分化抑制基因Id4的沉默对MEL细胞的影响及相关基因表达分析

将反义Id4导入MEL细胞株,研究此基因对细胞增殖、分化及凋亡的影响.结果表明,Id4基因的沉默显著抑制细胞增殖,细胞的分化率明显提高(84倍);细胞的死亡率和凋亡率均增加,但基因沉默对分化的促进占优势,Id4可能是调控和保持分化的重要因子.反义Id4对细胞周期引擎基因、肿瘤抑制基因、凋亡抑制基因以及着丝粒蛋白基因表达的影响,说明Id基因的功能可以从细胞周期检验点调控等方面加以探讨.这些结果有利于细胞增殖、分化调节,特别是血细胞分化控制的研究.     

Effect of Quercetin on Breeding and Apoptosis of Cervical Cancer HeLa Cell and on Growth of Transplanted Tumor in Nude Mice

Effect of quercetin on HeLa cell system of cervical cancer was studied by methods of MTT and Annexin V-FITC/PI. The results show that quercetin has functions of inhibiting breeding of HeLa cells and inducing apoptosis of the cells. The total apoptosis rate is positively proportional to reaction duration and concentration of quercetin used. The maximum apoptosis rate being （88.76±2.35）% was obtained when the concentration was 50.0 μmol/L and the cells were treated with quercetin for 72 hours. Based on establishing a model of tumor of cervical cancer transplanted into nude mice, quercetin of different concentrations was injected into abdominal cavity of nude mice and situation of tumor growth was reviewed. The result showed that with quercetin concent＇ration increasing from 0 to 100.0 μmol/L, the transplantation volume and weight of the tumors decreased from （279.59±70.58） mm^3 and （0.145±0.019） g to （128.72±36.12） mm^3 and （0.089± 0.019） g respectively, while apoptosis rate of the transplanted tumor increased from （9.63±1.85）% to （34,98±0.47）%, which proved that quercetin inhibited increment of volume and weight of transplanted tumor in nude mice bodies.     

兔骨髓基质细胞的分离培养研究

目的分离培养兔骨髓基质细胞,观察其体外生长特性.方法用密度梯度离心结合贴壁培养法分离兔骨髓基质细胞,进行体外培养,传代扩增,测定其生长曲线,用相差显微镜、细胞化学染色观察细胞生物学性状及功能特点.结果密度梯度离心结合贴壁培养法可有效分离并且纯化兔的骨髓基质细胞.传代细胞均一性较好,呈纺锤形,细胞增殖快,加入地塞米松(Dxm 10-5 mmol/L),β-甘油磷酸钠(β-GP 2 mmol/L)、L-抗坏血酸(AA 50 mg/L)可诱导BMSCs分化为成骨细胞,von kossa法检测骨钙素阳性.结论体外培养的骨髓基质细胞生长稳定,增殖力强,可诱导分化.     

甜菜碱对小鼠脾淋巴细胞的增殖作用

研究甜菜碱对小鼠脾淋巴细胞的增殖作用.应用MTT法观察体外甜菜碱在不同浓度、不同时间对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响,应用流式细胞仪（FCM）测小鼠脾淋巴细胞在不同时间周期的变化.结果表明,甜菜碱终浓度0.4、4、20 mmol/L均可促淋巴细胞增值,但终浓度4 mmol/L效果最为明显,在甜菜碱刺激24、48、72 h后,淋巴细胞均可显著增值,但随时间的加倍,增值幅度并不明显,综合考虑,24 h效果更好.终浓度4 mmol/L甜菜碱不同时间均可促进淋巴细胞由G0/G1期进入S期,且作用18 h效果最明显,其G0/G1期由97.03%下降到89.99%,S期由2.58%升高到9.08%.到24 h后,其诱导作用反而有些下降.因此,甜菜碱4 mmol/L作用24 h促淋巴细胞增殖最为理想.4 mmol/L的甜菜碱18 h促进淋巴细胞由G0/G1期进入S期的作用效果最好.     

关于淋巴细胞的三十六个数学模型

应用数学规划理论中的类梯度投影方法,以计算机为工具,对一个大样本作了统计研究,得到了关于淋巴细胞增殖的九个年龄组,四个指数的三十六个模型,国内外均未见报道,属新的数学模型,具有较重要的理论和实际意义。文中还定义了两个新的有广泛应用的分布。     

扶正祛邪Ⅰ号和Ⅱ号药的免疫调节作用

研究扶正祛邪Ⅰ号和Ⅱ号药对小鼠免疫功能的影响。结果：扶正祛邪Ⅰ号和Ⅱ号药ｉｐ（ｉｎｔｒａｐｅｒｉｔｏｎｅａｌ）能明显提高氢化可的松引起免疫功能低下小鼠外周血Ｔ淋巴细胞百分率；明显抑制小鼠半数溶血值、脾淋巴细胞转化及迟发型超敏反应。ｉｇ（ｉｎｔｒａｇａｓｔｒｉｃ）能明显对抗环磷酰胺引起小鼠半数溶血值降低作用。Ⅰ号和Ⅱ号药能明显提高免疫低下小鼠免疫功能．抑制正常小鼠免疫功能。     

