人胰岛素样生长因子—I的基因克隆融合表达及产物纯化

利用聚合酶链式反应（ＰＣＲ）方法,以ＩＧＦ－ＩｃＤＮＡ为模板,扩增ＩＧＦ－Ｉ的基因,在序更测定确证后,将其定向克隆到载体ｐＥｘＳｅｃｌ上,构建了ＩＧＦ－Ｉ融合表达载体ｐＥｘＩＧＦ,经ＩＰＴＧ诱导表达后,ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析表明：含有重组表达质粒的菌株可表达出约３２．５８％的６ＫＤ融合蛋白,且主要以可溶性形式存在。经ＩｇＧ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ亲和层析一步纯化后,可获得纯度的９０％的融合蛋白,经Ｗｅｓ     

新皮啡肽类似物的设计、合成、构象和生物活性的研究

内源性类阿片肽(Endogenous opioids)是指由机体产生的具有与吗啡(鸦片有效成分)相似生理作用的一些肽类物质,包括脑啡肽、内啡肽、强啡肽、皮啡肽和新皮啡肽等,其作用相当广泛,以镇痛方面的研究较多,但目前对其镇痛的作用原理仍不甚了解.新皮啡肽(Deltorphins)是1989年从一种南美洲树蛙的皮肤中发现的具有很强镇痛活性的一类神经肽,它选择性地结合δ受体.从文献检索看出,有关新皮啡肽的整体镇痛活性及对免疫功能的影响等方面的研究还未见报道,新皮啡肽Ⅱ的构象的研究也未见报道.     

Fmoc保护氨基酸选择性结合金属离子以及质谱重排断裂机理

利用电喷雾电离质谱及串联质谱(ESI-MS/MS), 研究Fmoc保护氨基酸在正离子模式下质谱裂解规律. 正离子二级质谱实验中观察到C端羟基的迁移重排反应, 产生[Fmoc-OH+Na]⁺峰, 提出了可能的重排机理, 推测该重排反应与Fmoc基团、金属离子和金属离子的离子半径大小有关. 在气相条件下, Fmoc基团与羟基具有很强的结合能力.     

利用肿瘤抗原多肽疫苗进行肿瘤的免疫治疗

利用肿瘤抗原多肽疫苗进行肿瘤的临床免疫治疗已成为肿瘤根除性治疗的重要发展方向.随着诱导机体免疫应答的各类不同肿瘤抗原的不断发现,多种肿瘤多肽疫苗已进入临床试验,并取得一定的效果.但高效广谱的疫苗还有待于进一步研究.文中总结了设计选用肿瘤多肽疫苗的依据和原则,着重阐述了用作疫苗的肿瘤抗原的选择及其发展方向,为研究肿瘤抗原多肽疫苗提供参考.     

重组人碱性成纤维细胞生长因子的纯化及生物活性鉴定

目的 :探讨重组人碱性成纤维细胞生长因子 (rhbFGF)的纯化工艺和活性鉴定 .方法 :将rhbFGF工程菌大量扩增后通过包涵体提取、复性、阳离子交换、凝胶过滤等技术进行纯化 .结果 :纯化后的rhbFGF ,相对分子质量为 17× 10 3,蛋白纯度为 95 %以上 ,比活为 1 7× 10 6 U/mg ,对NIH3T3细胞具有明显的促分裂活性 .结论 :通过复性和两步层析的纯化方法可获得高纯度、高回收率和高生物活性的rhbFGF ,可用于实验室研究及临床试验     

杭州市生物医药产业发展研究

一、杭州市生物医药产业的发展现状⒈基本情况据杭州市医药行业办的年报数据,2001年,生物医药产业产值、销售收入、利润等指标均比2000年有不同程度的提高,虽然在4 个主要行业中,其增长率不是最高的;但值得注意的是,和整个医药产业总体发展相反,生物制药工业增加值2001年比2000年有所下降。说明,2001年杭州市生物医药行业虽有发展,但整体效益不高。⒉企业及产品情况杭州市医药工业基础较好,拥有居全国医药行业前列的正大青春宝药业有限公司、中美华东制药有限公司、默沙东制药有限公司、胡庆余堂药业有限公司等一批实力较强的企业,在激烈的…     

运用生物质谱分析磷酸化多肽合成中的主产物

蛋白质磷酸化是生物体内非常重要的翻译后修饰,磷酸化多肽及其类似物对研究和阐明蛋白质磷酸化修饰对生命活动的调节机制具有十分重要的作用,采用4-磺酸苯异硫腈酸酯修饰,源后衰减基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱(PSD-MALDI)模式分析合成磷酸化多肽,建立了一种简便易行的磷酸化多肽鉴定及定位方法.     

肝脏抗菌多肽在铁代谢中的调节作用

人体存在着严格的铁代谢调节机制,以确保体内铁始终处于正常生理水平.这种机体铁稳态关键依赖于小肠铁吸收和机体铁需要之间的平衡.研究显示肝脏抗菌多肽很可能是一种控制小肠铁吸收及调节体内铁稳态的关键物质,是一种极为重要的铁调节激素.肝脏抗菌多肽可以反映体内铁的储存状态,在铁积聚时肝脏抗菌多肽表达增加,使小肠铁吸收减少,巨噬细胞铁储存增多;铁缺乏时肝脏抗菌多肽表达减少,使小肠铁吸收增加,巨噬细胞释放铁增加.     

CSB1-Lipo-DOX-miR101靶向治疗乳腺癌及抗耐药效应的体外研究

通过薄膜超声分散技术、硫酸铵主动载药技术构建了靶向乳腺癌(breast cancer, BC)细胞的具有抑制化疗药物多药耐药性(multidrug resistance, MDR)特征的阿霉素(doxorubicin, DOX)脂质体载药体系CSB1-Lipo-DOX-miR101。应用MTT法、损伤修复法、Transwell、细胞核染色、扫描电镜等技术对药物疗效和细胞行为变化进行研究。利用网络数据库分析miRNA101潜在靶向的MDR相关靶基因及BC恶性表征相关基因,以Western blot验证分析miRNA101靶基因的表达及潜在的抗MDR机制。结果表明,CSB1-Lipo-DOX-miR101对BC细胞MCF-7靶向性良好,特别是对耐药性BC细胞MCF-7/ADR具有明显杀伤力,同时对药物的MDR形成具有显著抑制作用,使药物可以持续发挥杀伤作用。结果提示CSB1-Lipo-DOX-miR101可以提高DOX对BC的临床治疗效应、降低毒副作用及复发率,其对BC的治疗效应及对MDR的抑制机理可能是通过抑制ABCC5、EZH2、APEX1、ITGB1、Snail1、MMP2基因表达实...     

疫苗研究的新策略

传统的疫苗主要为微生物体经减毒或灭活制备而成,虽较为安全和有效,但仍存在不足。随着生物技术的发展,现代疫苗研究已取得了重大进展。本文从抗原选择与设计、免疫佐剂、疫苗投递系统等方面探讨了疫苗的不同研究策略。