LC3真核表达载体构建及其在293T细胞中自噬诱导研究

【目的】构建pEGFP-N1-LC3真核表达载体,并将其转染进人胚肾细胞293T,通过Earle's盐平衡液(Balanced salt solution,EBSS)饥饿诱导观察细胞自噬现象。【方法】RT-PCR扩增LC3基因,并将其插入pEGFP-N1真核表达载体构建重组质粒。将重组质粒转染至人胚肾细胞293T,显微镜观察、Western blot检测GFP-LC3融合蛋白表达情况。对转染细胞进行Earle's盐平衡液饥饿诱导,通过Western blot验证自噬指标,激光共聚焦显微镜观察自噬泡形成。【结果】成功构建pEGFP-N1-LC3真核表达载体,并在293T细胞中成功表达目的蛋白,在进行Earle's盐平衡液饥饿诱导后观察到自噬泡的形成,Western blot检测到LC3-Ⅰ向LC3-Ⅱ的转化。【结论】本实验为研究自噬在癌细胞病理进程中的机制提供了实验素材。     

RBF网络参数优化方法及其在开关磁阻电机建模中的应用

 基于全局搜索的进化算法——粒子群算法（QPSO）和一种局部搜索算法——结构化的非线性参数优化方法（SNPOM）,提出了一种混合的优化算法估计RBF神经网络中的参数——网络中心、线性参数、非线性参数,初始化一定数目的种群作为SNPOM的初始值,得到其适应值,通过选择、交叉、替换策略更新种群,完成网络中心初始值的寻优。再用SNPOM方法进一步优化,以提高SNPOM算法的全局搜索能力。仿真结果表明,混合优化方法比单独采用SNPOM法更优,且优于其他算法。并针对开关磁阻电机（SRM）高度非线性的开发重点和难点,用RBF网络进行SRM建模,将QPSO-SNPOM算法应用于RBF模型参数优化中,仿真实验结果表明,该算法较SNPOM算法精度更高、泛化能力更强,较遗传混合算法更快,训练后的RBF模型完全满足开关磁阻电机特性。     

矿产资源开发环境影响一般性评价指标的构建

为实现矿产资源开发的最优化,在识别矿产资源开发造成不同环境问题的基础上,归纳出环境影响因子,构建了环境影响3级评价指标体系。在指标划分等级上,将矿产资源开发利用环境影响程度划分为小、中等、大、非常大4个等级;在等级阈值确定上,依据行业标准或通过专家讨论,确定了开采回采率等20个具体指标的相应阈值。     

用于电转染NIH3T3细胞的两种电击介质的比较

分别采用不含钙镁离子的PBS与电转缓冲液,利用电穿孔转染法将带有增强型绿色荧光蛋白(e GFP)的pe GFP-N1质粒转染到NIH3T3细胞中.所用的电转参数为:电压6 V,脉冲数2,脉冲时间1ms.结果表明,无钙镁的PBS的电转效率高达(21.2±2.1)%,而电转缓冲液的电转效率只有(3.8±1.4)%.在电转后加入G418筛选,用不含钙镁离子的PBS为电击介质的细胞状态正常且大量增殖.因此,通过对转染效率以及对细胞损伤的对比,无钙镁的PBS更适合作为NIH3T3细胞的电击介质.     

有色观测噪声下的多变量设置调整策略

针对存在初始设置偏差的离散的多变量生产制造过程,研究了观测噪声服从Auto-Rgressive （AR）模型的情况下,考虑调整花费成本为二次型函数时的设置调整问题,在建立过程状态空间方程的基础上,利用卡尔曼滤波方法在线估计过程的状态变量,根据随机二次型最优控制理论,得到了使过程质量损失最小的最优调整策略. 通过算例解释了最优调整策略的实现方法,并进行了仿真验证,结果表明,得到的调整策略与观测噪声为白噪声时的质量调整策略相比,能更好地减少过程总体质量损失.     

爆炸地震波频谱特性研究

目的 研究爆炸地震波频谱特性,为爆破工程安全设计和地震波毁伤目标提供依据。方法 测量爆炸地震波,并进行ＦＦＴ变换和频谱分析。结果 得到爆炸地震波频随距离的变化规律以及传播路径,炸药量,装药位置对爆炸地震波频谱的影响特征。     

裂缝介质中瑞雷面波传播的渐变非均匀交错网格数值模拟

提出了渐变非均匀交错网格高阶差分方法,模拟裂缝介质中瑞雷面波的传播过程,并引入具有二阶时间精度和六阶空间精度的附加差分公式解决非均匀交错网格的不对称问题。这种差分方法可描述为：在裂缝处采用细网格,在其他地方采用粗网格,细网格到粗网格之间在空间上采用渐变步长,达到既细致地描述了局部细微结构、又保持了计算量适当的目的。在变步长的选取中提出了采用汉宁窗函数,这样既可以较快地从粗网格向细网格过渡,又避免了粗细网格过渡时发生频散,算例表明该方法完全适用于模拟裂缝介质中瑞雷面波的传播,计算精度较高,且能节约时间和内存,数值模拟结果非常直观地揭示了瑞雷面波在裂缝介质中的波场传播特征。     

大直径钢顶管管道温度应力特性分析

为了研究钢顶管在运营状态温度作用下的内力特征,采用数值模拟的方法,依托黄浦江上游水源地连通工程,对深覆软土、长距离顶进、内径4 m钢顶管在运营状态温差作用下进行数值模拟。数值模拟结果表明,当管端约束作用较强时,管端环向应力会出现应力集中的现象;随着远离管端约束边界,环向应力集中快速衰减。纵向应力拉压应力共存,随着远离管端约束边界纵向应力变大,并且变为单一拉应力或者压应力。管道靠近约束端的环向应力和纵向应力随着温度的变化均有明显变化,远离约束端的纵向应力受温度变化影响同样明显,但是环向应力基本没有变化。刚性约束得到释放以后,整个管道的应力下降明显。     

一种基于粒子群的模糊聚类图像分割算法

针对图像分割特征具有交叉重叠现象、其类属的划分存在不确定性的分割问题,模糊聚类分割算法具有较强的优势,但其速度慢且容易陷入局部最优以及对初始值的设置敏感等问题.根据粒子群优化算法具有全局寻优能力,同时还具有较强的局部寻优能力,能更快收敛于最优解的特点,提出了一种基于粒子群的模糊聚类分割算法.实验证明,该算法相比传统的模糊聚类分割算法,具有更快的收敛速度和更高的分割精度.     

轴向功率超声振动珩磨颤振系统的稳定性分析

内燃机缸套的功率超声振动珩磨加工中,超声珩磨加工系统的自激振动会严重影响缸套的表面加工质量.根据超声珩磨加工机理及动态珩磨厚度分析,建立了超声珩磨颤振系统动力学模型,基于再生颤振理论对超声珩磨颤振系统进行稳定性分析,推导出极限珩磨宽度和主轴转速的相互关系,运用MATLAB对其仿真分析,得出不同刚度、阻尼系数等系统参数和主轴转速、往复速度等加工参数对系统稳定性极限图的影响.分析表明:超声珩磨加工系统在主轴转速低于400 r/min时容易发生颤振;发生颤振的临界珩磨宽度为27 μm;具有较大刚度和阻尼比系数的超声珩磨系统的稳定性较高.