中华鳖气单孢菌类疾病研究

对气单孢菌性鳖病做了大量的研究,取得了如下几方面的进展：（1）国内最先发现并报道了鳖白点病,水泡病;（2）澄清了鳖烂甲病,肿脖子病,白底板病,腹水病的病原及其关系;（3）揭示了嗜水气单孢菌在组织的分布和疾病的发生机制;（4）拟定出对各种鳖病的防治方法,多年的临床实践资料显示,在中等管理水平下,本成果的技术方法可控制“白点病”发病率在2％以下,烂甲病和肿脖子病发病率在1．5％以下,使烂甲病,肿脖子病治愈率达到85－93％,腹水病轻,中度病鳖转归率在97．7％以上。     

中华鳖嗜水气单胞菌苗的制备和应用

探讨了福尔马林在不同温度、不同浓度条件下对中华鳖嗜水气单胞菌细胞的灭活时间,介绍了中华鳖嗜水气单胞菌灭活菌苗的制备过程,并报告了菌苗的安全性、免疫效力和现场应用结果。     

中华鳖常见致病菌对13种抗菌药物的敏感性测定

本研究检测了13种抗菌药物对7株中华鳖致病菌的最小抑菌浓度（MIC），结果表明，从河南郑州的患病中华鳖体内分离的菌株较湖北武汉、湖北咸宁的病鳖体内分离的菌株对各类药物的敏感性强，而从武汉和咸宁产地的病鳖体内分离的菌株其对各类药物的敏感性也有很大差异，结果显示供试菌株对抗菌药物产生了不同程度的耐药性，推测滥用药物和用药方法不当是导致病原菌产生耐药性的原因。     

中华鳖病毒病原的发现

中华鳖(Trionyx sinensis)由于其独特的营养和药用价值,近年来其养殖业迅速发展,产量直线上升.但随着养鳖业的发展,鳖的疾病日趋严重,已成为制约养鳖业发展的关键因素.当前虽然已观察到了穿孔病(也称疖疮病、空穴病)、红脖子病(也称红斑病)、腐皮病、水泡病、白斑病、白点病、水霉病等病症,但由于病原研究的滞后状况,一病多症、一症多病原的情况迄今尚无法正确判断,造成防治工作的被动.特别是在养殖过程中,一旦发病,往往是多病并发,很难治愈,经济损失十分严重.最近,我们在养殖过程中就遇到了多症并发、暴发流行的情况.我们采集了表现有典型症状、濒于死亡的病鳖样品,进行了病毒病原的分离,结合电镜观察、病毒结构多肽分析,以及对多种培养细胞的感染性测定等多方面研究,初步查明引起鳖病发生的病毒性病原.这一发现不但揭示了鳖病暴发性流行难以根治的病因和病原,也为从免疫学及分子生物学方面探讨致病机理、研究防病治病措施找到了研究方向.     

鳖用四价细菌灭活疫苗免疫防治应用研究

将分离自中华鳖主要细菌性疾病如肠道出血性败血症、鳖穿孔病（疖疮病）、红脖子红底板病、鳖腐皮病的4株不同血清型的温和气单胞菌,用3.5%福尔马林溶液处理24 h灭活并添加蜂胶作为佐剂,制成总含菌量为6×109CFU/mL的四价菌苗。同时制备了针对中华鳖IgM的单克隆抗体3H3,并建立了由单抗3H3介导的三抗体夹心ELISA（TAS-ELISA）方法对四价菌苗的免疫效果进行评价。将研制的四价菌苗小批量免疫健康中华鳖,分别于免疫前及免疫后的100 d内,随机采集3只免疫组和1只对照组的中华鳖血清,利用所建立的TAS-ELISA测定血清中抗体ELISA效价。将免疫50 d的中华鳖分成4组,分别用4株病原菌以5LD5（09×106CFU/mL）进行攻毒,并用上述制备的四价疫苗进行免疫预防试验。结果显示：当中华鳖免疫后40 d,血清中抗体ELISA效价最高,为1：（1.28×104）;中华鳖免疫后50 d,其免疫保护率均达到100%,同时对照组死亡率为100%。结果表明：以蜂胶为佐剂的鳖用四价细菌灭活疫苗所开展的免疫预防试验取得了良好的免疫效果,能有效地预防养殖鳖类主要病害的发生。     

