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设计针对人端粒酶逆转录酶催化亚基(hTERT)的干扰靶序列GGAACACCAAGAAGTTCATCT,构建siRNA表达质粒PgenesilhTERT;随后将shRNA表达框克隆到入门载体pENTRTM1A,构建重组质粒pENTR/U6-hTERT-polyA;使用同源重组方式在体外将该表达框重组到腺病毒载体pAd/PL-DEST,得到重组腺病毒质粒pAd/U6 –TERT-polyA;线性化的重组腺病毒质粒在HEK 293细胞内包装为具有感染能力的病毒颗粒rAd-hTERT.同时构建不针对任何基因的shRNA阴性对照rAd-HK,空病毒对照rAd-blank和只含EGFP的rAd -EGFP.四种病毒经酶切、电泳分析表明插入序列正确,腺病毒载体构建成功.Western blotting测定转染后各组hTERT蛋白的表达情况,证实转染rAd-hTERT 48 h后,hTERT的表达明显被抑制.实验表明基于Gateway技术的腺病毒介导的shRNA载体构建成功,rAd-hTERT可有效抑制乳腺癌MCF-7细胞hTERT基因的表达.本研究为针对端粒酶的基因治疗奠定了实验基础. 相似文献
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冠醚对硷金属等的萃取已有很多研究,近期的如文献报道了K~ 、TI~ 的萃取平衡常数和最佳萃取体系的选择.关于锕系元素萃取研究的报道很少,文献报道了几种冠醚的二氯乙烷溶液对U(Ⅵ)、Np(Ⅳ)、Np(Ⅴ)、NP(Ⅵ),Pu(Ⅳ)和Pu(Ⅵ)硝酸盐的萃取,在不同的冠醚中,发现二环己基冠醚对四价Np、Pu有特别高的萃取能力,但几种冠醚对U(Ⅵ)的萃取能力都十分小.我们参照文献的结果,选择二环己基-18-王冠-6(DC18CR6)试验了对Th(NO_3)_4、ThCI_4和UCI_4的萃取,结果表明虽然U~(4 )、Th~(4 )的离子半径与Np~(4 )、PU~(4 )非常接近,但萃取行为完全不同,它们几乎完全不萃取.文献的萃取体系即使对四价锕系元素也不具有普遍有效性.本文在前文关于UO_2CI_2 相似文献
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本文提出了一个称为“有效吸附空间充填模型”的实用吸附模型。利用这个模型可以从纯组分平衡吸附容量算得二元吸附时的平衡吸附容量。将这模型与各种纯组分的吸附等温线公式结合,可以推导得出一系列二元吸附等温线公式。经与正癸烷-水二元混合物在5A分子筛上平衡吸附容量实验数据比较,发现下列公式的预测值与实验值的偏差最小,其均方根相对偏差为10%左右,能满足工程计算的需要。 相似文献
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文献研究了TBAN与MIBK对UO_2(NO_3)_2的萃取行为,证明它属于BC类协萃体系,并且提出了这类体系萃取机理的研究方法。但是到目前为止,对BC类协萃体系研究还很少,我们认为为了探明这类协萃体系的规律,一方面应当研究更多的体系,以便总结出共同的规律,另一方面应当继续选择典型的体系研究萃取机构,并进一步探索新的研究方法。本文继文献之后,研究了离子萃取剂硝酸四苯(钅申)(简称TPAsN)与MIBK对硝酸铀酰的萃取机构。 相似文献
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