的核受体,它与类固醇激素受体、甲状腺激素受体及维生素D3受体同属一个家族。目前发现的孤儿受体成员众多,其中TR3(NGFIB,Nur 77)是一种独特的孤儿受体,它是早期即刻表达基因(immediate-early gene)的产物,其表达可被血清生长因子等多种刺激所诱导。TR3的生理功能目前还不完全清楚,已知TR3参与丘脑下部-垂体-肾上腺轴激素调节和神经调节,在T细胞活化所诱导的细胞程序化死亡(apoptosis)中起关键作用,并调控类固醇21-羟化酶基因的表达。目前国际上对TR3的研究主要集中在基因结构和调控机理方面,而对其在睾丸内受体蛋白和其mRNA的定位和表达的研究则未见报道。我们用免疫组织化学和原位杂交的方法观察了孤儿受体TR3蛋白及其mRNA在大鼠睾丸中的定位和表达。结果表明,在大鼠睾丸中孤儿受体TR3蛋白特异定位于生精细胞,其mRNA在生精细胞特异表达,说明TR3在精子发生过程中可能起着重要作用。     

盐藻3—磷酸甘油脱氢酶基因克隆

采用Ｌａｍｂｄａ置换型载体ＥＭＢＬ３构建了盐藻基因组文库，文库大小为１．８×１０４，插入片段大小为１０～２０ｋｂ，从盐藻基因组文库中获得３个３－磷酸甘油脱氢酶基因的阳性克隆，斑点杂交证实了原位杂交的真实性     

GAP-43mRNA在正常成年大鼠中枢神经系统中的分布

生长相关蛋白质(growth associated protein,GAP-43)作为神经元发育、神经生长、再生、突触形成和重建的标志蛋白质,在神经生长和发育区表达非常丰富.尽管中枢神经系统发育成熟后GAP-43及其mRNA总体含量会骤然下降,但是在某些轴突生长不再发生的脑区,仍有一定量的GAP-43及其mRNA存在.用免疫细胞化学法已经阐明了GAP-43在成熟脑和发育脑中的分布,但合成GAP-43的神经元需要以原位核酸杂交手段检测mRNA来确认其部位.     

黑线仓鼠睾丸组织化学与生殖能力的比较研究

采用一系列组织化学方法，较全面地揭示了黑线仓鼠睾丸组织曲细精管中各期生精细胞的组织化学特点及其与生精能力的关系，提出了糖原细胞分裂同步化程度和精子的ＰＡＳ反应强弱程度可分别作为衡量睾丸组织生精能力和精子受精能力大小的指标．     

大白鼠淋巴结树突状细胞的组织化学特征

以Wistar大鼠淋巴结为材料作ATP酶(ATPase)、非特异性酯酶(NSE)、5′-核苷酸酶(5′-N)和酸性磷酸酶(ACPase)的组织化学反应,可显示淋巴结中的一些树突状细胞。ATP酶反应具有特异性,既可显示出树突细胞的形态,又可根据分布情况进一步确定其为镶嵌型树突状细胞,还是Nossal氏滤泡树突网状细胞。