Construction of heteroduplex DNA and in vitro model for functional analysis of mismatch repair

Functional deficiency of mismatch repair (MMR) system is one of the mechanisms of tumorigenesis. With the development of the investigation and the requirement from the clinical diagnosis and treatment it is necessary to build up a method to evaluate the functional status of the whole MMR system in the concerned tumors. The original ssDNA and dsDNA from wild type (wt) bacteriophage M13mp2 and its three derivates with mutation points in the     

三元鲤及其双亲(资江鲤(♂)、芙蓉鲤(♀))几个生化性状的比较研究

作者采用聚丙烯酰胺凝胶电泳方法,分析了三元鲤及其双亲(资江鲤(♂)、芙蓉鲤(♀))的血清蛋白、酯酶同工酶及过氧化物酶。研究结果表明:双亲的血清蛋白存在差异,这种差异主要表现在B_2区和B_3区的MA带上。F_1代表现了亲本的血清蛋白,B_1区和B_2区为双亲的嵌合型,B_3区为母本型。双亲的酯酶、过氧化物酯亦存在组织特异性和种的特异性,差异主要表现在心脏和肾脏。F_1代酯酶酶谱偏向父本,肾脏中间主带的酶相对活性明显高于亲本,肝脏阴极端出现一条新的酶带。F_1代心脏的过氧化物酶为母本类型。作者认为血清蛋白、酯酶和过氧化物酶等在鱼类育种中可作为区分亲本、亲本与子代之间的遗传标记。同时,酯酶同工酶谱型的变化,可以作为预测杂种优势的指标。     

栖热菌噬菌体TSP4密码子偏嗜性及其对基因异源表达的影响

 为了探索噬菌体TSP4、栖热菌模式菌株Thermus thermophilus HB27中6种蛋白编码序列和Escherichia coli基因组遗传密码子使用偏嗜性,探索TSP4基因密码子偏嗜性对其基因异源表达的影响本研究利用生物学软件Editseq和RSCU算法统计噬菌体TSP4密码子使用频率并分析其偏嗜性,与栖热菌HB27的同源基因以及常温菌E.coli基因组的密码子使用偏嗜性进行对比分析.结果显示,噬菌体TSP4与栖热菌HB27优势密码子相似度高达85%,而与E.coli的相似性仅有65%.为了验证分析结果,选取TSP4基因组中一个潜在分子伴侣基因序列在E.coli BL21和E.coli Rosetta(补充了BL21菌株中缺失的6个稀有密码子)中进行异源表达.噬菌体TSP4与其宿主菌HB27之间密码子高相似性说明在长期的进化过程中TSP4在基因水平上形成对宿主的一种适应性机制.异源表达结果显示,分子伴侣基因在E.coli BL21中未见明显表达,但在Rosetta中高效表达,说明Rosetta中补充的 6个稀有密码子明显有助于分子伴侣基因的表达,该结果也进一步证明密码子偏嗜性是否一致在很大程度上影响基因的表达.     

Salinispora arenicola CNP193新颖NRPS基因簇在Streptomycetes coelicolor M512中的异源表达

异源表达海洋专性放线菌salinispora arenicola CNP193新颖NRPS基因簇。PCR扩增基因簇两端各约1 000 bp的片段,融合PCR将两片段融合,同质粒pC AP01双酶切后连接,构建基因簇捕获载体pC AP01-preP KS/NRPS,通过TAR(transformation-associated recombination)克隆技术构建基因簇捕获质粒pC AP01-PKS/NRPS,运用三亲接合转移法将pC AP01-PKS/NRPS转化streptomycetes coelicolor M512。HPLC检测对照菌株和重组菌发酵液乙酸乙酯提取物初步表明基因簇有表达产物产生。为新颖salinispora arenicola CNP193新颖NRPS基因簇的鉴定奠定基础。     

