芽孢乳酸菌产乳酸条件的研究

同型乳酸发酵菌株ＴＱ３３的主要产物为Ｌ－乳酸,论文对其适用的发酵培养基和最佳的发酵条件进行了讨论,认为ＴＱ３３在培养基配方为葡萄糖１０ｇ、酵母膏１．５ｇ;蛋白胨０．５ｇ;ＭｇＳＯ４·７Ｈ２Ｏ：０．０５ｇ;碳酸钙６ｇ（ｐＨ７．２－７．４）时,４０℃下振荡（１５０ｒ／ｍｉｎ．）培养２４ｈ后转入静置发酵阶段,发酵７２ｈ产酸量达到最高为６７．８ｇ／Ｌ,其中Ｌ－乳酸占９６％以上。     

产中性蛋白酶工程菌的构建及其发酵条件的初步优化

为构建1株产中性蛋白酶的工程菌株并对其发酵条件进行优化,以中性蛋白酶工业生产菌株枯草芽孢杆菌AS1.398的基因组为模板,采用PCR技术扩增获得中性蛋白酶基因npr,与高拷贝质粒pWB980连接并转入蛋白酶缺陷型菌株枯草芽孢杆菌WB600中得到重组工程菌WB600/pWB980-npr.在初筛平板上工程菌蛋白酶活力明显高于工业生产菌AS1.398,工程菌发酵活力可达1,398.3,U/mL.通过对其发酵工艺进一步优化,在接种量5%、装液量100,mL/500,mL、摇床转速180,r/min、温度34,℃的条件下发酵48,h,发酵液的酶活力可达2,487.5,U/mL,比优化前提高了78%.     

丝状真菌Sr18发酵过程中的形态学研究

通过扫描电镜对Sr18菌发酵过程中菌丝生长的形态进行观察，结果表明：在适宜的摇瓶培养条件下所形成的菌球直径多在1．5～2．0mm，内、外部菌丝较丰满，粗细均一，内部无明显空洞，菌体生理活性较强，其发酵滤液稀释为原浓度1／2的杀线虫活性可达90％以上；减少接种量或改变培养基配方多形成直径为4～5mm的空心大菌球，内层出现较明显空洞及大量干瘪菌丝，中间层含大量分生孢子头和孢子，代谢物的杀虫活性降到77．17％-25％；加大接种量降低转速则易形成直径小于1mm实心致密菌球，菌丝粗细不均匀，杀虫活性仅为67．5％。5L发酵罐发酵则多形成松散的菌丝团，菌丝丰满，粗壮，菌体生理活性状态良好，积累代谢产物能力强，杀虫活性为95％以上。     

果胶裂解酶液态发酵条件的研究

通过单因素及正交实验对黑曲霉(Aspergillus niger)产生果胶裂解酶的发酵条件进行优化,研究了该酶的性质。实验表明,该酶的最适产酶培养基组成为(g·L-1):麸皮60,玉米秸杆40,尿素20,K2HPO4·3H2O 2．0,KCl 7．0,CaCO310．0。最适培养条件为:初始pH 6．0,30℃,接种量8％,培养2 d,此时酶活力为8．47 U／mL。该酶的最适温度50℃,最适pH 6．0。     

杯碟法检测乳酸菌素活性优化条件的研究

对杯碟法检测乳酸菌素活性的主要影响因素进行了研究,结果表明,在含指示菌１０６个／ｍＬ的ＹＰＮ培养基中加入１％吐温８０,０．００２％次甲基兰,并将ｐＨ调至５．０为其最佳检测条件     

白腐菌对秸秆中木质素生物降解的研究

研究了白腐菌及其产生的木质素降解酶系对秸秆的木质素生物降解方法，探讨了黄孢原毛平革菌和杂色云芝单一菌株生物降解及双菌株联合降解木质纤维素的规律，白腐菌双菌联合固态培养可使木质素降解率达到47．64％，脱木素选择性为4．74．采用模拟大规模白腐菌堆积培养（厚度30cm）的方法降解秸秆木质素，培养30d，木素降解率为32．54％，表明此方法是一种可行的大规模生物顸处理方法．     

潘糖标准品的制备与应用可行性评价

潘糖是低聚异麦芽糖中的关键组分,具有较高的科研利用价值.但是其价格昂贵,且在市场上不易购买,限制了低聚异麦芽糖的相关研究与应用.本研究通过高效液相色谱-蒸发光散射检测法对低聚异麦芽糖产品的全组分进行定性分析,鉴定了其主要功能性成分.采用高效液相色谱-示差折光检测法对关键组分潘糖进行分离纯化.所获得潘糖的平均纯度、平均回收率、精密度实验的相对标准偏差和重复性实验的相对标准偏差分别为(98.43±0.25)%、(96.20±0.73)%、0.25%和0.27%,,并且它可在2~8℃条件下稳定保存至少12个月.因此,该潘糖产品符合2015年版中华人民共和国药典的相关规定,可作为二级标准品使用.这为低聚异麦芽糖的相关研究与应用提供了基础材料.     

大豆为原料的根霉纤溶酶固态发酵工艺条件

研究了以大豆为原料华根霉TK317产纤溶酶固态发酵的工艺条件。采用单因素试验对固态发酵培养基的碳源、碳氮比、初始pH、加水量和温度进行了优化;采用正交试验对接种量和培养基厚度进行了研究。结果表明,实验范围内华根霉TK317固态发酵产纤溶酶的适宜培养基组成:m(面粉)∶m(大豆)=1∶9,初始pH为5.0,加水量为0.75 mL/g。适宜培养条件:培养温度为28℃,培养基厚度为15 g/250 mL三角瓶,接种量1×107个/g,培养时间为60 h。优化条件下的纤溶酶产量平均达480.52 U/g。     

Bacillus subtilis碱性果胶酶基因在大肠杆菌中的克隆和表达

针对实验室筛选获得的Bacillus subtilis,设计2对引物扩增出编码碱性果胶酶基因pelG1和pelG2,酶切后分别连接到大肠杆菌分泌表达载体pET-22b(+)多克隆位点上得到重组载体,在BL21( DE3)中表达并进行了分析.     

理性设计降低碱性蛋白酶的胶原降解活力

以克劳氏芽胞杆菌来源的碱性蛋白酶(PRO)为研究对象,运用HotSpot Wizard 3.0设计了PRO在Gly97-Gly102 loop区的突变库,筛选得到了胶原蛋白降解活力显著降低的G97E突变体.G97E突变体的碱性蛋白酶活力和胶原蛋白降解活力分别为野生型PRO的91.97％和65.84％;最适温度和最适pH...