抑制性扣除杂交(SSH)技术原理及在水稻基因表达差异分析中的应用

抑制性扣除杂交法运用了杂交二极动力学和链内退火优先于链间的原理，使原丰度有差别的单链cDNA相对含量基本一致，使非目的片段两端反向重复序列退火时产生“发卡”结构，不能与引物配对，从而选择性地抑制了非目的片段扩增。该方法假阳性率低，灵敏度高，在水稻基因表达差异分析中有着广泛的应用。     

南京地区黑松与马尾松的自然杂交研究

研究了南京地区黑松和马尾构间所产生的自然杂种。杂种可分三类：偏马尾松型、双亲中间及偏黑松类型，其中中间类型占多数，并从枝叶形态特征（包括幼苗和成年）；针叶比较解剖；球果种子性状；年生长节律；高、径生长，材积生长；木材容重；抗松材线虫以及核型等方面进行了自然杂种和双亲比较，证明该自然杂种具明显杂种优势，对该自然杂种的利用前景提出了看法。     

水杨酸对烟草GRPs基因表达的影响

通过RT-PCR得到富含甘氨酸RNA结合蛋白（GRPs）基因片段,利用northern杂交技术对水杨酸诱导不同时间不同烟草GRPs基因的表达模式进行研究.结果表明：水杨酸能诱导烟草GRPs基因上调表达,3 h达到最高,然后开始下降;但3个TMV抗性不同的供试烟草增加幅度不同,基因表达幅度与抗性有一定关系,抗性强的红花大金元表达增幅大于抗性较弱的云烟85.本研究明确了水杨酸诱导下烟草该基因的表达谱,揭示了SA诱导烟草不同抗性的品种的幅度不同,并且发现诱导后3 h为关键点,表明GRPs基因可作为烟草水杨酸代谢途径中的一个标记基因研究其途径对逆境的应答.     

虾夷扇贝体内尼氏单孢子虫检测方法

为了解中国近海贝类受原生动物寄生虫--尼氏单孢子虫(Haplosporidium nelsoni)污染状况,利用显微镜观察、原位杂交方法(ISH)和聚合酶链式反应(PCR)方法对2007年采集于大连大窑湾和长海县养殖区的虾夷扇贝样品进行尼氏单孢子虫检测,并比较了浮筏式和底播式养殖的虾夷扇贝中尼氏单孢子虫的检测结果.结果表明,在2007年2月大窑湾浮筏式养殖的成体虾夷扇贝体内检出尼氏单孢子虫;在2007年5～8月长海县浮筏式养殖的成体扇贝体内普遍检测出尼氏单孢子虫,而在其他月份的成体扇贝体内以及全年浮筏式养殖的扇贝幼苗和底播养殖的扇贝体内未检出尼氏单孢子虫.     

TPMS点阵结构的密度梯度杂交优化设计

三周期极小曲面（triply periodic minimal surface,TPMS）点阵结构因其优异的综合性能受到中外学者的广泛关注。在点阵结构实际应用过程中,常常需要对其进行优化设计以兼顾轻量化与承载性能两方面的要求。目前,对TPMS点阵结构的优化设计主要集中于密度梯度层面,未综合考虑载荷方向对其力学性能的影响。为此,首先研究了TPMS点阵结构的各向异性特征。基于平均场均匀化方法求解了不同类型TPMS点阵结构的等效弹性矩阵,通过Matlab插值计算,绘制了其在三维空间范围内的杨氏模量图。发现不同类型的TPMS点阵结构呈现出不同的各向异性特征,其中W点阵结构在[100]等轴线方向上性能较强,在[111]等斜向对角方向上性能较弱,而P点阵结构则刚好相反。根据TPMS点阵结构的各向异性,同时考虑主应力方向以及相对密度分布对其性能的影响,提出了TPMS点阵结构的密度梯度杂交优化设计方法。以悬臂梁模型为基础,基于载荷边界条件对其进行拓扑优化设计,并将拓扑优化密度云映射为点阵结构的相对密度分布,从而实现密度梯度设计。根据TPMS点阵结构的各向异性特征以及单元主应力方向分别选择W和P点阵单胞填充悬臂梁,使主应力方向位于点阵结构性能较强的方向,避免点阵结构在性能薄弱的方向承受较大的应力。将不同类型的TPMS点阵单元合理分布后,利用激活函数将它们进行杂交连接,实现结构梯度设计。综合相对密度分布和单元结构分布,生成密度梯度杂交点阵结构。采用有限元仿真方法对比分析优化设计前后点阵结构的承载性能,结果表明密度梯度W和P点阵结构的刚度与对应的均质点阵结构相比都有明显提高,而由W和P两种点阵单胞组成的密度梯度杂交点阵结构刚度最大,比密度梯度W和P点阵结构分别提高4.63%和33.63%。该结果表明在密度优化的基础上,根据承载时单元主应力方向将不同类型的点阵结构进行合理分布以及混合杂交设计能够进一步提高结构的整体刚度。建立的TPMS点阵结构密度梯度杂交优化方法为其在轻量化设计等方面的应用提供了一定的指导。     