大蒜多糖抗氧化活性及其对PC12细胞增殖的影响

目的: 检测大蒜多糖对大鼠嗜铬瘤细胞株(pheochromocytoma cells, PC12)增殖的影响和对经过氧化氢(H2O2)诱导损伤的PC12细胞的保护作用.方法:应用四氮唑蓝(MTT)比色法检测大蒜多糖对细胞增殖的影响;建立H2O2致PC12细胞损伤模型,于倒置相差显微镜下观察细胞形态的变化;化学比色法测定乳酸脱氢酶(LDH)释放量及细胞内和细胞培养上清液中丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)的活性.结果:大蒜多糖各剂量组均能显著提高正常PC12细胞的存活数,大蒜多糖各剂量组均能有效对抗由25 μmol/L H2O2引起的细胞存活率下降和细胞凋亡,可明显改善细胞形态的衰变,显著降低LDH释放量和细胞培养液及细胞内的MDA含量,提高SOD活性.结论: 大蒜多糖促进正常PC12细胞增殖;且对H2O2诱导PC12细胞损伤具有保护作用,其作用机制可能与提高PC12细胞的抗氧化能力有关.     

ERK通路对TGF-β1介导的大鼠血管平滑肌细胞增殖的作用

为研究不同浓度TGF-β1、不同作用时间对体外培养的大鼠胸主动脉平滑肌细胞增殖的影响,并在此基础上探讨ERK信号转导通路在TGF-β1介导的大鼠血管平滑肌细胞增殖中的作用.取大鼠胸主动脉,用贴块法进行原代培养,取3～5代细胞.分别施加不同浓度TGF-β1(0、0.01、0.1、1、10ng/mL)作用24h和10ng/mL TGF-β1作用不同的时间(0、8、12、16、20、24h),用MTT法测定各组细胞吸光值,确定TGF-β1作用浓度和时间.再取生长正常的细胞,分四组:对照组,TGF-β1组,ERK阻断剂组和 TGF-β1 ERK阻断剂组.继续培养24h后,用MTT法测细胞的增殖活性.TGF-β1浓度≥1 ng/mL作用24h时吸光值明显低于对照组(P＜0.05),10ng/mL TGF-β1作用时间≥12h时吸光值明显低于对照组(P＜0.05),10ng/mL TCF-β1作用时间≥12h时吸光值明显低于对照组(P＜0.05);与对照组相比,其他三组吸光值均明显降低(P＜0.05),ERK阻断剂组吸光值低于TGF-β1组(P＜0.0 5).TGF-β1呈浓度依赖和时间依赖方式抑制体外培养的血管平滑肌细胞的增殖,ERK信号转导通路可能不参与TGF-β1介导的大鼠血管平滑肌细胞增殖中的作用.     

雌二醇对血管平滑肌细胞增殖的影响

1材料和方法1．1体外培养小牛胸主动脉SMC[4]1．2SMC48小时增殖率的测定[5]加药情况如下：0．1ng／mlE2组,lng／mlE2组,10ng／mlE2组,100ng／mlE2组,E2溶剂（DMSO,终浓度＜0．05％）对照和培养液对照;每组两种血清浓度2％,15％,各8孔,继续培养48小时;MTT法检测增殖率。1．3SMC集落形成率的测定[6]分组：0．1ng／mlE2,1ng／mlE2,10ng／mlE2,培养液对照和溶剂对照,12天后计算集落形成率。2结果2．1体外培养SMC形态特征贴决后3－4天SMC自组织块边缘萌出（图版a,b）,原代细胞形状多样,有星形、带状三角形、梭形等…     

重组hFGF-7腺病毒对角质形成细胞的生物学效应

目的:研究重组腺病毒导入人成纤维细胞生长因子7(hFGF-7)对人皮肤角质形成细胞(HaCat)的生物学效应.方法:通过倍比稀释和感染实验,测定重组腺病毒rAd-hFGF-7的滴度;流式细胞术检测重组腺病毒感染HaCat细胞的感染效率;MTT法检测rAd-hFGF-7对HaCat细胞增殖的影响;重组腺病毒对HaCat细胞周期的影响通过流式细胞术进行检测.结果:高滴度重组腺病毒可高效感染HaCat细胞,其促细胞增殖作用随着重组腺病毒MOI值的增加而增强,当MOI值为50时,感染细胞进入S期和G_2期的细胞比率显著增加.结论:重组腺病毒rAd-hFGF-7可促进HaCat细胞的增殖,改变HaCat细胞周期.