类人胶原蛋白表达载体的构建及在毕赤酵母中的表达

基于人胶原蛋白胶原域序列特征,设计合成了一段类人胶原蛋白基因单体gel.采用同向串联方式,构建了含6个单体的类人胶原蛋白表达载体pPIC9KG6,并经DNA测序鉴定.将pPIC9KG6电转化毕赤酵母(Pichia pastoris)经G418筛选得到多拷贝转化子,通过甲醇诱导表达类人胶原蛋白,SDS-PAGE检测表明:初步表达的类人胶原蛋白为胞外产物,其表观分子量为112 ku.     

文心兰丛生芽继代增殖关键技术研究

为建立文心兰(Oncidium)丛生芽工厂化继代增殖途径技术体系,对培养基、激素种类、激素浓度配比和继代增殖次数等影响丛生芽增殖增殖分化的关键因子进行比较研究。结果表明:以文心兰花梗为外植体,添加2.5~3.0 mg/L TDZ与0.2~0.4 mg/L NAA组合和1g/L活性炭和亚硫酸钠后诱导丛生芽分化丛生芽或原球茎效果好。TDZ与NAA浓度比值为8.93或8.75时,丛生芽诱导分化率最高,为90.0%,增殖系数为6.0~7.4;丛生芽分化途径最佳继代增殖培养基为:1/2MS+10 g/L琼脂+30 g/L蔗糖+1g/LAC+1g亚硫酸钠+2.8 mg/LTDZ+0.32 mg/LNAA;经5-6代继代增殖培养后,丛生芽变异率仅为0.1%。     

体细胞核移植生产绿色荧光蛋白转基因猪

体细胞核移植转基因动物制作路线是目前生产转基因家畜的最佳方法. 绿色荧光蛋白(green fluorescent protein, GFP)转基因猪研究可以为转基因家猪育种、人类疾病模型和人类异种器官移植研究奠定良好的基础. 本研究对脂质体转染猪胎儿成纤维细胞的技术程序进行了筛选, 以绿色荧光蛋白基因转染后的阳性细胞作为体细胞核移植的核供体, 以体外成熟卵母细胞为核受体, 构建了绿色荧光蛋白转基因克隆猪胚胎, 并对重构胚在体外和体内发育情况以及绿色荧光蛋白表达情况进行了跟踪研究. 结果显示, 采用4.0 μL/mL脂质体转染试剂, 1.6 μg/mL质粒DNA, 转染6 h可以获得最佳的转染效果, 转染效率达3.61%; GFP转基因体细胞重构胚体外囊胚发育率为10%, GFP阳性胚胎率为48%; 重构胚移植于10头受体后, 有5头妊娠, 3头受体发育到期, 共出生克隆猪6头, 其中4头为GFP阳性, 经DNA检测确认为GFP转基因猪; 转基因克隆胚胎移植出生率为1.0%, 阳性个体出生率为0.7%. 结果表明, 脂质体转染试剂可以高效转染猪胎儿成纤维细胞, 获得的阳性细胞具有支持猪全程发育的潜能. 本研究对我国体细胞克隆转基因猪的研究具有重要的参考价值.     

三峡库区某滑坡稳定性分析及治理方案

结合滑坡实例,从滑坡地质环境出发,通过对滑坡变形特征机制和稳定性分析,认为前缘的临空面,坡体倾向与基岩面基本一致以及暴雨是诱发该滑坡的主导因素,并根据具体工程对治理方案进行了比较,提出了合理的治理方案。     

PbO对Pb(Zr0.52Ti0.48)O3陶瓷相成分的影响

采用固相反应法制备了一系列Pb(Zr0.52Ti0.48)O3压电陶瓷,研究了过量PbO对PZT陶瓷相成分的影响.用X射线衍射对陶瓷的相结构进行了分析,采用场发射扫描电镜对断面形貌进行表征,并用能谱仪对微观区域的陶瓷成分进行测试.实验结果表明:当PbO缺乏时,陶瓷上表面易出现由PbZrO3分解产生的ZrO2,下表面易出现PbTi3O7和焦绿石相.当PbO过量时,陶瓷微观区域的成分会发生波动,成分的一致性也将受到破坏.此外,过量PbO还将使PZT相结构发生向富钛方向的移动.采用先进的陶瓷制备工艺有助于克服成分波动和相结构变化现象.     

有机肥对水稻锦优 ８ 号农艺性状及产质量的影响

为探究有机肥对水稻产质量的影响，以水稻品种锦优８号为试验材料，设置４个不同施肥处理，分别为Ｔ1:春果肥(有机肥)施１６０ｋｇ/６６７ｍ２；Ｔ２:厌氧堆肥(有机肥)施２００ ｋｇ / ６６７ ｍ２ ；Ｔ３:化肥施用量为(复合肥６０ｋｇ＋尿素２５ｋｇ)/６６７ｍ２；Ｔ４:不 施用任何肥料，作为对照， 结果表明:(１)３ 种不同肥料的施用(Ｔ１、Ｔ２、Ｔ３)对锦优８号在田间农艺性状方面有着较大影响，但在碾米品质方面无较大影响。施用化学肥料(Ｔ３)在株高和分蘖上显著高于２种有机肥，但却在穗总粒数、结实率、穗长和千粒重上低于２种有机肥(２)在产量上施用肥春果肥(Ｔ１) 和厌氧堆(Ｔ２) 与化肥(Ｔ３) 相比，虽然产量分别降低了 ３.９５％和 ７.８２％?但差异没有统计学意义。同时由于有机肥对土壤和环境的友好性，因而使用春果肥和厌氧堆肥这２种有机肥，特别是产量更高的春果肥在水稻生产中代替化肥是可行的?