Characterization of the Partially Folded Monomeric Intermediate of Creatine Kinase

IntroductionRecent studies of the protein folding pathway andintermediate states in vitro and in vivo haveinduced much interest in the importance ofunderstanding the propertiesof partially structuredintermediates[1 7] . Studies have suggested thatintermed…     

朊蛋白（PrP）与叠朊（Doppel）蛋白相关性的研究进展

近几年研究发现,与传染性海绵状脑病（TSE）发生密切相关的朊蛋白基因Prn,包括三种基因：Prnp（PrP编码基因）,Prnd（Doppel的编码基因）及Prnt．其中Prnd与Prnp关系更加密切．研究指出,二者的编码蛋白Doppel与PiP。的同源性虽然不高,但其翻译后修饰及空间结构却十分相似．这种相似性造成了二者在功能上的相关．如PrPc的缺失可能引起Doppel过表达;而prpc也似乎能够拮抗Doppel引起的神经毒性．     

基于水溶性共轭高分子构象效应的凝血酶检测

介绍了水溶性共轭高分子和核酸适体(aptamer)在生物传感检测中的应用.提出了一种基于aptamer和水溶性聚噻吩的构象效应进行凝血酶检测的比色方法.结果表明,该方法具有较高的选择性和灵敏度,肉眼目测最低可检测63 nM凝血酶.     

大蒜素和运动疲劳对大鼠脾淋巴细胞P-PKC水平的影响

选取8周龄雄性SD大鼠研究大蒜素和运动疲劳对大鼠P-PKC的影响,实验鼠随机分为安静对照组、运动疲劳组以及相应实验性设计的大蒜素+运动疲劳组,各组又根据取材时间不同随机分为末次训练后24 h组与72 h组2个小组.运动疲劳时间为5周,期间逐渐递增负荷或时间.测定各组大鼠脾淋巴细胞PPKC水平.结果显示,运动疲劳组(P<0.01)与大蒜素+运动疲劳组(P<0.05)大鼠脾淋巴细胞P-PKC水平均显著低于安静对照组,而运动疲劳组与大蒜素+运动疲劳组之间无显著性差异.研究认为,运动疲劳的发生与P-PKC表达的变化有关,而大蒜素对该变化并未表现出明显的干预作用.     

补虚化瘀法对产后抑郁低雌激素大鼠海马RSK1和MEK1的影响

目的：探讨补虚化瘀方药参归仁合剂对产后抑郁大鼠海马神经元内胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)通路的影响,测定P90核糖体S6激酶（RSK1）和丝裂原活化细胞外调节激酶1(MEK1)蛋白表达量。方法：56只雌性大鼠分为正常组,模型组,参归仁高、中、低剂量组（7,3.6,1.8 g·kg-1·d-1）,盐酸舍曲林组（4.5 mg·kg-1·d-1）、苯甲酸雌二醇组（10 μg·d-1）,除正常组外,其余各组均采用苯甲酸雌二醇和黄体酮造模,模拟产后抑郁状态。使用蛋白质免疫印迹(Western blot)法检测其海马P-RSK1和P-MEK1的蛋白表达量。结果：与模型组比较,参归仁中剂量组和舍曲林组在海马组织中P-RSK1蛋白表达水平明显增加（P＜0.01）;与模型组比较,参归仁中剂量组、舍曲林组和苯甲酸雌二醇组在海马组织中P-MEK1蛋白表达水平明显增加（P＜0.01）。结论：参归仁合剂可增加海马组织中P-RSK1和P-MEK1蛋白表达量,且参归仁中剂量组效果显著,参归仁合剂可起到抗抑郁作用。     

AMPK细胞能量感受器研究进展

腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)作为体内能量感受器能感知能量改变情况.阐述了AMPK在外周组织、肝脏组织、骨骼肌和脂肪组织中的能量代谢调节及在下丘脑中枢中的神经调节等相关作用机制.     

