Fractalkine基因真核表达质粒的构建及其在小鼠肝癌细胞中的表达

为克隆小鼠趋化因子Fractalkine(．FK)基因，构建真核表达质粒，并在小鼠肝癌细胞中表达，用以进行肿瘤的基因治疗，用RT-PCR法，从小鼠乳腺癌细胞D2F2扩增FK的cDNA，插入pCR2．1 TOPO载体，测序证实后，将其亚克隆至质粒pIRES中构建FK真核表达载体；用脂质体将重组质粒转染小鼠肝癌MM45 T．Li细胞，经G418筛选获得抗性细胞克隆，用RT-PCR和免疫化学方法鉴定转染细胞中FK基因的表达．结果表明：经限制性内切酶酶切图谱分析和DNA序列测定证实目的基因已插入重组质粒，RT-PCR和免疫化学方法证明转基因MM45T．Li细胞克隆中存在小鼠FK基因的表达。     

针对案例研究局限性的案例研究方法操作过程设计

案例研究是社会科学研究常用的方法之一。但是,从文献来看,案例研究的实际应用常常是不规范的。本文在描述案例研究方法的定义及适合性的基础上,列举了案例研究方法存在的局限,设计出了案例研究方法的操作过程以提高该研究方法的推广性和有效性。     

教师引导要做到“三适”

转变学生的学习方式是这次课程改革的一个重要方面，而学生的学习方式转变，必然引起教师教的方式转变。我在参与新课程实验中发现，部分同志对新课程的“教”感到茫然不知所措，甚至对教师的讲解产生怀疑。重温《数学课程标准》“学生是数学学习的主人，教师是数学学习的组织者、引导者与合作者”这一句话，使我们认识到在新课程中不仅需要教师引导(讲解)，而且对教师引导提出了更高的要求。     

集成电路噪声模型算法及其矩阵表达

给出了集成电路噪声模型算法及其矩阵表达．噪声模型算法是利用功率谱密度叠加原理推证得出的，根据噪声叠加原理，多级集成电路的功率谱密度为单级集成电路功率谱密度的叠加之和，而单级集成电路的功率谱密度同样也基于叠加原理求得；并借助电路噪声等效理论，以反相输入运算放大器为例，探讨了运放噪声模型的矩阵算式，其方法和步骤同样适用于同相输入运算放大器；给出的程序设计方法为噪声模型算法的应用提供了思路，使系统参数的计算变得更精确．     

物种种性漂移的生物信息论基础

提出了生物信息论——以数字化技术研究和描述生物遗传信息的结构、变化、传递和表达成生物性状全过程的科学，建立了生物信息的结构、变化、传递和表达模型，定义了用于生物信息论研究的若干概念，分析了物种种性漂移的生物信息论之基础。     

几丁质酶基因在转基因烟草中表达效率的检测

采用氨基葡萄糖法检测转基因烟草植株叶片几丁质酶活力，结果表明几丁质酶基因在转基因植株中酶活力增强，与β—1,3-葡聚糖酶基因的协同作用下酶活性最强，几丁质酶活力的测定对外源基因表达效率的检测是可行的．     

甘蓝磷酯酶D HKD2功能区基因片段的克隆与反义表达载体的构建

以甘蓝(Brassiaca oleracea)为材料，取幼叶分离mRNA，反转录合成cDNA，以cDNA第一链为模板，通过PCR扩增，获得甘蓝磷酯酶D(Phosphorate　Lipid　Dehydrolase，PLD)HKD2功能区的基因片段．对其进行Blast分析，结果表明，分离的目的片段核苷酸序列与Genbank中报道的甘蓝PLD基因相比同源率为99．7％，只有2个碱基发生改变．将得到的PLD基因片段插入植物表达载体pAT940，构建了PLD基因反义表达载体pATC—rPLD，为下一步进行抗逆转基因作物选育打下基础．     

水稻精细胞基因RSSG58启动子的克隆分析及表达载体构建

根据分布的水稻基因组测序的比较和水稻精细胞优势表达的RSSG58基因cDNA序列，以水稻品种“桂朝2号”黄化苗组DNA为模板，用PCR方法克隆出RSSG58在起始密码子以前的上游调控序列Pr58，经过Pr58启动子进行的鉴定和分析表明，具备大多数高等植物启动子的保守元件，预计它的RSSG58基因在特异表达方面具有一定的作用。为了鉴定RSSG58基因的基本启动子元件，将RSSG58基因5′侧翼序列做缺失片段分析，由PCR从Pr58中得以3个不同大小两端带有HindⅢ，BamHⅠ酶切位点的片段Pr58Ⅰ，Pr58Ⅱ和Pr58Ⅲ，定向插入载体pMGFP4(pBI221改建，报告基因为GFP）中，取代原有的CaMV35S启动子，构建了由驱动报造基因GFP的植物表达载体pRGFPⅠ，pRGFPⅡ和pRGFPⅢ，用于农杆菌介导法水稻遗传转化。其目的是为进一步在模式植物中研究其表达功能奠定基础。     

重组肠激酶在甲醇酵母中高效表达的培养条件研究

对重组肠激酶在甲醇酵母中高效表达的发酵条件进行了优化，并在BiofloⅢ发酵罐中实现了高密度培养和高效表达。结果表明；温度30C，培养基pH6．0，当酵母密度达到200A600mm以上时，加入无水甲醇，控制甲醇的流加体积，使其终体积分数为1．0％～3．O％，继续诱导培养72h左右，酵母菌密度可达到150g／L，重组肠激酶总活性可达58kIU／L发酵液。     

岗能绩效薪点薪酬设计案例

笔者研究设计的“岗能绩效薪点薪酬方案”于2001年在广州市某房地产建设开发集团推行,一年的运行实践证明本方案颇能适应企业的实际需求,所以特将此岗能绩效薪点薪酬体系的设计思想写出来以飨读者,希望能对正在探索改革转型中的国有企业和寻求规范内部管理运作的民营企业和外资企业在实现科学的人力资源管理方面起到抛砖引玉的作用。 一、岗能绩效薪点薪酬体