蛇床子总香豆素的杀螺活性研究

研究蛇床子总香豆素的杀螺效果,及对钉螺酯酶同工酶以及糖原的影响,以探究其杀螺机理.用不同浓度(1.25、2.50、5.00、10.00、20.00、40.00mg/L)蛇床子总香豆素处理液处理钉螺,发现10mg/L以上浓度处理3~4d可100%杀死钉螺,且处理液浓度和处理时间与钉螺的死亡率显著的正相关.用浸杀48h的LC50浓度(4.64mg/L)蛇床子总香豆素药液浸泡钉螺,于浸泡后24、48、72、96h挑选活螺,检测钉螺酯酶同工酶活性及软体组织糖原的变化情况.结果表明:浸泡的96h内,钉螺酯酶活性先升高,后降低,最后几乎完全丧失;体内糖原含量则随浸泡时间的延长而降低,浸泡96h后糖原含量下降30.06%.     

人胎肺细胞培养液中类血小板生成素的初步研究

人正常胎肺细胞用含１０％小牛血清的ＭＥＭ培养液原代培养,后用无血清的１９９培养液继续培养．硝酸纤维膜的斑点酶联免疫印迹法测定显示所收集的无血清培养液中含有能与人重组血小板生成素单抗结合的蛋白质．免疫细胞化学检测发现培养的肺细胞与血小板生成素单抗有明显阳性反应．用小鼠骨髓乙酰胆碱酯酶阳性细胞法测定肺细胞在不同培养时间所收集的培养液促血小板生成活性的大小,结果显示收集的培养液有明显刺激活性并且其活性与肺细胞的密度有相关性．     

盘基网柄菌(Dictyostelium discoideum)KAX-3和AK127细胞形态发生和同工酶的比较研究

比较了盘基网柄菌(Dictyostelium discoideum)野生型细胞KAx-3和突变型细胞AK127在多细胞发育过程中的形态发生.两者有明显的区别;突变细胞的发育只能停留在细胞疏松聚集阶段,而野生型细胞能顺利完成整个发育过程.利用SDS-PAGE电泳比较分析了两者在重要发育阶段的三种同工酶:醋酶(EST)、苹果酸脱氢酶(MDH)和谷氨酸脱氢酶(GDH).结果发现AK127细胞发育阶段含有两种醋酶成分a和p,而KAX-3细胞中只有一种醋酶a;而且AK127细胞中苹果酸脱氢酶(MDH)含量在发育后14 h和16 h均高于KAX-3细胞;谷氨酸脱氢酶(GDH)同工酶在发育后14 h时相对含量高于KAX-3细胞,而在发育后16 h含量却低于KAX-3细胞.这些数据显示了两种类型细胞的同工酶有明显的差异;表明突变细胞基因的表达发生了一定的改变,由此说明了gp150分子在盘基网柄菌细胞发育中有重要作用.     

"补肾活血"对老年鼠脑乙酰胆碱代谢的影响

为研究“补肾活血”对老年鼠脑乙酰胆碱(Ach)代谢的影响,将老年大鼠分别用补肾益精、行气活血、补肾活血方剂灌胃30d,采用高效液相色谱技术检测大鼠脑内Ach摩尔质量浓度、分光光度法检测胆碱乙酰转移酶(ChAT)和胆碱酯酶(AChE)的活性．研究发现老年大鼠脑内Ach摩尔质量浓度、ChAT活性显著低于青年鼠,AChE活性显著高于青年鼠;补肾益精、行气活血、补肾活血均可改善老年鼠脑内Ach代谢,补肾活血法明显优于补肾益精法、行气活血法．     

OA诱导大鼠基底核Ach降低及τ蛋白过度磷酸化

研究了磷酸酯酶(proteinphosphatase,PP)对胆碱能神经元功能的影响,将PP抑制剂岗田酸(okadaic acid,OA)注入大鼠双侧Meynert基底核,并经免疫印迹检测r(tau)蛋白磷酸化程度、经微渗透结合HL,PC检测Ach、经Morris水迷宫检测大鼠的空间记忆能力,结果发现,Meynert基底核注射OA后,Ach水平降低,τ蛋白在Sei-198／Sei-199／Set-202,Ser-396／Ser-404位点发生过度磷酸化,并伴有大鼠空间记忆障碍,本研究结果提示PP活性降低可能参与了神经元纤维缠结形成、胆碱能神经元功能及认知功能障碍,在AD发病机制中起重要作用。     

辣椒不同发育时期的同工酶研究

利用聚丙烯酰胺垂直板电泳技术对5个辣椒品种9个发育期的过氧化物酶同工酶、超氧化物歧化酶同工酶和酯酶同工酶进行了研究．发现不同发育时期3种酶的同工酶酶谱均有不同程度的变化．过氧化物酶同工酶酶谱在五层花序期最丰富,共有11条酶带,而在双叶期和四叶期,未检测到过氧化物同工酶酶带;超氧化物歧化酶酶谱在二层花序期最丰富,共有9条酶带,而在双叶期酶带数最少,仅为3条;酯酶同工酶酶谱在六层花序期最丰富,共有6条酶带,在六叶期和二层花序期酶带数最少,只有1条．通过分析这3种同工酶的总酶谱,找到了区分5个辣椒品种的标志性酶带．     

