多级色谱纯化牛胎盘免疫调节多肽及性质测定

使用DEAE Sepharose CL-6B阴离子交换色谱、Sephadex G-25 凝胶色谱和Sephasil C18反相高效液相色谱等分离纯化技术,采用体外培养淋巴细胞增殖试验,从牛胎盘提取液中分离出了具有免疫调节活性的多肽。免疫调节多肽对淋巴细胞增殖的促进作用具有剂量依赖性。纯化后的免疫调节多肽经过毛细管电泳(CE)鉴定为单一组分。毛细管等电聚焦电泳(CIEFE)测定多肽的等电点是3.82。基质辅助激光解吸附飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)测定多肽的相对分子质量为2134。蛋白质测序仪测定多肽的序列为Tyr-X-Phe-Leu-Gly-Leu-Pro-Gly-X-Thr。     

Maturation of Osteoblast-Like Saos-2 on Hydroxyapatite Ceramics

Hydroxyapatite ceramics (.HA) has been proved to be excellent in biocompatibility and bioactivity.However, limited information is available concerning how HA ceramics affects the maturation of es-tcoblasts in molecular biological level /n v/tro. This study examines the mRNA expression and protein production of hone-related genes in estcoblast-like cell line(Saos-2) cultured on HA disks. Saos-2 cells are seeded onto the substrates and cultured for 18 days. Harvested cells are tested for the cell growth rate, expression of mRNAs for esteocalcin and alkaline phosphatase, and protein production of bone sialo-protein and esteocalcin. MTS assay shows that cell proliferates well on HA ceramic substrate. After 9d,bone sialoprotein and esteocalcin protein production in SAPS-2 increases more on HA surfaces than on control material. As bone sialoprotein and esteocalcin are the genes to be highly expressed at the late stage of estcoblast differentiation, this study reveals that after long time culture in HA, HA can induce Saos-2 maturation. The behavior of Saos-2 on HA surfaces revealed in this study provides valuable infor-mation for the understanding of the biocompatibility and bioactivity of HA ceramics.     

掺钴羟基磷灰石的制备及体外成骨诱导性能研究

为优化羟基磷灰石（HAp）在治疗骨缺损时的诱导成骨能力,采用化学沉淀法制备一系列不同Co/Ca摩尔比的掺钴羟基磷灰石（Co-HAp）,表征其形貌和结构,并研究其体外成骨诱导能力。结果表明,合成的Co-HAp具有典型的磷灰石结构。Co/Ca摩尔比为0.1%时,Co-HAp的结晶度最低。当Co/Ca摩尔比为0.1%,浸提液浓度为12.5μg/mL时,Co-HAp促BMSCs增殖能力最佳,具有良好的细胞相容性。该浓度下的Co-HAp可使BMSCs的ALP活性增强,钙结节增多,表现出较好的体外成骨诱导能力。该研究可为骨缺损修复领域探索更丰富的修复材料提供理论依据。     

表达钙调素反义RNA人肝癌细胞模型的建立及其对细胞增殖和转化的作用

作为Ca~(2+)在细胞内的主要受体,钙调素(Calmodulin,CaM)广泛存在于各种真核细胞中,是一种能调节细胞生长、分化和转化的多功能蛋白。 由于CaM的反义RNA相对于它的多种拮抗剂来说具有更强的特异性并且没有药理毒性作用,因此我们构建了表达钙调素反义RNA的人肝癌细胞模型,并对此模型在钙调素低表达状态下的生长特性、周期分布、基因表达及其与转化的关系进行了分析,以探讨钙调素对细胞增殖与转化的影响。     

钙调素在细胞增殖中的调节作用

钙调素通过促进细胞周期的进程，实现其对细胞增殖的调节。     

人参皂甙Rg1对3T3细胞增殖作用的研究

利用MTT比色分析法和Brdu增殖细胞标记法,检测不同浓度GRg1对3T3细胞增殖的影响.发现GRg1在适当浓度范围内可以促进3T3细胞的增殖,为进一步探讨GRg1的药理作用及对胚胎发育的作用机理提供一些研究基础.     

体外抑制肿瘤JAK/STAT通路探讨STAT4对肿瘤免疫的影响

利用小RNA技术对肿瘤细胞系Mosec中STAT4蛋白的表达进行干预,结合用干预后的肿瘤细胞培养上清液与脾细胞共培养后流式细胞分析的方法,检测CD4 CD25 Treg细胞被引导情况.得到了抑制肿瘤细胞STAT4后,引导出增高比例的CD4 CD25 Treg细胞的结果.进一步检测培养上清液中细胞因子TGF-β2和IL-10 mRNA的表达,发现肿瘤细胞STAT4蛋白表达被抑制后,IL-10分泌明显增加,而TGF-β2没有明显改变.这一结果暗示着肿瘤细胞是通过STAT4的激活来下调IL-10的表达和CD4 CD25 Treg细胞比例,来削弱对T细胞增殖的抑制效应,进而增强机体对肿瘤免疫的可能性.