小鼠睾丸发育过程中Si1基因表达的研究

 以1天龄、未成熟(3周龄)、成熟期(10周龄以上)的昆明正常小鼠睾丸组织为实验材料,利用地高辛标记的Si1基因探针在其组织切片上进行DNA-mRNA分子原位杂交,探讨Si1基因在小鼠睾丸发育过程中的表达变化.同时,分别在生后15,20 d及25 d的昆明小鼠睾丸组织切片上进行凋亡细胞原位检测,验证小鼠睾丸上述发育时期的细胞凋亡情况.结果发现:①Si1基因在1天龄小鼠的睾丸组织生精上皮内无杂交信号;在未成熟小鼠的睾丸组织部分生精上皮内有极强的杂交信号;在成熟小鼠的睾丸组织生精上皮内无杂交信号.②小鼠睾丸组织生精上皮内,凋亡细胞数从生后第15-20天呈增加趋势,于生后第20天出现峰值,生后第25天又降低.上述结果表明Si1基因可能参与了小鼠睾丸的发育过程,在小鼠睾丸发育的特定时期发挥作用,由于Si1基因的表达与小鼠生精细胞凋亡发生的时期同步,表明该基因可能与小鼠睾丸发育过程中的细胞凋亡有关.     

利用RIG质粒在大肠杆菌中有效表达转录因子类蛋白

 大肠杆菌是常用的基因工程蛋白表达系统宿主菌,而密码子偏倚性常常成为某些异种蛋白质在大肠杆菌中成功表达的障碍.利用含有编码多种稀有tRNA的重组质粒RIG,一个含有大量稀有密码子的人类线粒体转录终止因子样蛋白成功地在大肠杆菌中得到表达.证明使用RIG质粒是克服大肠杆菌密码子偏倚性的有效手段.     

酪氨酸磷酸酶引起生物学家的兴趣

随着研究人员对于在细胞生长控制和癌变中起关键作用的一类酶的研究,酪氨酸磷酸酶的数量在迅速增加。在过去2年里,一个使生物学家感到惊讶的新研究领域得到迅速发展,这就是对以前并未预料到的蛋白酪氨酸磷酸衡的研究。它使人们非常兴奋,因为它可能就是长期寻找的,对抗一类人们所熟知的所谓酪氮酸激酶的酶。     

血清对人脑胶质瘤细胞株U251基因表达的影响

利用分子原位杂交和定量PCR技术分析新生小牛血清培养和无血清培养的人脑胶瘤细胞株U2 5 1的基因表达 ,发现血清对细胞周期正调控基因cdc2基因和PCNA基因的表达有激活作用 ,而对细胞周期负调控基因 p2 1和 p16基因的表达有抑制作用 .这些事实表明 ,血清刺激细胞生长时 ,一方面要激活促进细胞增殖的基因 ,另一方面要抑制或关闭抑制细胞增殖的基因     

体外细胞株G_0期同步化模型建立及分析

通过对U251,QGY,Hela3个细胞株进行血清剥夺培养,建立起有较好的同步化效果的U251同步化模型.细胞同步化后,转入血清培养基培养,在24h内分10个时间点收集血清恢复培养不同时刻的细胞样品,应用流式细胞仪测定周期进行情况.结果显示,在0.25和8h,有2个重要的G1/S转变点,提示血清剥夺造成的G0期同步不是由G1/S检查点所控制,而是另有值得深入研究的控制点.     

4种不同血清样本处理方法对双向电泳效果的影响

 比较了常规处理、透析除盐处理、TCA-丙酮法和蛋白质A/G亲和柱处理血清样本对双向电泳分离效果的影响,结果显示4种方法中蛋白质A/G亲和柱处理方法可以获得较好的分离效果.     

瑞氏木霉β-内切葡聚糖酶的纯化及其部分酶学性质研究

 利用盐析、SephadexG-75和DEAE-SephadexA50层析,从瑞氏木霉TrichodermareeseiQM9414发酵液中纯化了2个具有β-内切葡聚糖酶活性的组分Eg1和Eg2,分子质量分别为65.47ku和57.04ku.其最适温度分别为50℃和55℃,最适pH分别为4.8和5.0,米氏常数Km分别为3.76×10^-2g/L和4.20×10^-2g/L.根据其酶学性质,这是一类不同于已有的β-内切葡聚糖酶,为瑞氏木霉T.reeseiQM9414所产β-内切葡聚糖酶的进一步研究奠定了基础.     

免疫沉淀法分离纯化感染细胞保的甲肝病毒RNA

本研究采用抗血清（多抗血清）沉淀甲肝病毒，并用盐酸胍－酸性酚，氯仿一生法分离纯化病毒ＲＮＡ。此方法能排除非病毒ＲＮＡ的污染，操作简单，要求条件较低，ＲＮＡ的纯度和完整性都较好。     

一个人类线粒体转录终止样因子基因的克隆

比较血清培养细胞和血清饥饿细胞的基因表达差异,获得了一段血清饥饿细胞中表达的cDNA序列,通过搜索表达序列标签(EST),拼接出完整的基因序列,通过PCR克隆获得全长cDNA序列.该基因全长1472bp,编码框预测有365个氨基酸.GenBank搜索,该基因与已有的人类线粒体转录终止因子有较大的同源性.所以,该基因可能是一个线粒体转录终止样因子.