全反式维甲酸对小鼠胚胎不同阶段神经干细胞诱导作用研究

目的:探讨全反式维甲酸对小鼠胚胎不同阶段神经干细胞(NSCs)的诱导分化情况.方法:分离孕12.5d及15.5d的胚胎小鼠脑皮质.取第3代NSCs,用含1μmol·L-1的全反式维甲酸在体外诱导小鼠胚胎不同阶段的NSCs.诱导5d后,通过神经元微管相关蛋白2(MAP2)免疫荧光染色和Westernblots检测NSCs分化为神经元的比例.结果:与对照组相比,全反式维甲酸可明显提高神经元分化的比例.E12.5干细胞和E15.5胚胎干细胞分化为神经元的比例分别为30%±1.47%和16.21%±1.36%.结论全反式维甲酸具有显著的促神经干细胞分化成神经元的效应,并对胚胎不同阶段神经干细胞的诱导作用有所不同.     

血栓弹力图技术在外周血干细胞采集过程中的应用研究

探讨血栓弹力图技术对于外周血干细胞采集的指导意义。对外周血干细胞异体供者和自体供者共64例,在采集前后分别抽取标本检测血栓弹力图。行干细胞采集术者R值,K值,MA值分别由单采前的6.4±2.5,2.4±1.8,64.0±6.6增加为单采后的11.0±6.4,4.8±+2.6,50.3±14.7。单采前后检测血栓弹力图对于单采干细胞过程中的参数设置,干细胞采集质量安全以及单采后患者输血等治疗都有指导作用,对于单采后患者的预防性治疗有参考意义。     

通过四倍体补偿实验证明iPS细胞具有发育全能性

本研究首次利用诱导性多能干细胞(iPS细胞)通过四倍体囊胚注射得到存活并具有繁殖能力的小鼠。研究中,我们制备了37株iPS细胞系,其中3株iPS细胞系获得了共计27个活体小鼠,经多种分子生物学技术鉴定,证实该小鼠确实从iPS细胞发育而成。其中一些小鼠现已发育成熟并且繁殖了后代,这是世界上第一次获得完全由iPS细胞制备的活体小鼠,有力地证明了iPS细胞具有真正的全能性。这项工作为进一步研究iPS技术在干细胞、发育生物学和再生医学领域的应用提供了技术平台,将iPS细胞研究推到了新的高度,也为中国在这一国际热点研究领域取得领先地位做出了重要的贡献。     

蓝花楹内生拮抗细菌筛选及对茎腐病的防治研究

【目的】筛选蓝花楹茎腐病的内生拮抗细菌,并探讨其生物防治作用。【方法】采用稀释平板法从健康蓝花楹根茎分离内生菌株; 以蓝花楹茎腐病原菌(Fusarium chlamydosporum)作为供测菌,用5点对峙法进行拮抗作用初筛、平板扩散法复筛获得拮抗菌株,经形态学和16SrDNA序列比对,对其进行鉴定。采用温室盆栽和田间试验检测拮抗菌的生防效果。【结果】分离获得24株内生菌株,其中zhu66抑菌率达到97.8%,鉴定为解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens),GenBank序列登录号为JF899258。盆栽试验结果表明,解淀粉芽孢杆菌能有效预防和治疗蓝花楹茎腐病。在一定浓度下,浓度越高防效越好,以10⁷cfu/mL浓度最佳。灭菌土防效优于自然土; 生防菌先于病原菌施入防效优于生防菌与病原菌同时接种,病原菌先于生防菌接种方式防效较低。菌株能显著促进蓝花楹地径、苗高与冠幅生长,浓度越高,促生效果越好。田间试验进一步验证,蓝花楹茎腐病不同发病程度的生防效果有显著差异,无病区预防作用十分显著,不发生茎腐; 重度发生区几乎没有效果,轻度发生区防效明显,防效达74.1%,中度发生区有一定效果,且随着时间延长,防效增加。【结论】解淀粉芽孢杆菌zhu66对蓝花楹茎腐病有良好的生防潜力。     

