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本文利用DNA体外重组技术,将氧化亚铁硫杆菌染色体DNA的Hind Ⅲ酶切片段插入启动子探测质粒pSDSI(Ap~r,Tc~s,5.65kb)的Hind Ⅲ位点上,获得了一批具有启动子活性的染色体DNA片段.其中抗性最强的一株可在240μg/ml的四环素平板上生长,对此抗性最强的质粒pSDRF12进行了限制性酶切图谱分析,并利用其上的PstI和EcoRI位点分别酶切,得到了两个亚克隆pSDRF121和pSDRF122.新构建的两个亚克隆在其氧化亚铁硫杆菌启动子后只有一个Hind Ⅲ位点,可通过该位点插入外源目的基因,进一步观察其表达情况。 相似文献
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氧化硫硫杆菌重组质粒pSDT125在RP4质粒的带动下以高出pBR325两个数量级的频率在大肠杆菌之间转移.转移后,RP4和pSDT125以分离的形式共存于接合转移子中.该质粒不能被SM10菌株染色体上的tra基因带动转移.以pSDT125质粒为基础,通过亚克隆构建了两个质粒pSDT1250,pSDT1251.二者可以被RP4质粒带动在大肠杆菌之间转移,转移频率与pSDT125相近,没有明显降低.还构建了含有氧化硫硫杆菌质粒pTt12片段的穿梭质粒pSDM211,可以被RP4带动在大肠杆菌与氧化硫硫杆菌之间转移.通过限制性内切酶分析,初步将pTt12的复制原点确定在3.0kb的片段内. 相似文献
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氧化硫硫杆菌重组质粒pSDT125在RP4质粒的带动下以高出pBR325两个数量级的频率在大肠杆菌之间转移。转移后,RP4和pSDT125以分离的形式共存于接合转移子中。该质粒不能被SM10菌株染色体上的tra基因带动转移。以pSDT125质粒为基础,通过亚克隆构建了两个质粒pSDT1250,pSDT1251。二者可以被RP4质粒带动在大肠杆菌之间转移,转移频率与pSDT125相近,没有明显降低。 相似文献
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从山东鄄城味精厂周围环境和发酵裂解液中分离得到三株噬菌体(Tp—1、Tp—2、Tp—3).电镜观察表明三株噬菌体在形态上是相似的,头部呈多面体,尾部细长,无鞘,属于长尾噬菌体类.DNA 的 EcoR Ⅰ和 Pst Ⅰ酶切分析结果表明在噬菌体 Tp—1和 Tp—2之间有一定差异.同时对噬菌体的寄主范围,感染特性,热稳定性和 pH 稳定性作了分析. 相似文献
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RP_4质粒在兼性自养多能硫杆菌中的接合转移 总被引:1,自引:0,他引:1
本实验以大肠杆菌(Escherichia coli)HB101(RP_4)作为供体菌,以多能硫杆菌(Thiobacillus versutus)作为受体菌,通过接合的方法将RP_4质粒转移到了多能硫杆菌中.接合频率为1.9×10~(-5),RP_4质粒的三个抗性基因(Ap~R、Tc~R、Km~R)在多能硫杆菌中均得到了表达.再将RP_4质粒从多能硫杆菌反向转移到大肠杆菌HB101菌中,接合频率为3.3×10~(-1)~7.3×10~(-1),三个抗性基因也均得到了表达.实验证明,多能硫杆菌对于RP_4质粒既是一个受体菌,也是一个很好的供体菌. 相似文献
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硫杆菌是一类自养细菌,由于它能在完全无机的环境中生长,并且在细菌浸矿、煤和石油的脱硫以及工业废水的处理等许多方面发挥着重要的作用,因此越来越引起人们的重视。但在实际应用中,硫杆菌还存在着许多缺点,这就需要用遗传工程的方法对菌株进行改造。首先碰到的问题是载体。在遗传工程中,一般常用噬菌体和质粒作为载体。但从已报导的文献来看,在嗜酸性细菌中还没发现有噬菌体存在,因此人们的注意 相似文献