非细胞体系中红鲤精核去凝集的影响因子研究

以红鲤(Cyprinus carpiored variety)鱼卵提取物为基础建立了非细胞体系,就非细胞体系的Ca2 、鱼卵的成熟程度、以不同温度处理脱膜精核等因子对体系中精核去凝集行为的影响进行了研究.结果表明,成熟的鱼卵适于制备非细胞体系,未成熟和过于成熟的鱼卵都不适宜;在非细胞体系中分别加入CaCl2,可微弱抑制脱膜精核的去凝集;不同温度处理精核对非细胞体系中脱膜精核发生去凝集的百分比有微弱的影响;热冷交替处理精核后精核的平均面积明显大于冷热交替处理和未经热冷或冷热交替处理精核的平均面积.     

用团头鲂精子诱导红鲫雌核发育的研究

用遗传失活的团头鲂（Megalobrama amblycephala）的精子诱导红鲫（Carassius auratus Red Variety）进行雌核发育的研究. 红鲫的卵子经适宜UV剂量灭活处理的团头鲂精子激活后，在0—4℃下冷休克40min抑制第二极体的排出使染色体加倍，获得雌核发育红鲫. 它们的受精率、孵化率及成活率分别为（52.6±3.0）%，（23.6±4.1）%和（15.7±3.4）%，其成活率明显高于用鲤鱼精子诱导红鲫雌核发育的成活率（11.3±2.2）%. 以外形特征、染色体数目及性腺发育程度为依据对雌核发育红鲫与对照杂交鱼进行了区分和鉴定，结果表明，Ⅰ龄鱼的体色为红色，染色体数目为100，性腺发育正常的个体为成功的雌核发育红鲫；而染色体数目为124或148，性腺发育滞后的个体为杂交鱼，其中三倍体鲫鲂是不育的（2年观察证明），而四倍体鲫鲂2年才能达到性成熟. 以鲤鱼的精子作为对照，着重讨论了团头鲂精子作为刺激源的优势，即能提高雌核发育鱼的成活率，并可简化对雌核发育鱼的鉴定，研究证明团头鲂的精子是一种非常有效的诱导鲫鱼进行雌核发育的刺激源.     

鲫血清转铁蛋白cDNA克隆及其序列分析

从GenBank数据库查询发表的鱼类转铁蛋白cDNA或基因序列,根据铁离子结合转运功能位点,设计并合成了两对引物P1、P4以及P2、P3,克隆出鲫血清转铁蛋白cDNA中的核心片段,长度为866 bp.再根据克隆出的核心片段分别设计上游及下游两对引物P5、P6以及P7、P8,随后用RACE方法分别克隆出鲫血清转铁蛋白cDNA的5'端(787 bp)和3'端(1 081 bp)以及全长cDNA,最后用计算机程序排列出鲫血清转铁蛋白全长cDNA,长度为2 444 bp.比较了12种鱼类血清转铁蛋白cDNA序列的同源性.     

6—DMAP诱导太平洋牡蛎三倍体

１９９６１－１９９７年,在进行６－二甲基氨基嘌呤（６－ＤＭＡＰ）诱导太平洋牡较生三倍体的实验过程中,发现一定数量的四倍体。解剖法获取精卵,人工授精。染色体倍性鉴别采用染色体计数法。（１）三因素四水平Ｌ１６（４＾５）正交设计。试验平行重复２次,最高四倍体导率为４０．０±０．０％。太平洋牡四倍体各诱导因素的最优水平组合,当精卵混合２０ｍｉｎ时,将受精卵泡泡在含６－ＤＭＡＰ４５０μｍｏｌＬ＾－１的海水中     