青蒿离体快繁技术研究

为建立青蒿（Artemisia annua L．）快速繁殖技术体系,以青蒿带腋芽茎段作为外植体,以MS、1／2MS为基本培养基,附加不同种类、不同浓度的植物激素进行青蒿离体快繁培养研究．结果表明：外植体在MS＋6-BA1．0mg／L＋NAA0．5mg／L培养基上诱导丛生芽效果最好;1／2MS＋NAA0．5mg／L诱导生根效果最佳,可达90％．     

Differentiation of human embryonic stem cells along a hepatocyte lineage and its application in liver regeneration

Hepatocyte transplantation and bioarUficial liver （BAL） as alternatives to liver transplantation offer the possibility of effective treatment for many inherited and acquired hepatic disorders. Unfortunately, the limited availability of donated livers and the variability of their derived hepatocytes make it difficult to obtain enough viable human hepatocytes for the hepatocyte-based therapies. Embryonic stem cells （ESCs）, which could be isolated directly from the blastocyst inner cell mass, have permanent self-renewal capability and developmental pluripotency and therefore might be an ideal cell source in the treatment of hepatic discords. However, differentiation of hESCs into hepatocytes with significant numbers remains a challenge. This review updates our current understanding of differentiation of ESCs into hepatic lineage cells, their future therapeutic uses and problems in liver regeneration.     

The mobilization of rat’s mesenchymal stem cells into peripheral blood by LiCL and its potency differentiation

Mesenchymal stem cells （MSCs） are multipotent cells, which can differentiate into different tissues. It is still controversial whether MSCs can be isolated from adult peripheral blood （PB） under normal conditions and whether they can be mobilized in a way similar to that of hematopoieUc stem cells （HSCs）. In this study, rat MSCs circulating in the PB under normal conditions can be isolated and cultured, and MSCs from PB and BM can be mobilized by LiCL. The mobilized MSCs can be induced to differentiate into neuron by such factors as β-mercaptoethanol and supernatants of nerve cell cultures. The present study provides a broader perspective on the repair of neural trauma.     

脐带源间充质干细胞的生物学性状及其成脂肪细胞诱导分化

以健康产妇脐带为材料分离脐带间充质干细胞,体外培养扩增传代,做细胞形态观察,计数细胞并绘制细胞生长曲线,用流式细胞仪测定细胞周期以及免疫表型,测定细胞定向诱导分化成脂肪细胞的能力.发现人脐带源间充质干细胞能在体外培养扩增,可定向诱导分化为脂肪细胞并且具有和骨髓来源的间充质干细胞相似的生物学形态和抗原表型.成功建立了脐带源间充质干细胞系,可以作为干细胞研究和应用的新的材料来源.     

迎春花无菌体系的建立以及茎段和叶片愈伤组织的诱导

本文对迎春花无菌体系的建立和茎段、叶片愈伤组织的诱导进行了研究。结果表明：（1）在建立迎春花的无菌体系时,应该选择晴天去采集外植体为好;（2）带芽茎段和叶片的污染率最大,而不带芽茎段的污染率最小;（3）在超净工作台外消毒应先用饱和洗衣粉溶液浸泡10 min,然后用自来水冲洗2-3次,最后再用蒸馏水冲洗2-3次;在进行超净工作台内消毒时,叶片应该先用84消毒液（1%）浸泡5min,无菌水冲洗3次,75%酒精浸泡20s,无菌水冲洗3次,0.1%升汞浸泡8 min,无菌水冲洗3次,而茎段应该先用84消毒液（1%）浸泡10 min,无菌水冲洗3次,75%酒精浸泡30s,无菌水冲洗3次,0.1%升汞浸泡10min,无菌水冲洗3次;（4）在NAA为0.2 mg/L时,高浓度的6-BA有利于不定根的再生,而低浓度的6-BA则更利于愈伤组织的诱导;在NAA为0.2 mg/L时,高浓度的KT有利于愈伤组织的诱导,而低浓度的KT则有利于不定根的再生;（5）NAA更利于不定根诱导,也可诱导愈伤组织。而2,4-D只利于愈伤组织的诱导,不利于诱导不定根。