Construction of recombinant industrial Saccharomyces cerevisiae strain with bglS gene insertion into PEP4 locus by homologous recombination

The bglS gene encoding endo-1,3-1,4-β-glucanase from Bacillus subtil＆ was cloned and sequenced in this study. The bglS expression cassette, including PGK1 promoter, bglS gene fused to the signal sequence of the yeast mating pheromone a-factor （MFals）, and ADH1 terminator with G418-resistance as the selected marker, was constructed. Then one of the PEP4 allele of Saccharomyces cerevisiae WZ65 strain was replaced by bglS expression cassette using chromosomal integration of polymerase chain reaction （PCR）-mediated homologous recombination, and the bglS gene was expressed simultaneously. The recombinant strain S. cerevisiae （SC-βG） was preliminarily screened by the clearing hydrolysis zone formed after the barley β-glucan was hydrolyzed in the plate and no proteinase A （PrA） activity was measured in fermenting liquor. The results of PCR analysis of genome DNA showed that one of the PEP4 allele had been replaced and bglS gene had been inserted into the locus of PEP4 gene in recombinant strains. Different endo-1,3-1,4-β-glucanase assay methods showed that the recombinant strain SC-βG had high endo-1,3-1,4-β-glucanase expression level with the maximum of 69.3 U/（h·ml） after 60 h of incubation. Meanwhile, the Congo Red method was suitable for the determination of endo-1,3-1,4-β-glucanase activity during the actual brewing process. The current research implies that the constructed yeast strain could be utilized to improve the industrial brewing property of beer.     

基于APV法的对外直接投资项目经济评估模型

针对跨国公司直接投资项目的多样性和复杂性,基于调整净现值法,试图建立一个对外直接投资项目评价模型,以用来合理评估跨国投资项目。     

从富宁土戏剧目的历史变迁审视壮剧的人文意蕴——以《侬智高》、《螺蛳姑娘》、《阿寿还乡》为例

云南壮剧分为富宁土戏、广南沙戏和文山乐西土戏三个分支，其中以富宁土戏历史最长，并且发展得最好最快。土戏在历史发展过程中出现了许多优秀剧目，从土戏上演初始的《侬智高》到建国后的《螺蛳姑娘》再到新时期的《阿寿还乡》，分别反映了不同时期的时代特色和审美情趣，反映了壮剧土戏与时俱进的特点，并且体现出了很高的民族伦理学价值。     

体育法视野下优秀运动员生命健康权保障的思考

从保护运动员生命健康权出发,就优秀运动员生命健康权的保障问题进行较深入的分析,剖析其中存在的问题和原因,并提出多渠道、多元化的运动员生命健康权保障和救济体系的初步解决方案和建议,力争为改革和完善我国运动员管理体制,维护广大运动员的正当权益,完善有关运动员权利的体育法律、法规提供有益的参考。     

一种加权控制的开关电源

详细分析了多路输出开关电源控制体制上的缺点，提出了一种加权控制方法，并提出了实际的电路实现方案     

异质网络环境下TCP性能改进机制研究

分析了异质网络环境的特点及其对传统TCP性能的影响,评价和比较了当前用于增强TCP性能的解决方案,最后指出了当前仍存在的问题和进一步的研究方向.     

斑鳜轻链3基因(MLC3)cDNA的克隆及纵向表达分析

提取斑鳜肌肉组织总RNA,逆转录得到cDNA,然后利用常规PCR法扩增得到斑鳜肌球蛋白轻链3基因(MLC3)序列.斑鳜MLC3基因cDNA序列的全长为532 bp,编码150个氨基酸.通过PROSITE tools软件预测显示该序列具有2个EF-手相结构.通过实时荧光定量PCR法对斑鳜MLC3纵向表达进行分析发现,ML...     

基于DSP的SRD数字控制电路

采用了一种基于数字信号处理器（DSP）的开关磁阻电机控制器，利用DSP的运算能力强、速度快的特点，简化了系统硬件，实现了双闭环控制。并用实验的方法进一步验证了所提方案的正确性。     

电视机场扫描电路常见故障分析及检修——彩色电视机维修技术研究之二

文章简述了电视机场扫描电路的组成和工作原理，在此基础上分析了电视机场扫描电路的检修方法及其常见故障的维修，并给出了具体的维修实例。     

生物芯片技术的研究进展

生物芯片技术是近些年来发展迅速的一项高新技术.论述了生物芯片的分类、应用及研究进展,并对生物芯片的发展前景作了展望.