不同盐度下蓝非鲫鳃泌氯细胞的结构变化

实验研究生活于不同水环境中蓝非鲫鳃泌氯细胞显微和超微结构的变化。泌氯细胞分布于鳃小叶基部,浅水环境中,泌氯细胞胞体较小,无分必腔、核大、,中位、海水环境中,泌氯细胞体积增 大,有明显分泌腔,核小、基位、淡水过渡到海水的过程,粗面内质网减少,核缩小,核内染色质凝聚程度增加;胞质中形成达的微细小管系统;线粒体大量增大,以分泌腔为中心放射状分布。研究结果表明,微细小管系统由多分支膜质小管组成,是Ｎａ、Ｋ     

棉花[AG]复合染色体组异源四倍体的人工合成

棉籽不仅产纤维和食用油,棉仁中富含蛋白质高达45—50%,是极有开发价值的高蛋白食品和饲料资源.但棉仁中因含有毒的棉酚(棉毒素)而难以利用.因此,选育低酚棉或选育种子无棉酚(无腺体)而植株含棉酚(有腺体)的棉花,日益受到国内外棉花育种学家的重视.原产大洋洲的野生二倍体比克氏棉(Gossypium bickii)具有种子油腺延缓形成的特性,即种子不具腺体,不含棉酚,待种子萌发后才形成腺体,产生棉酚.自1980年始,我们以栽培的     

黑鲫染色体组型分析

实验分析了新疆特产鱼黑鲫的核型，得出黑鲫的染色体数２Ｎ＝１００，基核型公式为２Ｎ＝３２Ｍ＋３４ＳＭ＋１８ＳＴ＋１８Ｔ，臂数为１６６。除染色体数外，其核型公式和臂数与普通鲫有显著差异，普通鲫的臂数为１２８。根据前人研究认为，鲤科鱼类核型的演化总趋势是核型中染色体总臂数增加，基于这一点、我们认为黑鲫与普通鲫比较，应属于较特化的类型。     

虹鳟鱼(Oncorhynchus mykiss)组蛋白H3启动子的分子克隆及在稀有

使用高保真PCR方法从虹鳟鱼基因组中克隆得到虹鳟鱼组蛋白H3启动子.将虹鳟鱼组蛋白H3启动子插入启动子缺失的增强绿色荧光蛋白(EGFP)表达载体pEGFP-1中,构建成重组载体pRH3EGFP-1.通过显微注射法得到转pRH3EGFP-1稀有鮈鲫.在荧光解剖镜下,可以清楚地观察到EGFP在发育到原肠胚的转pRH3EGFP-1稀有鮈鲫中表达.在稀有鮈鲫幼体鱼苗中也可以清楚地观察到EGFP在多个组织中的泛组织表达.比较CMV启动子、鲤鱼β-actin启动子、虹鳟鱼组蛋白H3启动子的EGFP表达载体pCMVEGFP,pCAEGFP,pRH3EGFP-1在稀有鮈鲫胚胎中的表达特性,结果表明pCMVEGFP最早表达,其后为pRH3EGFP-1和pCAEGFP,表达的强度依次为pCMVEGFP＞pCAEGFP＞pRH3EGFP-1.这说明虹鳟鱼组蛋白H3启动子可以作为一种有效的启动子,应用于鲤科鱼类(如稀有鮈鲫)的转基因研究.     

红鲫促性腺激素α亚基的cDNA克隆

从红鲫(Red crucian earp)脑垂体中提取总RNA，根据鱼类促性腺激素(Gonadotropin Hormone，简称GTH)α亚基的保守性，设计并合成了一对20个碱基长的简并引物，用RT-PCR方法扩增并克隆了红鲫GTH-α亚基的两种不同的cDNA，分别命名为GTH-α1和GTH-α2。GTH-α1和GTH-α2分别由363和366个核苷酸组成，分别编码117和118个氨基酸．这两种类型的cDNA的核苷酸和氨基酸的同源性非常高，分别达到了95.0％和96．6％．但是，它们之间也有4个氨基酸的差别，而且GTH-α1有一个三联体核苷酸组成的氨基酸的缺失。聚类分析表明，GTH-α亚基在鲤科鱼类中具有高度保守性。