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【目的】设备制造之间的误差校准已成为各种检测方法实际应用的难题。【方法】提出一种便携式磁弹性(ME)生物检测装置,用于实现免校准检测猪瘟病毒E2抗体(anti-CSFV E2),基于磁致伸缩效应,通过监测anti-CSFV E2引起的共振频率偏移反应待测物浓度。该装置由两部分组成,分别为磁弹性试纸和智能磁弹性共振频率检测仪,试纸体积非常小,外形尺寸约为ELISA试剂盒大小的1/20.使用ELISA试剂盒作为对照,通过检测相同浓度的猪血清样本来验证便携式ME装置的准确性。【结果】ELISA试剂盒与免校准便携式ME装置的检测结果匹配良好,准确率为98%.采用便携式ME装置对不同浓度的anti-CSFV E2进行检测,实验结果表明灵敏度为7.20 Hz/(μg/mL),线性范围为0.1μg/mL~100μg/mL,该装置无需校准即可快速、准确地检测anti-CSFV E2,具有良好的特异性和稳定性。【结论】免校准便携式ME装置为猪瘟诊断和抗猪瘟疫苗接种效果的监测提供了一种有效方法。 相似文献
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猪瘟基因疫苗在小鼠肌肉中的免疫病理学观察 总被引:2,自引:0,他引:2
应用细胞免疫组化法肌肉注射猪温基因疫苗pcDST,pcDSW后,对基因疫苗在小鼠胫前肌组织中的表达及组织病理学进行了动态观察。结果为:pcDST质粒肌注后第3天,pcDSW质粒肌肉注后第5天,在胫前肌肌肉中可检测到表达产物,持续表达20天以上,初期肌肉表现为机械性损伤性炎症变化,中期在炎症区有CD^8 免疫细胞的浸润性损伤性变化,后期恢复,表明基因免疫部位的免疫损伤及非炎症对促进免疫水平有积极的意义。 相似文献
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由标准强毒F114株全长cDNA克隆恢复猪瘟病毒 总被引:7,自引:0,他引:7
通过RT-PCR获得猪瘟病毒(classical swine fever virus, CSFV)强毒株cF114株(中国标准强毒F114株经PK-15细胞增殖)全长基因组cDNA并测序. 与已知其他几株CSFV代表毒株F114, Brescia, Alfort和C株的核苷酸同源性分别为99.41%, 96.80%, 86.03%和95.70%; 氨基酸同源性分别为99.28%, 98.54%, 93.33%和97.41%. 将获得的各基因片段按病毒基因组顺序连接成全长cDNA, 插入pMC18质粒SalⅠ/ XbaⅠ之间, 得到含病毒全长基因组的重组质粒pMC12297. 用T7 RNA聚合酶进行体外转录, 转录出的RNA转染PK-15细胞, 细胞上清液经扩增后, 测定上清液中病毒滴度. 质粒来源的CSFV(vM12297)在抗原反应性和复制能力方面与父代病毒相似. 将疫苗毒C株囊膜蛋白基因E01和E2分别替换到pMC12297相应位置, 获得嵌合体基因组质粒pM/CE01和pM/CE2, 体外恢复获得嵌合体病毒vM/CE01和vM/CE2. 两种嵌合体病毒均能感染PK-15, SK-6和原代猪睾丸细胞, 间接免疫荧光检测显示较vM12297弱, 在PK-15细胞上滴度达到8×10 F-PFU/mL. 这一工作为进一步研究和探讨CSFV增殖与致弱的机理提供了重要的实验和理论资料. 相似文献
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<正> 猪瘟、仔猪副伤寒是目前危害我国养猪业的大敌,是一种急性败血性传染病,传染性强,致死率高,一旦有继发感染时,可以给养猪户造成极为严重的经济损失,目前猪瘟、仔猪副伤寒在我国广大散养户农户已得到基本控制。病例,经分析发现某种猪场发生了猪瘟、仔猪副伤寒是由于免疫不确定,我地近 相似文献
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1.病原.猪瘟病毒与仔猪大肠杆菌. 2.临床症状.①急性型.病猪突然发病,体温升高,可达40~41 ℃,心跳加快,有时突然死亡,或不安、乱窜,时而昏迷,倒地不能站立,四肢呈游泳状,最后因心力衰竭而死.. 相似文献