柑桔速衰病毒株系特异性单克隆抗体的制备及其免疫学特性

以感染枸橼的柑桔速衰病毒(Citrustristeza virus,CTV)的部分纯化制备物和浓缩的感染组织粗浸出液免疫BALB/C小白鼠后获得的脾脏细胞,与鼠骨髓瘤细胞株P3-X63-Ag8.653融合制备了杂交瘤细胞.免疫小鼠的CTV株系为T514,杂交瘤细胞以有限稀释法获得纯克隆,并以健康枸橼和CTV不同株系感染枸橼的组织浸出液筛选各克隆,并确认各克隆与CTV各株系的免疫反应性.经以碱性磷酸酶标记的山羊抗鼠IgG进行酶联免疫吸附试验(EUSA),对各杂交瘤克隆的株系特殊性分析证明,从这些杂交瘤细胞中获得了能产生CTV株系特异性单克隆抗体的杂交瘤细胞株.     

抗原热灭活对小鼠肺炎支原体ELISA检测的影响

目的优化小鼠肺炎支原体ELISA检测方法,降低非特异性反应。方法肺炎支原体热灭活处理后制备ELISA板,检测小鼠血清,与常规ELISA及分离培养方法相比较。结果优化后的ELISA方法平均本底值为0.03,敏感度为1:1280;优化ELISA方法与分离培养方法的符合率为99.27%,比常规ELISA方法高;PCR验证改进后的ELISA方法具有较好的准确性。结论优化后的方法准确性好,灵敏度高,对小鼠肺炎支原体的检测具有重要的实际意义。     

中药中速灭威残留量的酶联免疫检测方法

建立了直接竞争酶联免疫法(ELISA)测定金银花、枸杞、人参、板蓝根、大青叶和圆弧止痛片为代表的中药中速灭威的残留量.金银花等经过粉碎,加入甲醇提取、旋蒸、PBS复溶等简单前处理之后,再经过适度的稀释可以达到消除基质影响,用ELISA进行测定.中药样品添加回收率为64.00%～91.30%,变异系数均小于30.12%.结果表明,该方法可以简单、快速、灵敏、准确地检测出金银花、枸杞、人参、板蓝根、大青叶和圆弧止痛片等中药中速灭威的残留量.     

角倍蚜总RNA提取方法的比较及优化

采用Trizol法及试剂盒柱提法提取角倍蚜若虫及成虫总RNA,通过紫外分光光度法(OD260/OD280、OD260/OD230)及琼脂糖凝胶电泳检测,对所提取RNA的纯度、浓度及完整性进行了分析.结果表明,采用常规样品量两种方法提取的RNA均降解严重,分析认为角倍蚜富含内源性RNase.通过大幅降低样品量,优化提取步骤,缩短提取时间,有效消除了RNA降解现象.采用Trizol法获得了纯度高、完整性好的RNA样品,电泳显示清晰的28S、18S及5S三条带;试剂盒柱提法获得的RNA呈现较为特殊的带型,没有常规的5S条带,而在750bp～1 000bp之间有一明显条带.     

补体C3基因敲除小鼠的繁育及子代基因型鉴定

目的 探讨繁殖和鉴定补体c3基因敲除小鼠的实验方法。方法将所引进的补体c3基因敲除杂合子小鼠（c3＋／-）进行饲养并繁殖,其子代出现三种基因型的小鼠,即纯合子c3-／-、杂合子c3＋／-、野生型c3＋／＋,采用ELISA与PCR相结合对子代小鼠基因型进行鉴定。结果繁育出135只子代小鼠,经鉴定,（=3＋／＋、c3＋／-、C3-／-各为38只、68只、29只,经爿。检验,子代小鼠分离比例符合孟德尔遗传规律。结论正确的饲养繁殖以及子代鉴定是从杂合子小鼠中获得补体c3基因敲除小鼠的有效途径。     

ELISA方法检测尿液sIgA的方法学评价

目的 为尿液sIgA测定提供ELISA方法。方法 采用ELISA方法测定尿sIgA，并进行方法学评价。结果 ELISA方法测定尿液sIgA准确性高、特异性强。敏感性达到RIA水平。结论 ELISA方法测定尿液sIgA具有临床实用价值。     

基于DDK的音视频编码器驱动的设计

为了降低基于DM642音视频驱动开发的复杂度,通过研究基于DM642的音视频编解码器驱动的开发方法,提出了基于DDK(Driver Developers Kit)的驱动开发模型,并举例给出基于DDK的音视频驱动开发流程。通过和传统的驱动开发模型相比,得出基于DDK的驱动模型使得驱动开发具有以下优点:重写的代码量更少;移植到不同的平台时,代码改动更少。     

卵源性多价抗蝮蛇毒IgY的制备及检测

采用短尾蝮(Gloydius brevicaudus)、乌苏里蝮(Gloydius ussuriensis)、岩栖蝮(Gloydius saxatilis)、原矛头蝮(Protobothrops mucrosquamatus)和菜花原矛头蝮(Protobothrops jerdonii)5种蛇毒的混合物制备类毒素,免疫20~22周龄莱航母鸡并收集鸡卵,用冻融法、水稀释法和PEG法提取卵黄多价抗蝮蛇毒IgY,并用酶联免疫法和蛋白印迹法对所得IgY效价进行检测.结果表明:母鸡在免疫期间产下的鸡卵中,均存在可有效中和上述5种蛇毒的卵黄抗体IgY,且诱导量随免疫强度的提高而增加;不同方法所得有效抗体的含量存在一定差异,且同一提取法所得抗体对不同蛇毒的交叉中和能力也不同,这可能与动物对5种蛇毒的免疫应答存在差异有关.     

刺五加注射液致敏物质检测及去除方法

为探讨刺五加注射液中致敏物质的检测方法及去除手段,采用间接酶联免疫吸附试验(ELISA法)检测刺五加注射液中的致敏物质,同时考察超滤工艺对刺五加注射液大分子物质的截留效果.结果表明,被检测的3个厂家的刺五加注射液中致敏物质均在规定限度内,各含量无显著性差异;分子量为10000 D的超滤膜能够显著截留刺五加注射液中的致敏...     

Preparation of an anti-diethylstilbestrol monoclonal antibody and development of an indirect competitive ELISA to detect diethylstilbestrol in biological samples

Based on the preparation of an anti-diethylstilbestrol(DES) monoclonal antibody,a simple and convenient indirect competitive enzyme-linked immunosorbent assay(E...