线粒体参与了三尖杉酯碱诱导的HL-60细胞凋亡

用流式光度术研究了三尖杉酯碱诱导人早幼粒白血病ＨＬ－６０细胞及其转染了ｂｃｌ－２基因的细胞株ＨＬ－６０／Ｂｃｌ－２线粒体膜电势的变化,数据表明线粒体损伤介导了ＨＴ诱导的ＨＬ－６０细胞的凋亡过程。     

水霉生长菌丝顶端钙调素抑制剂三氟啦嗪的荧光染色图谱

水霉Ｓａｐｒｏｌｏｅｇｎｉａｆｅｒａｘ菌丝经戊二醛固定、１０－４ｍｏｌ／Ｌ三氟啦嗪（ＴＦＰ）染色后，表现出明显的从菌丝顶端到后部的ＴＦＰ荧光梯度．最大荧光强度集中在菌丝顶端区域，约３０μｍ以后变得微弱而均匀，顶端高强度的ＴＦＰ荧光区域随着菌丝顶端生长终止而消失并出现在新的生长菌丝顶端．而未经固定菌丝的ＴＦＰ荧光梯度消失，并可观察到菌丝细胞内原生质发生重新分布．我们的结果说明ＴＦＰ染色菌丝之前预先对菌丝进行固定是必要的．纠正了ＨａｕＢｅｒｅｔａｌ（１９８）［４］关于菌丝顶端不存在钙调素梯度分布的报道，并进一步揭示钙调素可能参与了菌丝顶端生长的调节作用．     

血卟啉衍生物(HPD)在静止态(G_0期)和增殖态(周期细胞)小儿包皮原代培养细胞中的摄取和潴留

血卟啉加光作为肿瘤诊断和治疗的方法近来受到更多的重视并在临床方面得到一定应用。但对HPD的作用机制了解甚少。给患者注入HPD 72小时后肿瘤组织比其周围正常组织保留了较多的HPD荧光,但作为正常增殖组织的皮肤也保留了HPD,甚至一个月后仍对强的日光敏感。至于静止态(G_0期)细胞即保持了增殖能力但不进行增殖的细胞,是否也潴留HPD而对光敏感?这方面的研究也很少见报道。     

MPV Ⅱ显微分光光度计的扩大应用——一个新的程序设计

我们的 MPVⅡ显微分光光度计是1975年从西德 Leitz 工厂购进的,1980年又购进与它联机操作的 HP-9825 S 计算机和 Tektronix 4006-1显示终端及部分软件.这台仪器能对显微镜分辨本领之内的微小区域进行多种光度测量,例如测量微区的透射光、反射光、荧光以及光程差等,在医学、生物学等领域内获得广泛应用.近年来,我们利用它开展了细胞组织化学、细胞免疫荧光、显微放射自显影,整体放射自显影等方面的研究.但是由     

Bcl-2和Caspase-3在HT诱导的HL-60细胞凋亡中的作用

利用常规的HL－60细胞和转染了 bcl－2基因的HL－60/Bcl-2细胞及转染了空载体的对照HL－60／neo细胞为模型,研究Caspase-3及过表达的Bcl-2对凋亡过程中的各种生化,形态学特征的影响,探讨了Caspase-3及Bcl-2在三尖杉酯碱（HT）诱导的HL－60细胞凋亡中的作用,研究表明,Caspase-3的湃化在HT诱导的HL－60细胞凋亡中处于关键地位,导致了质膜出泡,PS翻转,染色质凝集,DNA断裂及凋亡下游的发生,而Bcl-2则通过抑制aspase-3的活化抑制了凋亡的发生,同时还证明,在HT诱导的HL－60细胞凋亡中,通常被认为是凋亡早期特征的磷脂酰丝氨酸PS翻转并不是一个早期特征,它至少晚于Caspase-3的活化,甚至不早于质膜出泡及染色质凝集。     

v-src,Ca~(2+),PKC和cAMP对3T3-tsLA90细胞间隙连接通讯的调节

以3T3-tsLA 90细胞为正常和转化细胞模型,采用划痕标记染料示踪技术,初步研究了 v-src 基因及 Ca~(2+)-钙调素,蛋白激酶 C,cAMP 等细胞内信号物质对细胞间隙连接通讯的调节作用.40℃时正常表型的细胞间隙连接通讯正常,33℃时转化表型的细胞间隙连接被阻断.用 v—src 基因产物抑制剂、钙通道抑制剂、钙离子载体、钙调素和蛋白激酶 C 抑制剂及 cAMP研究了对细胞间隙连接的作用.当3T3-tsLA 90细胞由40℃转移到33℃时,v-src 基因活化,其产物 pp 60~(v-s c)通过 Ca~(2+)-CaM 和 DG-PKC 通路及 cAMP 系统相互作用对细胞间隙连接通讯功能起下降调节作用,从而导致细胞呈转化表型状态.     

流式细胞光度术的初步建立——在MPVⅡ显微光度计基础上改装的流式细胞光度计

流式细胞光度术(Flow Cytometry)是六十年代末发展起来的一项新技术。它可以在细胞群体中对单个细胞逐个进行高速的定量分析和分类,从一个细胞中可同时测得蛋白质、DNA、细胞体积及核与细胞直径比例等多种参数,具有高速度多信息分析的特点,是研究细胞生物学、免疫生物学、体细胞遗传学、生物化学、肿瘤学的有力手段。目前使用的流式光度计基本上有两种类型:一种是以汞灯作光源,在落射光照明条件下,激发通过流动室的细胞悬液,测量细胞发出的荧光强度,另一种是以激光激发按重力方向流动的细     

~(57)Co(钴~(57))-争光霉素掺入人食管鳞癌细胞株CaEs—17的增殖周期时相

我国自行筛选的抗肿瘤抗菌素-争光霉素与博莱霉素的理化性质基本相同。~(57)Co-争光霉素A_2+B_2混合品和A_5纯品掺入人食管鳞癌细胞株CaEs—17的放射自显影图表明~(57)Co-争光霉素(混合品和A_5)掺入到CaEs—17细胞核中,核仁掺入很少,胞质不掺入。这和博莱霉素与DNA的特异性结合、并与DNA相互作用、而不与rRNA、tRNA、血清白蛋白结合和作用的结果是一致的。从而在细胞内定位方面说明了争光霉素与DNA结合的特异性。通过~(14)C-TdR与~(57)Co-争光霉素同时掺入及先后掺入的双标记放射自显影图和显微分光光度计对标记和未标记细胞DNA相对含量测定等方法,证实了~(57)Co-争光霉素(混合品和A_5)掺入到含有G_1/G_0DNA含量的CaEs—17细胞中。