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利用PCR技术从含有人和小鼠IL-5基因的质粒pORF9-hIL-5和pORF9-mIL-5质粒中扩增出人和小鼠IL-5基因序列,然后利用基因工程技术将人和小鼠IL-5基因序列分别插入原核表达质粒pQE30,获得人和小鼠IL-5重组表达质粒pQE-hIL-5和pQE-mIL-5.用酶切和DNA序列测定方法证实pQE-hIL-5和pQE-mIL-5正确后,转化感受态大肠杆菌JM109.用IPTG诱导表达重组蛋白,表达产物经Ni-NTA亲合层析进行分离纯化,最后用SDS-PAGE和免疫印迹法进行鉴定.结果表明:琼脂糖凝胶电泳发现PCR扩增的人和小鼠IL-5基因序列相对分子质量大小和预期值一致,酶切pQE-hIL-5和pQE-mIL-5片段和预期值相符,DNA序列测定插入的人和小鼠IL-5 PCR产物基因序列和阅读框架正确无误.重组蛋白质在大肠杆菌中获得稳定表达,表达的重组蛋白相对分子质量与预期值相一致,纯化的蛋白浓度达93%以上,抗组氨酸抗体可特异性识别hIL-5和mIL-5重组蛋白. 相似文献
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韩忠 《中国新技术新产品精选》2011,(17):225-225
现场施工中,加强对建筑施工现场进行科学化管理,能有效地消除安全隐患的发生,增加对建筑材料等的利用率,同时为建筑企业节约成本,提高建筑质量,还能减少对环境的污染,这样更有利于建筑企业的发展,使企业在竟争之中立于不败之地。 相似文献
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韩忠 《科技情报开发与经济》2003,13(7):155-156
从系统的设计、运行和经济分析方面入手,论证了变流量系统在现代化的大、中型供热系统应用的可行性,指出供热系统采用变流量系统可节约能源、降低成本,是系统优化的一项技术措施。 相似文献