我国科学家完成鲤鱼全基因组序列图谱绘制

正在国家"863"计划、"973"计划和国家自然科学基金、公益性行业科研专项等资助下,中国水产科学研究院联合中国科学院、哈佛大学、奥本大学等单位组建的国际合作团队完成了鲤鱼全基因组序列图谱绘制,并揭示其独特的全基因组复制事件,这是国际上首个完成全面解析的异源四倍体硬骨鱼类基因组图谱。该研究成果以Article形式于2014年9月21日在《自然-遗传》(Nature Genetics)杂志在线发表(DOI 10.1038/ng.3098)。     

菜心多倍体诱变及其细胞学观察

报道了用秋水仙素水溶液处理菜心种子及幼苗生长点获得多倍体的方法,并对获得的四倍体与二倍体（ＣＫ）进行了形态学、细胞学以及结籽率等的比较观察。试验结果表明：（１）在１０～１５℃的条件下,用０．１％秋水仙素水溶液处理幼苗生长点４８小时的诱变效果最好,诱变率可达２６．６７％,浸泡种子效果不佳,最高诱变率仅为４．０％。（２）对四倍体植株分别进行人工自交均获得了种子,但结籽率较二倍体（ＣＫ）明显降低,平均达４２．３％,而八倍体植株几乎是完全不育的。（３）与二倍体（ＣＫ）比较,四倍体植株生长旺盛,花薹的产量和品质均有所提高。（４）随着染色体组的增加,花粉粒大小和叶片保卫细胞中的叶绿体数均显著增加,可作为鉴定植株倍性的一个指标     

四倍体湘鲫F3—F4,三倍体湘云鲫,湘云鲤及有关二倍体？…

用流式细胞仪测定湘鲫Ｆ２、湘云鲫、湘云鲤湘鲫Ｆ３－Ｆ４、湘江野鲤、白鲫的红细胞、肌肉细胞中的ＤＮＡ含量。结果表明：湘鲫Ｆ２的ＤＮＡ含量与白鲫、红鲫、湘江野鲁的ＤＮＡ含量很接近,其ＤＮＡ含量比与１：１的比例没有显著差异;湘云鲫和湘云鲁的ＤＮＡ的含量都是湘江野鲁的ＤＮＡ含量的１．５倍,其比值与１．５：１的比例没有显著的差异;湘鲫Ｆ３地Ｆ４的ＤＮＡ含量都是湘江野鲁或湘鲫Ｆ２的ＤＮＡ含量的２倍,其比值２：     

雌核发育彭泽鲫子代及双亲组织同工酶的比较研究

采用7．5％(ω)聚丙烯酰胺垂直板电泳技术研究了丰产鲫及其母本彭泽鲫和父本尖鳍鲤的心、肝、肾、脑4种组织的苹果酸酶(ME)、超氧化物歧化酶(SOD)和酯酶(EST)同工酶表型以及血清蛋白表型．结果表明：丰产鲫的血清蛋白和3种组织同工酶的电泳图谱均与母本彭泽鲫相同而与父本尖鳍鲤显著不同．说明丰产鲫是彭泽鲫卵子在尖鳍鲤精子激发下的雌核发育后代,在血清蛋白和同工酶表型的水平上,异源父本对子代成体的表型无影响。     

异源四倍体鱼早期胚胎发育观察

描述了异源四倍体鱼早期胚胎发育过程 .异源四倍体鱼的卵为粘性卵 ,卵子直径平均为 (1.7± 0 .1)mm .在 (2 1± 0 .5 )℃的水温下 ,受精后 80min第一次卵裂 ,约 80 .5h后 ,受精卵全部脱膜     

我校两项"863"国家转基因植物研究与产业化专项通过验收

受国家科技部委托,江苏省科技厅对我校施季森教授主持的“鹅掌楸、相思树、四倍体刺槐转基因新品种选育与开发”和诸葛强教授承担的“抗病虫、抗逆转基因杨树研究与产业化开发”课题进行了验收。