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成年小鼠成纤维细胞体外培养 总被引:3,自引:0,他引:3
成年小鼠皮肤成纤维细胞可从尾部取材用组织块培养法进行原代培养,添加血清的M 199(E arle′s)和低糖的DM EM均能较好的满足原代细胞的生长.两种培养液中细胞增殖的速度无明显差异.用0.25%胰蛋白酶消化小鼠尾尖原代培养物,上皮细胞与成纤维细胞有明显的敏感度差别.经控温控时消化传代,可将上皮细胞与成纤维细胞分离纯化. 相似文献
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羔山羊的超数排卵及体外受精 总被引:4,自引:0,他引:4
以FSH或FSH-LH四种不同处理方法对29只68~110日龄羔山羊进行超排处理,结果共采集卵泡卵母细胞708枚,平均每只羔羊采卵24.4枚.卵母细胞经体外培养24h后有81.2%的卵发育为成熟卵.分别用经钙离子载体A_(23178)或肝素进行获能处理的精子对体外培养成熟的卵子进行体外受精,结果精子穿入卵率分别为54.8%和34.4%,发育至2~4细胞胚的卵裂率分别为28.6%和41.9%.采用FSH-LH(肌注)进行超排处理得到的卵子经体外受精处理后,其卵裂率明显高于采用其它超排方法得到卵子的卵裂率. 相似文献
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将外源融合基因BaLA-HI与DOSPER脂质体等比较混合,加入获能精子悬液中,37度,5%CO2共培养0.5h,以这种处理精子作为转基因载体乾鼠的体外受精及胚胎移植,在获得的40只移植后代后,经PCR特异片段扩增和Southern杂交,共检测出2只呈相性的转基因小鼠,证明人胰 基因已在小鼠染色体上实现了整合,基因整合率为5%。 相似文献
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不同种公牛精液对牛卵母细胞体外受精效果影响的研究 总被引:6,自引:0,他引:6
分别利用不同个体的海伏特、安格斯和荷斯坦种公牛精液进行体外受精,观察了不同品种不同个体种公牛精液的体外受精效果,利用五种海伏特种公牛精液进行体外受精后卵裂率为17.6%~74.7%,囊胚发育率为1.0%~32.6%,不同个体间差异极显(P〈0.01)。利用五种安格斯种公牛精液进行体外受精后卵裂率为34.7%~85.3%,囊胚发育率为6.2~40.5%,不同个体间具极显差异(P〈0.01)。利用 相似文献
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羔山羊卵泡的发育及卵母细胞体外成熟的研究 总被引:8,自引:0,他引:8
为利用羔羊作供胚羊,采用三种超数排卵的方法,对出生后40~150日龄的羔山羊进行超数排卵处理以后,从活体采集卵巢卵母细胞在体外进行了培养.研究结果表明,采用超数排卵的技术能够诱导未性成熟羔山羊的卵巢卵泡的发育,由超排后采集到的羔山羊卵泡卵母细胞经体外培养有继续发育成熟的能力.适宜的超排方法为FSH10mg+LH1.5mg(肌肉注射),羔山羊适宜的超排日龄为40~90d,卵母细胞的体外适宜培养时间为18~28h. 相似文献
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研究探讨了不同体外培养条件下牛体外受精胚胎的发育速度及囊胚细胞数,从而了解不同体外培养系统对牛体外受精胚胎质量的影响.实验一中将体外受精卵分别在SOF+牛输卵管上皮细胞(BOEC)和TCM199+BOEC两种培养系统内培养,在这两种培养条件下囊胚发育率分别为22.2%和21.2%,囊胚细胞数分别为113.3±5.0和97.9±8.3,受精后第6~9d的囊胚出现率分别为40.1%a、37.0%、19.2%b、2.7%和13.5%c、32.7%、36.5%d、17.3%(a>c,P<0.01,d>b,P<0.05),表明牛体外受精卵在SOF+BOEC中的发育速度快于在TCM199+BOEC中.实验二中将体外受精卵分别培养于SOF+BOEC、SOF+牛卵丘细胞、SOF+BSA三种培养系统中,结果囊胚发育率分别为35.5%e、29.4%和22.4%f(e>f,P<0.01),囊胚细胞数分别为117.3±8.0g、94.2±9.3和90.2±9.4h(g>h,P<0.05).实验三观察了体外受精胚胎在SOF+BOEC培养条件下发育速度与囊胚细胞数的关系,结果第6~9d的囊胚细胞数分别为110.8±10.2i、128. 相似文献
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以FSH-LH进行超排处理所得的羔山羊卵母细胞为材料,首次对羔山羊卵母细胞在体外成熟过程中的超微结构进行了探讨,并进行了细胞核质成熟的分析.结果表明:1)卵母细胞经体外培养0h.18~20h后,分别有11.2%、75.0%的卵发育至第二次减数分裂中期(MⅡ),表明羔羊超排卵泡卵母细胞在体外培养18~20h以后,绝大部分卵子的细胞核已成熟;2)透射电镜(TEM)结果表明,0h卵母细胞内皮质颗粒(CGs)分散于细胞质内,但有时也以簇的形式存在.体外培养18~20h后,CGs数量增多,大多都定位于接近质膜的胞质中,呈单层排列,根据这种CGs迁移现象判断的体外成熟卵母细胞质成熟率50%,3)羔山羊卵母细胞内线粒体基质密度较浅,嵴很少,但经体外培养后部分线粒体中出现小嵴.细胞质中的内质网数目很少,通常以单个囊池形式存在;4)在部分卵母细胞质中脂滴和空泡数量增多,皮质颗粒消失.据此分析,体外培养0h,18~20h以后,分别有25.0%和31.3%卵子已出现退化现象. 相似文献
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平衡方法及平衡和解冻温度对牛体外受精胚胎玻璃化冷冻保存效果的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
以体外成熟、体外受精并体外发育的牛囊胚为实验材料进行玻璃化冷冻保存,分别探讨了防冻剂的平衡方法以及平衡和解冻温度对胚胎冷冻效果的影响.实验结果显示,在室温下(18℃)以二步法或三步法添加防冻剂的冷冻效果,明显优于在4℃下,以二步法添加防冻剂的效果,其冷冻—解冻胚的发育率分别为62.8%(59/94)、53.1%(52/98)和14.6%(12/82)(P<0.01);另外,室温下以二步法玻璃化冷冻的胚胎,在20℃水浴中解冻的发育率明显高于37℃解冻的效果,62.7%(37/62)、26.2%(16/61)(P<0.01).结果表明:体外成熟、体外受精的牛胚胎可以进行玻璃化冷冻保存,并能得到较高的培养存活率,在室温下,以二步法添加防冻剂,并于20℃下解冻的玻璃化冷冻保存方法是一种快速、简便而有效的方法. 相似文献