冬青叶中黄酮类化合物提取方法的研究

以茶果冬青为原料，经微波破壁，水作溶剂回流提取黄酮类化合物，并用2SI-106A型大孔吸附树脂分离纯化，研究了含水量、微波处理时间、处理次数及溶剂种类等因素对提取率的影响．结果表明，实验的最佳条件为：含水量20％，微波处理3次，每次30S，料液比1：6和1：4各回流提取1h；经2SI-106A型大孔吸附树脂吸附，50％乙醇洗脱，提取率为96．3％，精制后产品收率为4．38％，总黄酮含量25．7％．     

沙冬青AmDREB1F基因的克隆与表达载体构建

DREB(dehydration responsive element binding protein)类转录因子在植物耐逆性中起重要作用.利用RNA-Seq技术从蒙古沙冬青(Ammopiptanthus mongolicus)中鉴定出一个受低温和干旱强烈诱导的DREB基因,并用PCR方法克隆到其完整编码区的cDNA和gDNA.二者均由726bp组成,故无内含子.推测其蛋白产物含241个氨基酸残基和1个保守的AP2结构域及核定位信号,很可能定位于细胞核.因为与拟南芥等植物DREB1F蛋白同源性较高,故将该基因命名为AmDREB1F.将其编码区cDNA片段成功构建到植物表达载体pCAMBIA3301上,为进一步研究其功能奠定了基础.     

落叶型冬青雌、雄株茎段的组织培养技术

【目的】建立落叶型冬青(Ilex verticillata L.)雌雄株的组织培养快繁体系。【方法】以落叶型冬青优良雌株和雄株的幼嫩茎段为材料, 通过添加不同浓度的6-BA、IBA、NAA、氯吡苯脲(CPPU)等植物生长调节剂,对外植体消毒时间、诱导培养基、增殖及生根培养基进行了优化。【结果】落叶型冬青雌株、雄株茎段外植体腋芽诱导最好的培养基分别为MS+0.5 mg/L 6-BA+0.2 mg/L IBA和MS+0.5 mg/L 6-BA+0.5 mg/L IBA,诱导率分别为93.3%和83.3%; 雌株和雄株丛芽增殖效果最好的培养基分别是MS+1.0 mg/L CPPU+0.2 mg/L NAA和MS+1.0 mg/L CPPU+0.1 mg/L NAA,增殖系数分别达3.48和1.25; 落叶型冬青在1/2 MS+0.4 mg/L NAA培养基上雌、雄株的生根率分别为26.7%和20.0%; 添加一种促根剂后,雌、雄株的生根率可达66.7%和46.7%。【结论】该组织培养体系特别是雄株组培体系的建立可为落叶型冬青苗木的快速繁殖提供技术支持。     

苦丁茶化学成分研究

对苦丁茶叶绿水提、醇沉、明胶沉淀后,得干膏,经为６．３％,并对其中总黄酮及总生物碱进行了测定,其质量分数分别是３．０４％和１４．９９％。     

我国苦丁茶冬青种质资源的形态学研究Ⅰ.茎叶的形态学研究

新种苦丁茶冬青(IlexkudingchaC.J.Tseng)自1981年发表以来,有关它与若干近缘种的主要形态差异及其分类学地位等问题一直存在着争议.本文系统地介绍了苦丁茶冬青不同种质材料的茎叶形态学研究结果.作者在分析和总结近年野外考察和种质资源普查过程中所积累资料的基础上,对200余份从各个省区和居群中引种并定植于海南大学苦丁茶种质资源库中的苦丁茶冬青种质材料的茎叶进行了一次系统的形态学研究.其中茎的形态学研究内容包括主干形态,分枝与主茎的夹角,一年生茎或小枝的形态以及幼茎(嫩芽中)的形态;叶的形态学研究包括叶序,叶形,叶尖,叶基,叶缘,叶柄,脉序,百叶重,叶片长度、宽度以及叶片长/宽比值等内容;对茎、叶及嫩芽等器官表面的毛被情况亦作了系统的观察。揭示了苦丁茶冬青不同种质材料在茎叶形态上的一些共同特征和变异规律,发现了少数种质材料之部分分枝上存在对生叶,并发现了若干份介于I.kudingcha和I.pentagona之间的中间型种质材料。根据形态学研究结果(以及将另文报道的RAPD分析结果)判断,这些中间型种质材料很可能是I.kudingcha和I.pentagona天然的种间杂交后代。作者对苦丁茶冬...     

沙冬青热稳定抗冻蛋白的分离纯化及其部分性质研究

加热处理后的沙冬青提取液依次经过DEAE-cellulose A52层析,Sephacryl S300层析,高效液相Poros20HP2层析和高效液相Source 15Q层析,分离纯化到抗冻蛋白amAFP28. amAFP28能修饰冰晶形态.在SDS-PAGE和IEF中,纯化的amAFP28显示单一蛋白染色带,其分子量约为28 kDa, 等电点是6.68.经Schiff试剂检验,amAFP28不含碳水化合物.氨基酸组成分析表明,amAFP28富含亲水性氨基酸.圆二色谱（CD）显示amAFP28的二级结构组     

蒙古沙冬青根蛋白的提取及双向电泳体系的建立

以蒙古沙冬青根为实验材料,采用TCA/丙酮沉淀法和Tris-饱和酚提取法分别提取根可溶性蛋白.用Bradford法测定蛋白质浓度,计算蛋白提取率,并对所提取的蛋白样品进行双向电泳检测及电泳体系优化.结果表明,选择Tris-饱和酚法提取蛋白,采用24cm、pH5～8的IPG胶条,上样量900μg,可获得分辨率高、重现性好的双向电泳凝胶图.     

《新水浒》与清末民初的《水浒》批评

20世纪初的两部《新水浒》的创作是当时社会政治经济变革的反映，与同时期的《水浒》批评一样，都具有很强的时代意识。《新水浒》在叙事模式上也表现出转型时期的特征。     

苦丁茶中总皂甙含量的测定

建立了苦丁茶（Ilex kudincha C.J.Tseng)总皂苷F含量的测定方法。以苦丁茶皂苷F作对照品，Φ＝8％香草醛无水乙醇溶液和Φ＝77％硫酸溶液为显色剂，60℃恒温反应10min，分光光度法测定苦丁茶总皂苷的含量。最大吸收波长534nm，在6－36μg/mL范围内浓度与吸光度线性关系良好，相关系数r=0.9995。平均回收率为97.17%,RSD=1.69%。测定了苦丁茶不同产品的总皂苷含量，结果表明方法简单便，重现性好。该法可作为苦丁茶质量检测的方法之一。