乙酰胆碱酯酶电极反应机理

在研究酶电极基础上探讨了电极上的反应机理。以乙酰胆碱酯酶催化活性为基础的抑制型酶电极的电极反应是:1)催化底物水解;2)底物中的I-被氧化为I2;3)底物氯化硫代乙酰胆碱分解产生的硫代胆碱含有的-SH基在银基汞膜电极上与汞生成硫醇汞盐。硫代胆碱在玻碳电极表面的氧化,为具有吸附性的不可逆过程,电极反应的电子转移数n=2,反应速率常数k=0.29s-1。     

阿魏酸酯酶在体外模拟猪胃肠道中的稳定性

模拟了胃(肠)液中pH值、蛋白酶、进食量和微量金属离子等对阿魏酸酯酶(FAE)酶活稳定性的影响.结果表明:模拟胃液环境对阿魏酸酯酶酶活影响显著,模拟肠液环境对阿魏酸酯酶稳定性影响较小;蛋白酶酶活的增加不利于阿魏酸酯酶稳定性,但影响不显著;混合金属离子对阿魏酸酯酶稳定性影响不显著;进食量增加可以保护阿魏酸酯酶通过胃液环境,进入小肠发挥作用.在模拟胃液中,阿魏酸酯酶的酶活迅速降低,1 h时,酶活为25%左右,调整为小肠环境时,对阿魏酸酯酶有瞬时激活作用;5 h时,酶活为30%左右;胃肠道pH值是影响阿魏酸酯酶酶活的主要因素,胃蛋白酶、肠道中的金属离子对阿魏酸酯酶酶活影响较小,进食量对肠道中阿魏酸酯酶有保护作用,模拟肠液对经过模拟胃液处理的阿魏酸酯酶有瞬时激活作用.     

Effects of dietary nickel on detoxification enzyme activities in the midgut of <Emphasis Type="Italic">Spodoptera litura</Emphasis> Fabricius larvae

Nickel accumulated in midugt of Spodoptera litura Fabricius could induce the expression of metallothionein, one of the most important detoxification proteins in organisms. In the present study, the effects of dietary nickel on the activities of detoxification enzymes, such as carboxylesterase （CarE） and giutathione S-transferase （GST） in the midgut of S. litura larvae have been studied to get an understanding of the detoxification mechanisms of S. litura larvae to excessive nickel. Results showed that CarE activities in the midgut of the 5th instar larvae decreased at lower levels of nickel （≤5 mg/kg）, while increased with increasing nickel doses at higher levels of nickel （≥10 mg/kg） exposure in successive 3 generations. CarE activities of the 6th instar larvae were also characterized as inhibited at low levels of nickel exposure, and improved at higher levels in the 1st generation. CarE activities of 6th instar larvae in the 2nd and 3rd generations were all lower than that in control. However, GST activities in the midgut of the 5th and 6th instar larvae all increased with increasing nickel doses （1 --20 mg/kg） in diets.     

寄主植物对中华稻蝗四龄若虫酯酶活性的影响

分别以α-NA、α-NB为底物测定了经狗尾草、水稻、小麦三种不同寄主植物饲喂1 d、3 d和5 d后中华稻蝗四龄若虫雌、雄虫的酯酶比活力.结果表明,不同寄主植物对中华稻蝗四龄若虫的酯酶有诱导作用,且水稻组酯酶比活性显著高于狗尾草组和小麦组.以α-NA为底物测定酯酶活性,喂食1d后,水稻组雌、雄虫酯酶比活力分别是狗尾草组、小麦组的1.35、2.00倍和1.44、1.63倍.喂食3 d后,水稻组雌、雄虫酯酶比活力分别是狗尾草组、小麦组的1.40、1.67倍和1.62、1.43倍.喂食5 d后,雌虫酯酶比活力水稻组分别是狗尾草组、小麦组的1.63、2.00倍,雄虫酯酶比活力水稻组分别是狗尾草组、小麦组的2.00、1.71倍.上述结果可能与不同寄主植物所含的次生代谢物质对酯酶的诱导作用有关,且在三种寄主植物中水稻的诱导作用最强.饲喂同一寄主植物1 d、3 d 和5 d后,害虫体内酯酶比活性没有显著性差异,但总体趋势是饲喂1d后的酯酶比活性稍高于饲喂3 d和5 d后的,这可能是害虫在饥饿后进食的应激反应所造成的.研究结果还表明不同寄主植物诱导后中华稻蝗体内酯酶对不同底物的水解能力有所差异.