受体酪氨酸激酶抑制剂Dovitinib的合成

5-氟-2-硝基苯胺经N-甲基哌嗪取代,氢气还原,与3-乙氧基-3-亚氨基丙酸乙酯盐酸盐环合,最后与2-氨基-6-氟苯腈反应得Dovitinib,产物收率为43.6;,液相纯度达99.53;.目标产物结构经氢谱、质谱证实.     

Src真核表达载体的构建与表达

构建酪氨酸蛋白激酶Src真核表达载体,并检测其在HEK293T细胞中的表达.根据Genebank（GI：4574718）提供的大鼠Src的cDNA序列设计特异性引物,以大鼠海马总RNA为模板,采用RT-PCR方法扩增Src的目的基因,然后克隆至真核表达载体pcDNA3.1.将筛选的阳性重组子转染入HEK293T细胞系,免疫印迹检测Src的蛋白表达水平,经限制性内切酶双酶切及测序分析,扩增的Src的cDNA成功连接入pcDNA3.1,并且序列与Genebank中一致.免疫印迹结果表明,构建的Src-pcDNA3.1可在HEK293T细胞中表达.成功构建了Src-pcDNA3.1真核表达载体,并且可在HEK293T细胞中高效表达.     

乳腺癌特异性多肽介导生物大分子体内外效应

探讨乳腺癌特异性多肽PI携带外源性生物大分子靶向抗肿瘤的作用.将分离纯化获得的融合蛋白PI-EGFP与靶细胞MDA-MB-231体外共培养,探讨融合蛋白与靶细胞的结合能力;将此融合蛋白经尾静脉及肿瘤局部注射入荷瘤裸鼠体内,探讨其在肿瘤部位的聚集程度;利用分子克隆技术构建重组原核表达载体pET-28a(+)-pI-tk,诱导表达、分离纯化、鉴定获得的融合蛋白PI-HSV-TK,将不同浓度的融合蛋白与MDA-MB-231细胞共培养,经更昔洛韦(ganciclovir,GCV)作用后,探讨PI-HSV-tk对细胞的靶向杀伤效应.荧光显微镜下观察,在靶细胞内可检测到绿色荧光信号,经尾静脉及局部注射融合蛋白PI-EGFP后,在不同组织器官可见不同强度的荧光信号,在尾静脉注射组的肾脏和肿瘤部位可检测到荧光信号,而局部注射组仅在肿瘤部位可检测到;成功构建了重组原核表达载体pET-28a(+)-pI-tk;分离纯化获得高效表达的PI-TK融合蛋白,SDS-PAGE电泳及Western blotting鉴定融合蛋白的表达正确;CCK-8法及流式细胞仪检测显示,GCV对转导融合蛋白的MDA-MB-231细胞有杀伤作用,IC50值为152.64μg/mL.乳腺癌特异性转导多肽能携带生物大分子进入靶细胞,并携带具有杀伤效应的物质,使其发挥靶向治疗作用,为进一步探讨该多肽作为靶向性载体奠定实验基础和理论依据.     

过表达甘油激酶三角褐指藻藻株富集油脂的研究

为了得到高产并符合生物柴油标准的微藻油脂的藻株,本文研究了在外源甘油存在的情况下野生型（WT）三角褐指藻（Phaeodactylum tricornutum）,甘油激酶过表达藻株（GKOE）以及甘油激酶RNA干扰藻株（GKRNi）在添加浓度为20 mmol/L外源甘油的培养基中的生长情况、油脂产量以及脂肪酸组成.结果显示：（1）甘油兼养的GKOE藻细胞浓度可达到2.23×107个/mL,明显高于甘油兼养的WT的1.79×107个/mL和GKRNi的1.78×107 个/mL;（2）甘油兼养的GKOE油脂含量可达到31.73%,比甘油兼养的WT和GKRNi分别高了27.20%和26.63%;（3）尼罗红染色显示甘油兼养的GKOE荧光强度比甘油兼养的WT和GKRNi分别高16.26%和17.83%;（4）甘油兼养的GKOE总脂肪酸产量可达到0.052 mg/mL,比甘油兼养的WT和GKRNi高了36.84%和10.64%,说明其油脂适合于生物柴油开发.