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1.
在1L搅拌发酵罐中对含有重组质粒pRLK14的大肠杆菌进行了培养。结果表明,采用二段培养法,于34℃增殖细菌,在对数增殖后期升温到42℃进行诱导,可以高效表达基因产品半乳糖激酶。诱导期,醋酸浓度增长较快,模拟实验表明,控制醋酸浓度可进一步提高半乳糖缴酶产率。 相似文献
2.
纳豆激酶基因克隆及其在大肠杆菌中活性表达研究 总被引:5,自引:1,他引:5
以纳豆芽孢杆菌基因组DNA为模板,PCR扩增了纳豆激酶基因(natto kinase gene)中编码前肽、成熟肽的核苷酸序列(pro-NK),构建大肠杆菌表达质粒pTYB102,转化大肠杆菌ER2566。在IPTG诱导下,分别在15℃(14h)、30℃(3h)、37℃(2h)条件下培养,pTYB102均能表达出有活性的纳豆激酶。实验证实纳豆激酶基因得到活性表达需要Pro序列。SDS-PAGE表明,15℃和30℃和37℃培养表达的杂蛋白更少。薄层扫描测定表达的纳豆激酶占菌体总蛋白30%以上。 相似文献
3.
通过平板初筛和摇瓶复筛,从105株菌中筛得一株甘油激酶的高产菌株,并研究了其所产甘油激酶的动力学性质.研究结果表明:在MES系统中,甘油激酶有较好的酸碱稳定性,pH稳定范围为5.5~10.5;最适pH和最适温度分别为pH 8.0和50℃,该酶催化甘油的米氏常数(Km)为3.5×10-5mol/L,催化ATP的Km为4.46×10-4mol/L.同时对一些金属离子和有机化合物对酶活性的影响也进行了研究. 相似文献
4.
γ-干扰素诱导沙眼衣原体感染细胞酪氨酸激酶活化的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
目的探讨IFN-γ诱导的沙眼衣原体感染细胞信号转导中酪氨酸激酶活化。方法采用IFN-γ作用于沙眼衣原体感染的McCoy细胞,用免疫印迹法检测信号蛋白酪氨酸激酶磷酸化的诱导活化,并应用酪氨酸激酶特异性抑制剂genistein拮抗IFN-γ诱导的酪氨酸激酶磷酸化。结果IFN-γ可以在短时间内引起沙眼衣原体感染细胞内的蛋白质酪氨酸激酶磷酸化。磷酸化程度随时间延长而改变,在15min时磷酸化程度最高,以后逐渐减弱。Genistein可抑制IFN-γ诱导的酪氨酸激酶磷酸化;随着浓度增大,抑制作用有所增加。结论IFN-γ诱导沙眼衣原体感染细胞酪氨酸激酶活化。 相似文献
5.
植物叶片白天进行光合作用合成过渡型淀粉,夜间过渡型淀粉分解供植物生理代谢和生长发育所需。以往研究显示叶片中过渡型淀粉的分解受着严格的生理节律调控,但是,当淀粉分解代谢及其下游代谢基因功能出现异常时,淀粉通常会在叶片中超量积累。植物学家通过筛选叶片淀粉超量积累突变体与目标基因功能解析,初步完成了对植物叶片淀粉分解代谢网络图谱的绘制。笔者通过对植物叶片过渡型淀粉分解与超量积累现象的最新研究进行梳理,以探寻提高作物叶片淀粉含量的可能途径。 相似文献
6.
[本刊讯]复旦大学生命科学学院的谷迅、苏志熙、黄伟提出生物进化动力新假说,认为在后生动物进化过程中,基因的偏向性突变是导致酪氨酸丢失和复杂酪氨酸激酶调控网络形成的主要原因。对目前的“后生动物进化过程中酪氨酸丢失是自然选择作用的结果”的权威观点进行了修正。该成果于2011年5月20日发表在Scielice上。 相似文献
7.
《复旦学报(自然科学版)》2011,(3)
来自复旦大学生命科学学院,生物医学研究院,美国爱荷华州大学的研究人员发表了技术评论文章:Comment on‘Positive Selection of Tyrosine Loss in Metazoan Evolution’,就后生动物进化过程中全基因组水平酪氨酸丢失提出了新的假说,这一报道公布在《Science》杂志上. 相似文献
8.
在骨髓中多种祖细胞有T细胞系潜能,但骨髓祖细胞胸腺归巢具有选择性.骨髓祖细胞胸腺归巢是多级粘附分子和趋化因子的级联过程,趋化因子CCL25及其受体CCR9在这一过程中发挥了重要作用.综述了CCL25/CCR9的结构特征及其对骨髓祖细胞胸腺归巢的作用和调节机制. 相似文献
9.
综述了抗G leevec(ST I-571)耐受的B cr-A b l蛋白酪氨酸激酶抑制剂的研究进展,主要介绍了PD 166326,BM S-354825,AM N 107和ON 012380四种酪氨酸激酶抑制剂. 相似文献
10.
目的通过胰岛素和磷脂酰肌醇-3激酶(P13K)抑制剂渥曼青霉素(wortmannin)对P13K/丝氨酸苏氨酸蛋白激酶(P13K/Akt)信号通路的激活和抑制作用,观察P13K/Akt信号通路对海马神经元β-淀粉样前体蛋白裂解酶1(BACEl)mRNA水平表达的影响。方法20只sD大鼠随机分为空白对照组、假手术组、胰岛素组和渥曼青霉素组,海马立体定向注射胰岛素和P13K抑制剂渥曼青霉素。逆转录一聚合酶链反应(RT-PCR)检测P13K/Akt信号传导下游蛋白Akt以及BACEImRNA水平。结果注射胰岛素的海马P13K信号通路下游信号分子:AktmRNA表达上调(分别较空白和阴性对照组P=0.047,P=0.002),而BACElmRNA表达下调(分别较空白和阴性对照组P=0.004,P=0.01)。渥曼青霉素组的P13K下游信号分子AktmRNA表达明显被抑制(分别较空白和阴性对照组P=0.002,P=0.039),同时BACEImRNA的表达较对照组上调(分别较空白和阴性对照组P=0.039,P=0.018)。结论胰岛素信号通路P13K/AM可以调节BACEl的转录水平参与阿尔茨海默病的发病机制。 相似文献