用长臂光敏生物素标记的cDNA探针核酸斑点杂交检测马铃薯纺锤块茎类病毒

用长臂光敏生物素标记含有马铃薯纺锤块茎类病毒（Ｐｏｔａｔｏｓｐｉｎｄｌｅｔｕｂｅｒｖｉｒｏｉｄ，ＰＳＴＶｄ）双拷贝ｃＤＮＡ的重组质粒ｐＳＴ－Ｂ１４，制备成光敏生物素标记ｃＤＮＡ探针，用核酸斑点杂交检测感染ＰＳＴＶｄ的马铃薯叶片和块茎提取物均出现较强的阳性杂交信号，而健康马铃薯为阴性．试验结果表明：光敏生物素标记ｃＤＮＡ探针检测感染ＰＳＴＶｄ的马铃薯叶片汁液最高稀释度为１１２８     

三元鲤及其双亲(资江鲤(♂)、芙蓉鲤(♀))几个生化性状的比较研究

作者采用聚丙烯酰胺凝胶电泳方法,分析了三元鲤及其双亲(资江鲤(♂)、芙蓉鲤(♀))的血清蛋白、酯酶同工酶及过氧化物酶。研究结果表明:双亲的血清蛋白存在差异,这种差异主要表现在B_2区和B_3区的MA带上。F_1代表现了亲本的血清蛋白,B_1区和B_2区为双亲的嵌合型,B_3区为母本型。双亲的酯酶、过氧化物酯亦存在组织特异性和种的特异性,差异主要表现在心脏和肾脏。F_1代酯酶酶谱偏向父本,肾脏中间主带的酶相对活性明显高于亲本,肝脏阴极端出现一条新的酶带。F_1代心脏的过氧化物酶为母本类型。作者认为血清蛋白、酯酶和过氧化物酶等在鱼类育种中可作为区分亲本、亲本与子代之间的遗传标记。同时,酯酶同工酶谱型的变化,可以作为预测杂种优势的指标。     

Ecological long-term effects of cultigens becoming feral and of naturalization of non-native species

Transgenic cultigens may become feral as we know of some non-transgenic cultigens. The article explains two basic ways how cultigens become feral: through hybridization with a closely related wild plant and through revert to the wild-type. A long list of examples of cultigens becoming feral in Central Europe is presented. The process of becoming feral is compared to the naturalization of non-native species (Exotic Species Model). Ecological long-term effects of both cultigens becoming feral and non-native species being naturalized are discussed with special regard to the predictability of such events. The ecological aspects discussed in the article are as significant for transgenic cultigens as for non-transgenic cultigens.     

干旱胁迫下开花期玉米消减文库的构建及分析

分别以1d干旱和7d干旱处理的开花期玉米顶叶cDNA为tester,正常生长的玉米顸叶cDNA为driver,利用抑制性差减杂交技术构建了两个干旱胁迫下开花期玉米消减文库．两个文库的重组率均高于95％,插入片段集中在300—600bp之间．对两个文库部分克隆进行测序发现,文库中含有脱水素、蔗糖合成酶、甜菜碱醛脱氢酶。DRE结合因子等大量的抗旱相关基因,说明两个干旱胁迫下开花期玉米抑制性消减文库已经构建成功。且具有重要意义．