中华鳖水泡病病原病理学研究

１９９３年８月信阳师院生物系特种动物养殖研究所的试验鳖场孵化出一批小鳖。同年１０月有一只鳖得了一种新的疾病，病鳖颈根部和右下肢基部各有一大水泡，暂名“水泡病”。本文对其分离菌进行了研究，鉴定为嗜水气单胞菌。中华鳖水泡病的致病机理，可能与病原菌的毒力与传染途径有关，而鳖的抗病能力是能否引起该病的关键，外界环境因素是引起该病的诱因。     

孔雀石绿消毒中华鳖使用浓度和作用时间的研究初报

养殖池水含孔雀石绿4～6ppm，作用时间30分钟．可杀灭养殖池术中82％～83％的细菌，养殖的中华鳖未见异常损伤；孔雀石绿0．2～1．5ppm浓度24小时至120小时浸泡甲鱼．可抑制水霉的生长。文中还介绍了生产中常用浓度。     

中华鳖dct基因克隆及表达分析

为了阐明中华鳖酪氨酸酶家族成员dct基因的结构与表达特征,根据Ensembl数据库的中华鳖dct基因序列设计引物,运用RT-PCR技术进行开放阅读框(opening reading frame,ORF)克隆,并进行生物信息学分析,进而采用实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,q-PCR)技术检测正常体色和黄色中华鳖肺、肾脏、裙边和肌肉组织的mRNA表达水平.结果显示中华鳖dct基因ORF区全长1 578 bp,编码525个氨基酸,2种体色鳖dct基因序列完全一致;氨基酸序列分析得C末端无L-亮氨酸基序;N末端含有1个信号肽结构域;预测蛋白(成熟肽)分子质量为56.449 ku,理论等电点为6.67,不稳定指数为38.71,表明DCT蛋白是酸性稳定蛋白;预测DCT蛋白为亲水性蛋白;含有跨膜结构域、类表皮生长因子结构域、层粘连蛋白型类表皮生长因子结构域和2个铜离子结合结构域.系统发育树分析显示,在dct基因进化过程中,中华鳖与绿海龟和锦龟的亲缘关系较近.q-PCR结果表明:dct基因在同一个体各组织中均有表达,肺组织中相对表达量最高,且极显著高于其他3种组织;黄色中华鳖肺、肾脏和裙边组织dct 表达水平与正常体色鳖的相应组织均存在显著性差异.结果表明,中华鳖体色变异与dct基因突变无关,但dct基因表达改变可能对体色变异起了一定的作用.     

冬眠及外源维生素C对中华鳖(Pelodiscus sinensis)稚鳖能量代谢的影响

观测了冬眠前饲料中添加外源维生素C(Vc)对冬眠中华鳖稚鳖能量代谢的影响.结果发现外源Vc不能提高冬眠期间中华鳖的存活率(P=0.57).稚鳖个体在冬眠期间生长能的平均值为-0.15 kJ.d-1,该值与代谢耗能相当.鳖体蛋白、脂肪、水分和灰分质量分数w在冬眠前后无显著差异(P>0.05),外源Vc对鳖的体组成没有明显影响(P>0.05).冬眠8周后,肝脏线粒体细胞色素C氧化酶(COX)和肝脏乳酸锐氢酶(LDH)的活性显著下降(P<0.05).饲料外源Vc对肝脏线粒体蛋白含量、肝脏线粒体COX和LDH的活性均无影响(P>0.05).